一种细胞特异性基因转录水平的分析方法

目的:报道一种更为灵敏的细胞特异性基因转录水平分析方法.方法:用灵敏度、重复性和线性试验对该法进行评价.结果:本法可以对5×105的细胞进行检测;5×106的细胞受试,杂交信号强度CV值为0.11;在5×105～1×107细胞范围内,杂交信号强度与细胞数的线性关系较好.结论:该法灵敏度高,重复性和线性满意,可用于细胞核内新生成mRNA的分析.     

抗体库技术中辅助噬菌体的研究进展

噬菌体抗体库作为噬菌体展示和抗体库2种技术的集合体,可以不需经过免疫而直接获取各种人源抗体,目前已广泛应用于生物学及医学等领域.在通常使用的噬菌粒系统中,使用野生型辅助噬菌体会导致"噬菌体污染",使得仅有很少部分子代噬菌体带有抗体片段,这对抗体库的筛选工作非常不利.近年来,研究人员通过对噬菌体衣壳蛋白基因(g3)部分缺失、引入琥珀突变、构建新型辅助噬菌体或辅助质粒等策略,不仅有效避免了辅助噬菌体污染问题,使抗体展示效率提高了5～20倍,进而通过增加单价抗体展示在每个噬菌体表面,使抗原结合能力提高400倍,并且在第二轮筛选中即可得到有效富集(阳性克隆率超过50%).本文综述了近年来应用在噬菌体抗体库的一些新型的辅助感染系统.     

Ⅰ型漂浮膝29例治疗及疗效分析

目的：探讨Ⅰ型漂浮膝的治疗方法。方法：对２９例Ⅰ例漂浮膝股骨干、胫骨干同时进行内固定或外固定支架固定及股骨干、胫骨干单一固定或均不固定疗效统计学分析。结果：同时固定优良率８８．２％，非同时固定优良率３３．３％，结论：我们认为对Ⅰ型漂浮膝同时进行股骨干、胫骨干内固定或外固定架固定及早期进行膝关节的ＣＰＭ功能锻炼是值得推广的治疗方法。     

人CD38分子基因的克隆及其在真核细胞中的表达

目的：克隆并表达人CD38抗原分子的全长cDNA。方法：采用RT－PCR法，从高表达CD38抗原的Daudi细胞系中克隆出CD38全长cDNA并将其插入pGEM-T载体中，重新设计引物，引入酶切 位点，二次PCR；从重组pGEMT载体上扩增CD38抗原分子的cDNA编码序列，再亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1( )，用脂质体法转染COS7细胞。用免疫荧光及A－PAAP方法检测CD38抗原的表达。结果：克隆的CD38抗原的全长cDNA，经酶切鉴定及序列分析表明，其序列与文献报道完全一致。免疫荧光及APAAP方法检测表明，CD38抗原分子在COS7细胞中获得表达。结论：成功构建了CD38真核表达载体，并在COS7细胞中获得表达，对研究CD38分子的功能具有重要的意义。     

大鼠慢性支气管炎模型白细胞L—选择素mRNA的表达及皮质激素对 …

细胞粘附分子（ＣＡＭＳ）是一类介导细胞与细胞、细胞与细胞外基质相互粘附的糖蛋白。选择素主要介导白细胞与血管内皮细胞的最初粘附及沿血管壁滚动的过程。本实验采用原位杂交法［１］，检测大鼠慢性支气管炎模型支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）白细胞Ｌ－选择素的表达，及皮质激素对其表达的影响。１材料与方法１．１大鼠慢性支气管炎模型的制备及分组雄性ＳＤ大鼠（军事医学科学院实验动物中心提供）２８只，体重（２２０±３０）ｇ，鼠龄１２周。随机分为：①慢性支气管炎模型组（慢支炎组）：７只，用１％戊巴比妥钠（５０ｍｇ／ｋｇ）…     

免疫毒素去除T细胞在异基因造血干细胞移植中的应用

观察应用免疫毒素部分去除T细胞(TCD)的方法进行人类白细胞抗原／混合淋巴细胞培养(HLA/MLC)不相合异基因造血干细胞移植的临床疗效。采用蓖麻免疫毒素部分去T细胞对13例恶性血液病患者行HLA-MLC配型不相合的造血干细胞移植，其中慢性髓性白血病(CP1)6例；急性淋巴细胞白血病CR1 1例，CR2 1例，复发1例；急性髓性白血病CR1 2例，CR2 1例；骨髓增生异常综合征转化成急性髓性白血病M4型(CR1)1例。结果表明：13例患者中8例成功植入，其中2例发生Ⅱ度急性移植物抗宿主病(aGVHD)，2例发生Ⅲ-Ⅳ度aGVHD。随访8-90个月，2例发生Ⅲ-Ⅳ度aGvHD患者早期死亡，另有1例患者死于迟发感染，其余5例均无病存活至今。5例未植活的患者中4例回输同一供者外周血造血干细胞后3例未植入，1例植活，但死于移植相关合并症；1例再次行同基因造血干细胞移植成功并无病存活至今。结论：采用蓖麻免疫毒素部分去T细胞的方法行HLA/MLC配型不相合的异基因造血干细胞移植可减少重度aGVHD的发生，但移植早期排斥率(HVG)较高，临床应用效果有待进一步评估。     

免疫毒素清除人骨髓中克隆化白血病细胞的研究——Ⅰ.抗CD_7免疫毒素的制备及其细胞毒性质研究

本实验采用优化的方法通过SPDP交联抗CD_7单克隆抗体与蓖麻毒素制成免疫毒素。经MTT方法检测其对表达CD_7抗原的Molt-4及HPB-ALL细胞系均有显著特异性杀伤作用。克隆杀伤实验结果表明,该免疫毒素在10~(-10)mol/L浓度时达3个杀伤log(即清除99.9%的molt-4细胞),而在此浓度时,其只抑制21.6%的粗-单系造血祖细胞生长,从而初步证明其在自体骨髓移植中可用于清除骨髓中残留白血病细胞。     

高龄大肠癌患者手术治疗的临床分析

目的探讨70岁以上高龄大肠癌患者手术治疗的效果及风险。方法回顾性分析2007年1月至2009年4月收治的138例70岁以上高龄大肠癌患者的外科手术治疗资料。结果所有患者均行择期手术治疗,其中行根治性手术113例（81．9％）,行腹腔镜手术28例（20．3％）,无围手术期死亡病例。结论高龄大肠癌患者术前合并症多,术后恢复慢,手术风险大。但只要充分做好围手术期准备,选择适当的手术方式,对提高手术成功率,降低死亡率和并发症的发生率有积极的意义。     

伊曲康唑应用于白血病合并侵袭性真菌感染治疗的临床效果观察

目的 探讨伊曲康唑治疗白血病合并侵袭性真菌感染的临床效果.方法 选取2007年8月至2011年9月在我院住院治疗的白血病合并真菌感染患者149例,根据患者在住院期间选择的不同抗真菌药将其分为对照组(n=74)和观察组(n=75).对照组患者给予氟康唑治疗( 400 mg/d),观察组患者给予伊曲康唑治疗(200 mg/d).比较两组患者临床效果以及出现的不良反应.结果 观察组治愈率、显效率、总有效率分别为48.0％、20.0％、94.6％,显著高于对照组(32.4％、16.2％、77.0％),差异均具有统计学意义(P＜0.05).两组患者在治疗期间均未出现严重的不良反应,主要的不良反应为用药后出现肝功能异常,其中对照组发生率为16.2％,观察组发生率为21.3％,两组不良反应发生率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 伊曲康唑应用于白血病合并侵袭性真菌感染治疗的临床效果较好,且安全性良好,值得在临床上推广.     

浅谈改良乳突切除保留骨桥鼓室成形术治疗中耳乳突炎的体会

目的探讨改良乳突切除保留骨桥同期行鼓室成形术治疗慢性化脓性中耳乳突炎患者的临床疗效。方法对83例(83耳)慢性化脓性中耳乳突炎患者(含胆脂瘤型、骨疡型)施行改良乳突切除保留骨桥同期行鼓室成形术的治疗过程进行回顾性分析及总结。结果 83例患者术后观察1个月-4年,鼓膜修补愈合率为95.18%,听力改善有效率为68.67%,无效率31.32%,3个月内全部干耳。听力恢复较好者为长期反复流脓、听力渐进性下降、中耳乳突不可逆病理改变的慢性单纯型中耳乳突炎患者,治疗有效率为95.65%,其次为骨疡型,有效率为85.71%,胆脂瘤型最差,有效率为34.37%。结论长期反复流脓、听力渐进下降的慢性化脓性中耳乳突炎患者,应早日行改良乳突切除保留骨桥同期行鼓室成形术,可获得早日干耳,听力提高,防止听力丧失。对胆脂瘤型、骨疡型中耳乳突炎患者,在清除病灶的基础上尽可能保留乳突气房及骨桥同期行鼓室成形术,亦可早日干耳、提高听力。