姜黄素对结肠癌细胞SW620的体外抑制作用及作用靶点的虚拟筛选

目的:探讨姜黄素对结肠癌SW620细胞的增殖抑制效果和诱导凋亡的作用及虚拟筛选相关作用靶点。方法:以不同浓度的姜黄素作用于体外培养的结肠癌SW620细胞,通过MTT法检测姜黄素对细胞生长的抑制作用,倒置显微镜下观察细胞的形态变化,透射电镜观察细胞凋亡时的超微形态变化,流式细胞仪检测细胞凋亡情况;计算机辅助设计对作用靶点进行虚拟筛选。结果:MTT实验显示姜黄素可抑制SW620细胞的生长,显微镜下可观察到细胞肿胀、破裂、呈坏死状,透射电镜下观察发现细胞体积缩小,细胞核固缩,核内染色质凝集,内质网扩张,空泡形成增多,出现明显的凋亡现象。流式细胞仪可检测到细胞凋亡率增加,呈时间及浓度依赖性;虚拟筛选出19个可能的作用靶点。结论:姜黄素通过诱导细胞凋亡的方式有效地抑制SW620细胞的生长。     

构建糖氧剥夺模型大鼠少突胶质细胞体外培养与分离纯化

目的:对原有少突胶质细胞祖细胞培养与分离纯化方法进行改进,以简单、高效获得少突胶质细胞并建立少突胶质细胞糖氧剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)模型。方法:取SD乳鼠脑皮质,采用两种不同的细胞增殖法和两种不同的分离纯化法分四组培养,分别为细胞因子增殖联合摇床震荡分离纯化法组,B104CM增殖联合摇床震荡分离纯化法组,细胞因子增殖联合EDTA消化机械吹打分离纯化法组,B104CM增殖联合EDTA消化机械吹打分离纯化法组。倒置显微镜下观察神经细胞形态学变化并进行细胞计数。A2B5和髓鞘碱性蛋白鉴定少突胶质细胞并分析其纯度。纯化后的少突胶质细胞祖细胞分化培养3 d后分四组培养,正常组正常培养,低氧组分三组,换无糖DMEM培养基,OGD 1、2、3 h。然后采用MTT比色法检测细胞活力;流式细胞术分析细胞的凋亡率。结果:(1)B104CM增殖联合EDTA消化机械吹打分离纯化法较其他3种培养方法收获的少突胶质细胞祖细胞数量多(P0.05)。(2)A2B5和MBP特异性标记,细胞纯度可达到95%。(3)MTT结果显示:OGD 1 h少突胶质细胞的细胞活力即降低(P0.05),随着缺氧时间延长细胞活力呈降低的趋势更加明显(P0.05)。(4)流式细胞测细胞凋亡的结果显示:OGD 1 h、2 h、3 h,细胞的凋亡率分别为14.43%±0.20%,21.99%±0.42%和44.71%±0.20%,均高于正常对照组(6.86%±0.05%,P0.05)。结论:(1)B104CM增殖联合EDTA消化机械吹打分离纯化培养法与其他三种方法比较实验操作简单,收获的少突胶质细胞祖细胞数量最多,可用于少突胶质细胞的培养。(2)OGD可致少突胶质细胞损伤,且与OGD持续时间密切相关,实验成功的建立OGD损伤模型。     

经食管床与经胸腔行胃食管吻合术后并发症的对比分析

目的:评价经食管床与经胸腔行胃食管吻合术后并发症的发生率。以探讨理想的手术方式。方法:选取1998年至2004年间行手术治疗的286例食管癌患者,148例患者经食管床行胃食管弓上吻合术,138例患者经胸腔(弓前)行胃食管吻合术。对两组患者术后并发症进行归纳、对比。结果:两组病例术后并发症的发生率具有差异性。特别是心肺并发症,差异有显著性(P<0.01)。结论:两种术式相比,经食管床行胃食管吻合术术后并发症显著减少。     

低分子肝素钙治疗恶性肿瘤合并血栓栓塞症60例疗效分析

目的:探讨低分子肝素钙(速碧林)治疗恶性肿瘤合并静脉血栓栓塞症(venous thromboembo-lism,VTE)的疗效及安全性。方法:回顾性分析2007年8月-2011年7月发生静脉血栓栓塞症的60例恶性肿瘤患者应用速碧林治疗后的转归情况。采用χ2检验分析疗效与各临床因素的相关性及二次血栓发生与各临床因素的相关性;Kaplan-Meier及COX回归分析临床因素与预后的关系。结果:经过皮下注射速碧林治疗,36例(60%)患者的血栓完全缓解(CR);21例(35%)部分缓解(PR);3例(5%)病情稳定(SD)。治疗过程中无严重并发症出现,速碧林的疗效与患者性别、年龄、肿瘤类型、分期、是否吸烟、是否静脉置管、风险评分、治疗时间的长短、血栓时症状的多少、化疗药物的种类、是否合并使用抗血管生成药物、血小板和D-二聚体计数等因素无明显相关性。血小板异常患者二次血栓的发生率明显高于血小板计数正常患者(33.3%vs 2.0%,P=0.009)。单因素分析提示分期早(I,II期)、治疗时间大于30 d和风险评分高(5分以上)的患者预后较好,但多因素分析表明只有分期和风险评分是独立的预后因素。结论:速碧林治疗恶性肿瘤合并血栓栓塞症安全有效,分期早和高风险的患者更能从抗凝治疗中受益。     

Nuss手术与改良Ravitch手术治疗小儿漏斗胸的疗效对比观察

目的对比观察微创Nuss手术与改良Ravitch手术治疗小儿漏斗胸的效果。方法将135例漏斗胸患儿随机分为两组,分别采用Nuss手术（Nuss组,69例）及改良Ravitch手术（改良组,66例）治疗。结果两组术后均无严重并发症,随访1个月~3 a畸形胸廓均恢复正常。与改良Ravitch组比较,Nuss组手术时间缩短,术中出血量减少,术后呼吸机辅助时间及住院时间缩短,住院费用减少,P均〈0.01。结论两种术式效果均较好,与改良Ravitch手术相比,Nuss手术创伤更小,患者术后恢复快。     

5-氟脲嘧啶对L_(1210)细胞中低分子量核RNA的合成及甲基化反应的作用

5-FU的抗肿瘤作用过去一直认为是由其代谢产物FdUMP封闭胸苷酸合成酶,从而抑制DNA的合成而产生的。但这种生化损伤,即DNA合成的抑制却从末明确证实过。因为一些不经过胸苷酸合成酶的同位素标记的DNA前体,仍然可以用正常或加速的速度编进DNA中。这些实验结果说明5-FU的的细胞毒性至少在某些肿瘤中是可以归结为对其他一些新陈代谢过程,例如RNA的合成的干扰。 5-FU对肿瘤细胞中RNA的合成的影响已经过     

食管癌组织中p53蛋白表达的临床意义

目的：探讨ｐ５３蛋白表达在食管癌中的临床意义。方法：用鼠抗人ｐ５３单克隆抗体,以ＳＰ免疫组化法检测ｐ５３蛋白。结果：ｐ５３蛋白阳性表达率为５６．３％,其表达与肿瘤大小、ＴＮＭ分期,有无淋巴结转移无关（Ｐ〉０．０５）,与肿瘤分化程度有关（Ｐ〈０．０１）。ｐ５３蛋白阳性组与阴性组比较,其术后生存率有显著差异（Ｐ〈０．０１）。结论：食管癌组织中ｐ５３蛋白表达与肿瘤大小,ＴＮＭ分期及有无淋巴结转移无关,与     

基质金属蛋白酶MMP-2 mRNA在糖尿病苍鼠视网膜中的表达

目的:探讨基质金属蛋白酶(MMP-2)在糖尿病视网膜病变(DR)发生发展中的作用及其机制. 方法:用链脲佐菌素(STZ)诱导苍鼠糖尿病模型,提取视网膜中总RNA,半定量RT-PCR观察视网膜中MMP-2 mRNA表达情况,HE染色观察光镜下视网膜的形态特征及变化,血清学检测苍鼠血清甘油三酯(TG),总胆固醇(TC)和电化学发光法检测胰岛素水平等变化. 结果:糖尿病苍鼠不仅表现为高血糖,还表现为高TG血症. 视网膜中MMP-2 mRNA表达呈升高趋势, 与正常对照组相比于造模后16 wk末时即差异具有统计学意义(P＜0.05). 结论:此为研究基质金属蛋白酶参与DR的发病机制提供了依据.     

融合自杀基因AdCD-UPRT对人肺癌细胞A549的体外作用

目的:研究融合自杀基因CD-UPRT系统对A549细胞的体外作用.方法:包装、扩增携带重组腺病毒AdCD-UPRT,并测定其滴度.检测AdCD-UPRT感染A549细胞的效率、毒性及目的基因的表达.用MTT法观察AdCD-UPRT/5-FC系统对A549细胞的体外抑制作用及旁观者效应.运用AO-EB染色、电镜及FCM观察AdCD-UPRT/5-FC系统对A549细胞的诱导凋亡作用.结果:CD-UPRT融合自杀基因对A549细胞显示出明显的生长抑制作用并存在旁观者效应,使细胞周期阻滞于S期并诱导细胞凋亡.结论:CD-UPRT融合自杀基因系统对A549细胞有较强的细胞毒作用.     

高效液相色谱法测定奥硝唑凝胶中奥硝唑的含量

目的 采用高效液相色谱(HPLC)法测定奥硝唑凝胶中奥硝唑的含量. 方法 采用ODS C₁₈(4.6 mm×150 mm,5 μm) 的色谱柱;流动相：乙腈－水（20：80）,检测波长：312nm,流速：1 mL&#8226;min^-1,塞克硝唑为内标. 结果 奥硝唑浓度在0.63～20.00 μg&#8226;mL^-1范围内,峰面积与峰面积/内标比值具有良好线性关系,r＝0.999 9,平均回收率100.2%,RSD=1.2%. 结论 该法建立的含量测定方法 操作简便, 结果 准确、灵敏.