八面蒙脱石联合莫沙必利灌胃对急性坏死性胰腺炎大鼠回肠NF-κB活化的影响

目的 探讨八面蒙脱石对急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠回肠黏膜NF-κB活化的影响.方法 120只雄性SD大鼠按完全随机法分为假手术组、ANP组、莫沙必利组、八面蒙脱石组和莫沙比利+八面蒙脱石(联合)组,每组24只大鼠.采用胰胆管内逆行注射牛磺胆酸钠诱导大鼠ANP模型;假手术组开腹注射生理盐水后关腹.各治疗组于造模前30 min分别给予相应药物灌胃1次.术后3、6、12 h分批处死动物.取胰腺组织行病理检查;取血测定TNF-a、IL-1水平;取回肠观察超微结构的改变;免疫组化法检测回肠黏膜NF-κB的表达;Western blotting法检测回肠组织IκBa水平.结果 与假手术组比较,ANP组胰腺损伤明显,血TNF-a、IL-1水平明显升高[(36.79±1.14)pg/ml对(9.00±0.01)pg/ml,(25.17±1.93)ng/ml对(3.45±0.11)ng/ml,P值均＜0.05],回肠绒毛高度显著下降[(0.25±0.22)×10~(-6)m对(1.50±0.33)×10~(-6)m,P＜0.05],柱状细胞指数显著降低[(2.40±1.65)×10~6个/m对(13.5±4.28)×10~6个/m,P＜0.05],NF-κB表达增加(6.92±1.54对1.28±0.29,P＜0.05),IκBa蛋白水平下降(3.30±1.99对24.32±1.93).莫沙必利组和八面蒙脱石组的各项指标与ANP组均无显著差异.联合组的血TNF-a、IL-1水平[(30.57±0.39)pg/ml和(13.45±1.26)ng/ml]、回肠绒毛高度和柱状细胞指数[(1.05±0.28)×10~(-6)m和(10.10±2.50)×10~6个/m]、NF-κB活化(4.32±1.57)和IκBa蛋白水平(15.99±1.26)均与ANP组有统计学差异(P值均＜0.05).结论 八面蒙脱石联合莫沙必利灌胃能减少ANP大鼠回肠黏膜NF-κB的大量激活,减轻胰腺和回肠黏膜的损伤程度.     

人脐带间充质干细胞与肝细胞共培养可分化为肝样细胞

背景：文献报道,从骨髓与脐带中分离获得的间充质干细胞可在体外连续传代培养,仍保持干细胞的特性,并在多种细胞因子的“鸡尾酒式”诱导下分化为肝细胞样细胞。 目的：进一步验证人脐带间充质干细胞在体外正常人肝细胞共培养体系下是否可分化为肝细胞并探讨其分化方法。 方法：采用贴壁法,从脐带中分离培养间充质干细胞,流式细胞仪检测脐带间充质干细胞表面标志。人肝细胞LO2细胞与人脐带间充质干细胞建立共培养体系,不添加外源诱导因子,分别于第7,14,21天,通过RT-PCR 法检测肝细胞特异标志物甲胎蛋白、白蛋白、人细胞角蛋白19 mRNA的表达,糖原染色进行功能鉴定。 结果与结论：从人脐带中可分离得到贴壁生长的间充质干细胞,其中CD29⁺细胞比例为96.02%,CD105⁺细胞比例为96.6%,CD34^-细胞比例为99.65%,CD105⁺CD29⁺双阳性细胞比例为94.84%。与LO2细胞共培养后第7天仅有甲胎蛋白阳性表达;第14天表达白蛋白、人细胞角蛋白19,第21天时,LO2与人脐带间充质干细胞共培养组未出现甲胎蛋白表达;人细胞角蛋白19和白蛋白的表达比第14天略有增强。共培养21 d后,糖原染色呈阳性。结果证实,无需额外添加外源诱导因子,脐带间充质干细胞可在人正常肝细胞共培养的微环境中,向正常肝细胞分化。     

肝癌Huh7干细胞样细胞的富集培养及鉴定

目的：建立一种体外有效富集、培养和鉴定具有肝癌干细胞特征的细胞亚群的方法。方法：采用成球培养法利用肿瘤干细胞样细胞（cancer stem cell, CSC）分化培养基对肝癌Huh7细胞进行富集培养,获得的干细胞样细胞于体外进一步扩增获得肝癌干细胞球。流式细胞术检测Huh7干细胞样细胞表面肿瘤干细胞标志物EpCAM、CD90和CD133的表达,平板克隆集落形成实验和裸鼠成瘤实验分别检测Huh7细胞和Huh7干细胞样细胞的克隆集落形成能力、体内成瘤能力。结果：Huh7细胞成球培养3~7 d后即可形成肝癌干细胞样细胞球,获得的干细胞样细胞具有自我更新和增殖能力,其EpCAM阳性细胞比例较Huh7细胞明显增加\[（99.6%±0.31）% vs（0.12%±0.05）%,P<0.01\],但两种细胞CD90\[(0.11%±0.06)% vs (0.09%±0.07)%, P>0.05\]和CD133\[(0.17%±0.08)% vs (0.15%±0.05)%, P>0.05]表达差异无统计学意义。Huh7干细胞样细胞克隆集落形成数量明显多于Huh7细胞\[（188.67±12.5）vs （79±16.7）个,P<0.01\];当接种量为5×104个细胞时,与接种Huh7细胞的对照裸鼠相比,接种Huh7干细胞样细胞的裸鼠成瘤时间更短（11 vs 30 d）,成瘤率更高（100% vs 16.67%）;接种5×105数量级的细胞时,实验组成瘤体积\[（171.90±10.94）vs（86.39±11.21）mm3, P<0.01\]和瘤体质量\[（2.98±0.82）vs（0.32±0.17）g, P<0.01\]均明显大于对照组。结论：利用成球培养法能够从Huh7肝癌细胞系中富集培养获得Huh7肝癌干细胞,其具有比Huh7细胞更强的成瘤能力。     

阴道镜下宫颈活检诊断CIN1中漏诊CIN2及以上病变的分析

目的 评价阴道镜下活检诊断CIN1的准确性,探讨漏诊CIN2及以上病变(简称CIN2+)的因素.方法 对109例阴道镜下活检诊断CIN1的患者施以宫颈环形电切术(LEEP),对照比较术前术后组织病理学诊断的符合率,并回顾性分析术前各因素与漏诊CIN2+的相关性.结果 LEEP前后CIN1的符合率52.29％(57/109),CIN1中CIN2+漏诊率47.71％ (52/109).宫颈细胞学ASC-H/HSIL、阴道镜检查Ⅲ型转化区、年龄＞40岁、HR-HPV DNA负荷量≥100 pg/ml均为漏诊CIN2+的独立高危因素(相对危险度分别为5.24、5.08、3.16、3.13).结论 阴道镜下活检诊断CIN1存在CIN2+的漏诊.先前细胞学的严重程度是目前诊治规范中选择随访或干预的依据,但转化区类型、年龄、病毒负荷量等也是个体化处理中需考虑的问题.     

对ASCCP 2012年宫颈癌筛查和癌前病变管理指南的解读(二)

宫颈癌病因明确,发展过程中存在较长的可逆性的癌前病变期,是可通过医学干预降低发病率和死亡率的恶性肿瘤。随着宫颈癌筛查的开展和推广,宫颈上皮内瘤变(CIN)患者逐年增多且有年轻化趋势。而对癌前病变的管理及干预是阻止浸润癌发生的重要环节。结合美国阴道镜检查和宫颈病理学会(ASCCP)2013年颁布的《2012年宫颈癌筛查和癌前病变全球共识指南》针对宫颈癌前病变的处理方式进行解读。新版指南更清晰提出各级别CIN的分层处理及CIN治疗后的联合随访的价值,对指导临床规范化处理具有重要的价值。     

谷氨酰胺对急性坏死性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障的保护作用及机制

重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)时的细菌感染主要是由于肠黏膜屏障破坏导致肠道细菌易位所致.谷氨酰胺作为肠黏膜的重要能源物质,同时也是核苷酸合成的重要底物,能够起到保护肠黏膜屏障,增强肠道免疫功能,降低炎症介质和细胞因子释放的作用.但其具体机制尚不清楚.本实验旨在评价谷氨酰胺灌肠对急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠肠黏膜屏障的保护作用,探讨其机制.     

评价Astograph乙酰甲胆碱激发试验对支气管哮喘的诊断价值

目的评价Astograph气道激发试验在诊断支气管哮喘(简称哮喘)中的价值。方法北京朝阳医院门诊就诊哮喘患者56例,非哮喘患者90例于激发试验前后均进行一次脉冲振荡及肺通气功能测定,分析激发试验前后患者的呼吸阻力、肺通气等的变化情况。结果①56例哮喘患者中激发试验阳性者52例,阳性率为92.9%(52/56),90例非哮喘患者中激发试验阴性者42例,阴性率为46.7%(42/90);哮喘组与非哮喘组脉冲振荡频率5 Hz及35 Hz时测得的呼吸阻力(R5、R35)、呼气峰流量(PEF)、第1秒用力呼气量(FEV1)、用力肺活量(FVC)的激发前后变化率及最小诱发累积剂量(Dmin)等差异均有统计学意义(P<0.05);②Dmin≤6 Unit作为阳性标准时其诊断哮喘的敏感性为71.2%,特异性为74.4%,准确性为53.0%;若同时以FEV1下降20%作为阳性标准,则可以显著提高其诊断哮喘的特异性。结论Astograph法气道激发试验有助于支气管哮喘的诊断,其中Dmin≤6 Unit作为阳性标准有较好的特异性及敏感性,若加做FEV1检查更能提高其特异性。     

自动气囊止血带止血失败的原因及对策

本文就我院5年来四肢手术中使用气囊止血带止血失败的病例进行回顾,对失败原因进行总结分析,提出相应的防范措施,现报道如下. 临床资料 本院手术室2005年3月至2010年7月,2409例四肢手术患者使用自动气囊止血带.男1312例,女1097例.年龄5～78岁.按体重指数分类:中重度肥胖52例,消瘦38例.手术切口位于上臂271例,前臂370例,手部461例.大腿396例,小腿450例,足部461例.其中21例止血失败,延长手术时间.     

基于供方的医养结合养老服务现状与问题的质性研究

背景　人口老龄化已成为我国面临的重大挑战之一,加之目前老年人口疾病负担加重,现代家庭养老能力弱化,养老机构供需不平衡,在目前的养老现状下,建立医养结合养老服务已成为大势所趋。目的　了解社区卫生服务中心医养结合养老服务的供应现状和开展过程中存在的问题,为更好地开展养老服务提供可行性意见。方法　2019年9-11月从朝阳区40家社区卫生服务中心各选择1名管理人员或从事医养结合养老服务工作的人员开展个人访谈,访谈内容包括访谈对象的基本信息、社区卫生服务中心人员及设备情况、访谈对象对医养结合养老服务的认知、社区卫生服务中心医养结合养老服务的开展情况及面临的问题4个部分,运用Colaizzi现象学资料七步分析法对访谈资料进行分析。结果　本研究总共回收39份有效访谈内容,回收有效率达97.5%。共提炼出七大主题：护理人员数量不能满足需求;接受过老年医学培训的医护比例较低,各中心之间差异较大;社区卫生服务中心之间康复设施发展建设不平衡;管理人员医养结合养老服务认知不统一;医养结合项目中,养老服务开展比例偏低;医养结合养老服务存在多头管理的现象;人员数量、执业、政策、资金等方面的风险较为突出。结论　健全人才培养模式和激励措施、健全相关政策及法律法规、完善长期护理保险制度试点、引导多元资金注入、丰富医养结合养老服务项目,推进社区卫生服务中心开展更高质量的医养结合养老服务。