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本研究以次要组织相容性抗原HA-1为靶点,构建HA-1树突状细胞核酸疫苗用于造血干细胞移植后抗白血病治疗。体外培养移植供者树突状细胞,用流式细胞术、混合淋巴细胞反应检测其免疫活性,通过电转法将HA-1基因转染树突状细胞,构建树突状细胞核酸疫苗。48小时后检测HA-1蛋白表达情况。将转染后的树突状细胞与同基因淋巴细胞共孵育诱导特异性CTL,应用LDH释放实验检测其体外杀伤活性。结果表明:经外周血单核细胞诱导的树突状细胞表达树突状细胞表型,能刺激同种淋巴细胞增殖。电转48小时后,Western blot可检测到HA-1蛋白表达。诱导的CTL体外杀伤活性高于对照组。结论:次要组织相容性抗原HA-1可作为造血干细胞移植后抗白血病治疗的靶点。 相似文献
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人羊膜上皮细胞有向心肌样细胞分化的特性 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:通过体外诱导分化实验,评价人羊膜上皮细胞向心肌样细胞分化的能力.方法:实验于2005-09/2006-12在贵州省细胞工程重点实验室完成.①对象:经产妇知情同意,无菌采集健康足月剖宫产胎盘6份,实验经医院医学伦理委员会批准.②实验方法:采用机械法将羊膜从胎盘组织上剥离,D-Hank's液冲洗后剪成碎片,加入含有0.2 g/L乙二胺四乙酸的0.5 g/L胰蛋白酶溶液,离心、消化、过滤,收集滤液,加入胎牛血清终止消化,重复消化2次.合并3次消化所得的细胞悬液,离心后将细胞沉淀悬浮于L-DMEM培养基中,按1.25×108 L-1密度接种,常规培养3 d后更换培养基,待细胞达80%~90%融合后用胰蛋白酶 乙二胺四乙酸联合消化,终止后离心弃上清,细胞沉淀用培养基重新悬浮,按1×107 L-1密度传代.③实验评估:用流式细胞仪鉴定人羊膜上皮细胞表型;使用10 μmol/L 5-氮杂胞苷和1 mmol/L抗坏血酸磷酸盐诱导第2代人羊膜上皮细胞,免疫荧光染色法检测诱导后细胞中特异蛋白结蛋白和α-辅肌动蛋白的表达,RT-PCR检测心肌特异性转录因子Nkx2.5、GATA-4和心肌特异性收缩蛋白α-肌球蛋白重链mRNA的表达.结果:①人羊膜上皮细胞的免疫组化特征:人羊膜上皮细胞几乎不表达CD44,不表达波形蛋白,表达角蛋白19.②人羊膜上皮细胞α-辅肌动蛋白和结蛋白的表达:人羊膜上皮细胞经诱导分化后,表达肌系细胞标志α-辅肌动蛋白和结蛋白.③人羊膜上皮细胞Nkx2.5、GATA-4和α-肌球蛋白重链mRNA的表达:人羊膜上皮细胞经诱导分化后,表达心肌特异性转录因子Nkx2.5 mRNA和GATA-4 mRNA,心肌特异的可收缩蛋白α-肌球蛋白重链mRNA未见表达.结论:通过胰蛋白酶消化法分离获得的人羊膜上皮细胞具有向心肌样细胞分化的特性,可能成为细胞心肌成形术的候选供体细胞. 相似文献
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先天性心脏病(先心病)是一类重要的有临床意义的出生缺陷,保守估计其发生率为50/1000活产儿。该病的遗传学机制相当复杂:染色体畸变,单基因突变和多基因突变都有可能导致先天性心脏畸形。本综述回顾了近年来该领域研究的现状及面临的挑战,并提出未来可能的研究方向。 相似文献
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COPD患者血浆中ET-1和EDNRB含量变化及临床意义 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)患者血浆内皮素-1(endothelin-1,NET-1)及内皮素受体B(endothelin receptor B,EDNRB)含量变化与COPD发生的关系;这两项指标之间的相关性以及吸烟是否会影响血浆中ET-1及EDNRB的浓度发生变化。方法采用ELISA法测定血浆ET-1、EDNRB的含量。结果COPD患者急性加重期血浆中ET-1和EDNRB的浓度明显高于健康对照组(P〈0.05),ET-1与EDNP,B含量经统计学处理呈正相关(r=0.284,P〈0.05)。吸烟与非吸烟组ET-1和EDNRB血浆含量的变化无统计学差异(P〉0.05)。结论ET-1、EDNRB是参与COPD急性期发病过程的重要因素。 相似文献
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Objective To evaluate the prevalence of CD4 ^+ CD25^high regulatory T cells ( Treg cells) in the peripheral blood mononuclear cells (PBMC) and tumor-infiltrating lymphocytes (TIL) of patients with non-small cell lung cancer (NSCLC) and to investigate immunosuppression to the progression of cancer. Methods Peripheral blood and tumor tissues were collected from 20 patients with NSCLC at the time of surgery. None of the patients received surgery, radiotherapy, chemotherapy, or other medical interventions before this study. Cancer stages of the patients were Ⅰ-Ⅲ A. Venous blood samples were obtained from 20 health donors. PBMC were isolated from blood samples by differential centrifugation over Ficoll-Hypaque. TILs were isolated from tumors by differential centrifugation over Ficoll-Hypaque and Percoll. Percentage of CD4^+ CD25^highTr/CD4+T in PBMC and TIL was assessed by the flow cytometry. Results The percentage of CD4^ + CD25high Tr/ CD4 ^+T in PBMC [ (4. 87 ± 1.22 ) % ] of NSCLC patients was significantly higher than that in healthy donors [ ( 2.36 ± 0. 72 ) % ] ( P 〈 0.01 ). The percentage of CD4^+ CD25^highTr/ CD4^+ T in PBMC [ (5.40 ± 1.20) % ] of NSCLC patients in stage Ⅱ-Ⅲ A was significantly higher than that in stage Ⅰ [ (3. 87 ± 0. 22 ) % ] ( P 〈 0. 01 ). The percentage of CD4 + CD25hiShTr/ CD4 + T in TIL[ ( 8. 66 ±0. 76) % ] of NSCLC patients in stage Ⅱ-Ⅲ A was significantly higher than that in stage Ⅰ [ ( 7. 04 ± 0. 80) % ] ( P 〈 0. 01 ). Conclusion The prevalence of CD4 ^+ CD25^highTreg cells in PBMC and TIL of NSCLC patients was significantly higher than that in healthy donors. These Treg cells may be preventing appropriate antitumor immune responses. The population of CD4^ + CD25^highTreg cells in PBMC and TILs of NSCLC patients with Ⅱ-Ⅲ A stage was significantly higher than that of NSCLC patients with Ⅰ stage. These Treg cells may facilitate development of tumors. 相似文献
38.
小切口微创治疗新鲜跟腱断裂 总被引:3,自引:0,他引:3
[目的]探讨通过小切口应用跟腱缝合引导器微创治疗新鲜跟腱断裂的临床效果.[方法]2006年3月-2008年3月,通过小切口应用跟腱缝合引导器微创治疗连续的26例新鲜跟腱断裂病人,术后早期功能锻练.男24例,女2例.年龄22~58岁,平均37.6岁.24例获得12~36个月(平均21个月)的随访.采用美国足与踝关节协会(AOFAS)踝与后足功能评分标准进行评分,测量双侧小腿最大周径及跟腱断裂平面的周径,询问恢复工作及伤前体育活动的时间.[结果]无跟腱再断裂、切口表浅或深部感染、皮缘坏死等并发症.腓肠神经支配区皮肤感觉正常.AOFAS 平均得分为97分(86~100分).23例恢复伤前工作与学习,恢复工作时间平均为10周(4~20周).24例均恢复伤前体育活动,恢复伤前体育活动时间平均为20周(18~24周).小腿最大周径伤侧较对侧平均减少0.4 cm(0.2~0.8 cm),跟腱断裂平面周径伤侧较对侧平均增粗0.5 cm(0.3~0.7 cm).[结论]应用跟腱缝合引导器微创修复新鲜跟腱断裂结合早期功能锻练可得到满意的临床效果,可较早恢复伤前状态,有较少的并发症. 相似文献
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张路 《中国肿瘤临床与康复》2011,(1):96-96,F0003
患者女,17岁。患者1岁余(1992年)面部出现黄豆大小疱疹,疱液淡黄或透明,渐扩展至全身,自行吸收或遗留瘢痕。4岁起反复发热,Tmax38~40℃,间隔几天至半月不等,发热时一般情况可,自服安乃近体温可至正常。7岁始四肢皮疹循疱疹-周围红肿-黑痂顺序,黑痂脱落后遗留溃疡性瘢痕,当地皮肤活检诊为"脓疱疹",予以药膏(不详)无效。11 相似文献