手足口病重症化危险因素BP神经网络模型预测分析

目的探讨BP神经网络（BPNN）模型分析在儿童手足口病重症化危险因素预测中的作用,为手足口病的临床诊断提供参考依据。方法整群抽取河南省郑州市某医院2013年4—6月收治的233例出现发病症状到入院时间<72 h的手足口病患儿作为调查对象进行问卷调查,采用MATLAB 7.0神经网络工具箱构建BPNN模型,分析影响手足口病重症化危险因素的平均影响值（MIV）,按MIV值的绝对值的大小排出因子顺位,与多因素logistic回归模型进行比较。结果BPNN模型最终的网络结构为26→8→1,影响手足口病重症化的前10位危险因素（MIV绝对值）依次为：易惊（0.691 4）、颈强直（0.537 3）、呕吐（0.453 8）、血糖升高（0.429 9）、手足抖动（0.381 3）、精神差（0.328 3）、热峰≥39 ℃（0.308 6）、白细胞升高（0.290 2）、热程≥3 d（0.262 1）、嗜睡（0.242 7）;多因素logistic回归分析的主要危险因素（OR值）依次为：颈强直（183.633）、易惊（158.868）、呕吐（59.347）、血糖升高（23.133）、白细胞升高（12.243）、热程≥3 d（7.765）、手足抖动（5.738）、精神差（4.452）;饱和对数线性模型分析结果显示,热峰≥39 ℃与精神差和白细胞升高均有交互作用（P<0.05）。结论BPNN模型可以较好地反映手足口病与各影响因素间复杂的非线性关系,网络的拟合效果和分类正确率均较好,可用于手足口病重症化危险因素的分析研究。     

复方锡类散灌肠治疗左半结肠炎126例分析

目的观察复方锡类散保留灌肠治疗左半结肠炎的临床疗效。方法选择经结肠镜检查确诊的左半结肠炎患者126例,予复方锡类散保留灌肠2次/d,治疗20 d后复查结肠镜,观察疗效。结果显效75例,有效42例,无效9例,总有效率92.8%。结论复方锡类散保留灌肠治疗左半结肠炎疗效显著。     

幽门螺杆菌lpp20基因的克隆及序列分析

幽门螺杆菌 (Hp)lpp2 0基因编码Hp外膜上的一种相对分子质量约为 18× 10 3的脂蛋白 (Lpp2 0 )。有研究表明 ,Lpp2 0具有良好的免疫原性和免疫保护性 ,是一种理想的疫苗候选抗原。本研究对Hp郑州分离株MEL HP2 7lpp2 0基因进行克隆和测序 ;通过对 7株Hplpp2 0基因的核苷酸序列及相应的氨基酸序列进行同源性分析 ,确定Hplpp2 0基因的变异性。采用由本研究室从郑州当地慢性萎缩性胃炎患者体内分离的HpMEL HP2 7菌株 ,应用自行设计的PCR引物 :上游 5′ GCCGAATTCATGAAAAATCAAGTTA 3′(EcoRⅠ ) ,下游 5′ GCCGTCGACCTA…     

幽门螺杆菌omp11基因的克隆及序列分析

目的　对幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,Hp)郑州分离株MEL Hp2 7和NCTC116 37株外膜蛋白基因 (omp11)进行克隆和测序 ;确定不同Hp菌株omp11基因序列的变异性 ,并对该基因编码多肽的化学及免疫学特性进行预测 ,为幽门螺杆菌疫苗抗原的筛选提供数据。方法　提取Hp染色体DNA ,用自行设计的PCR引物 ,从染色体DNA上扩增出omp11基因 ,将其克隆到载体pNEB193中 ,用重组质粒转化大肠杆菌 (E .coliJM10 9)。对重组质粒进行酶切鉴定 ,对插入的omp11基因片段进行测序 ,应用生物信息学软件Omiga2 .0、GeneDoc2 .3和GenBank、Swiss port数据库对 4个Hp菌株 (MEL Hp2 7、NCTC116 37、2 6 6 95、J99)的omp11基因序列进行同源性分析 ,并对该基因编码多肽的主要化学特征和抗原结构域进行预测。结果　MEL Hp2 7和NCTC116 37株omp11基因的核苷酸序列长度均为5 6 1bp ,不同菌株间核苷酸序列的同源性为 96 .6 %～ 98.0 % ,与国内的MEL Hp2 7株同源性最高的菌株是NCTC116 37,二者的同源性为 97.9%。 4株Hpomp11基因编码的氨基酸序列长度均为 186aa ,不同菌株间氨基酸序列的同源性为 98.9%～ 10 0 % ,与MEL Hp2 7株同源性最高的菌株是 2 6 6 95 ,二者的同源性为 99.5 %。预测HpMEL Hp2 7omp11基因编码多肽的相对分子质量 (Mr)     

幽门螺杆菌融合蛋白HspA-UreB在大肠杆菌中的温控表达及其免疫反应性检测

目的：在温控表达载体pBV220中实现幽门螺杆菌(H．pylori)融合蛋白HspA-UreB的表达,并研究其免疫反应性。方法：含重组表达质粒pBV-HU27的人肠杆菌DH5α经30℃增菌后,存42℃下诱导表达,SDS-PAGE分析融合蛋白表达含量,与H．pylori全菌免疫小鼠血清和H．pylori感染患者血清进行Western blot分析,检测融合蛋白的免疫反应性。结果：SDS-PAGE分析结果显示存76500处出现特异蛋白带,诱导4h即可达到最高量,融合蛋白HspA-UreB占全菌蛋白含量的10％,该融合蛋白可以被H．pylori免疫小鼠血清和H．pylori阳性患者血清中的相应抗体所识别。结论：H．pylori融合蛋白HspA-UreB可以在温控表达载体中正确表达,且具有良好的免疫反应性。     

幽门螺杆菌脂蛋白基因的克隆和生物信息学分析

目的完成幽门螺杆菌(Hp)郑州分离株MEL-HP27脂蛋白(lipoprotein)基因lpp20的克隆和测序;分析该基因序列的变异性和表达蛋白的化学及免疫学特征,为Hp疫苗抗原的筛选奠定基础。方法用PCR方法从MEL-HP27的染色体DNA中扩增lpp20基因片段,将其与载体pNEB193连接后,用于转化大肠杆菌JM109,通过酶切和测序鉴定重组质粒。应用生物信息学软件Omiga2.0、GeneDoc2.3和GenBank、Swiss-port数据库对7个Hp菌株(MEL-HP27、60190、Chongqing、CH-CTX1、J99、17874、26695)的lpp20基因序列进行同源性比较,并对该基因编码蛋白的主要化学特征和抗原结构域进行分析。结果Hplpp20基因的核苷酸序列长度为528bp,不同菌株间的同源性为96.0%~98.1%。lpp20基因编码的氨基酸序列长度为175aa,不同菌株间的同源性为98.3%~100%。MEL-HP27lpp20表达蛋白的分子量为19.122kDa,等电点为9.950,具有2个抗原性结构域。结论Hplpp20基因的核苷酸序列和对应的氨基酸序列均具有较高的保守性,但保守性低于100%,采用该基因表达蛋白作为疫苗和诊断抗原时,有必要考虑人群感染的优势菌株的遗传特征,以提高免疫保护的覆盖率和免疫诊断的敏感性。Hplpp20基因编码的蛋白具有典型抗原分子的结构特征,有望成为Hp疫苗候选抗原。     

乳酸菌中幽门螺杆菌ureB基因的食品级表达与优化

目的:以乳酸乳球菌(Lactococcus lactis,L.lactis)为宿主菌构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)尿素酶B(UreB)的食品级表达系统.方法:从重组质粒pMD19-T-ureB上酶切得到ureB基因片段,与含有筛选标记lacF基因的L.lactis表达载体pN...     

湖北以外省份新型冠状病毒肺炎病例谱特征和扩散强度初步分析

目的 分析湖北以外省份新型冠状病毒肺炎（COVID-19）病例谱特征和扩散强度。方法 从各省级卫生健康委员会官方网站获得每日疫情数据和病例信息,计算发病率、重症比例、病死率和扩散比。结果 截至2020年3月20日,累计确诊12 941例,死亡116例,各省份平均发病率为0.97/10万,平均重症比例为13.5%,平均病死率为0.90%。发病率前三省份是浙江（2.12/10万）、江西（2.01/10万）和北京（1.93/10万）。各地区病例谱特征不一致,重症比例前三省份是天津（45.6%）、新疆（35.5%）和黑龙江（29.5%）;病死率前三省份是新疆（3.95%）、海南（3.57%）和黑龙江（2.70%）。各地区扩散情况也不一致,平均扩散比为0.98,扩散比最低的3个省份分别为西藏（0）、青海（0.20）和广东（0.23）。结论 各地区采取的疫情防控措施卓有成效,遏制了COVID-19在中国进一步蔓延,提高了救治成效,但不同地区间的重症比例、病死率、扩散比存在明显差异。     

旋毛虫移行幼虫收集方法的研究

目的：研究旋毛虫移行幼虫（ｍｉｇｒａｔｏｒｙｌａｒｖａ,ＭＬ）的收集方法。方法：本实验在贝氏法原理的基础上,观测了采用不同规格的分样筛、棉布袋、收集时间、以及不同组织器官对收集效果的影响。结果：在３种分样筛和一种棉布袋中,用２８０目分样筛收集２５ｈ能够得到纯度和数量均达到抗原分析要求的ＭＬ;在大鼠的血液、肝、肺和肾中,由血液中收集到的ＭＬ数量最多,肝脏次之,肾脏最少,差异均具显著性（Ｐ＜００５）。结论：在ＭＬ的收集中,选择大鼠的血液和肝作原料,采用２８０目的分样筛和２５ｈ的收集时间是较理想的实验方法。