诊疗一体化胶质瘤靶向纳米粒增效声动力治疗及多模态显像：体外实验研究

目的 制备胶质瘤靶向诊疗一体化纳米粒,观察体外多模态显像及对U87细胞主动靶向能力和增效声动力治疗（SDT）效果。方法 以双乳化法制备载IR780和全氟戊烷（PFP）纳米粒（IR780-PFP@PLGA）,验证其体外光声（PA）/超声（US）/荧光（FL）多模态显像能力;以细胞计数试剂盒（CCK-8）检测细胞毒性,激光共聚焦显微镜观察其主动靶向能力,通过单线氧荧光探针（SOSG）检测法、JC-1染色法、2'',7''-二氯荧光黄双乙酸盐（DCFH-DA）染色法、钙黄绿素/碘化丙啶（Calcein-AM/PI）双染及CCK-8评价其增效SDT效果。结果 所制备IR780-PFP@PLGA呈圆形,形态规则,粒径均匀,平均（240.67±1.30） nm,表面电位（-9.50±0.06） mV,IR780包封率（92.03±0.42）%;经激光辐照后其PA和FL信号强度呈浓度依赖性,经低强度聚焦超声（LIFU）辐照后表现出良好US对比度成像能力和较强U87细胞靶向能力,并呈活性氧（ROS）浓度依赖。于U87细胞中检出大量ROS,线粒体膜电位明显降低,细胞毒作用明显。结论 成功构建的IR780-PFP@PLGA不仅可用于PA/US/FL多模态显像并具有良好体外寻靶能力,还可通过声致相变（ADV）增强SDT疗效,有望用于多模态成像指导下早期诊断和靶向精准治疗脑胶质瘤并评估疗效。     

TNF-α刺激下人牙周膜干细胞对CD3+T细胞功能的影响

目的:研究在TNF-α刺激下牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)对CD3+T细胞功能的影响.方法:分别获取20-30岁患者的健康离体牙8例,分离培养获得PDLSCs;采用免疫磁珠法分离获取20-30岁健康患者的CD3+T细胞;PDLSCs与CD3+T细胞共培养,PDLSCs加炎症因子(TNFα 10ng/mL)与CD3+T细胞共培养,PDLSCs与CD3+T细胞比例分别为1∶10、1∶20、1∶50、1∶100,共培养时间为48h;共培养48h后分别提取不同组的RNA并反转录为cDNA,检测凋亡、炎症及增殖相关基因的变化.结果:两组细胞生长状态良好;随共培养组PDLSCs比例的降低,正常共培养组CD3+T细胞caspase3/8、IL-6,TNFα mRNA表达水平均降低,在1∶50时趋于稳定;随共培养组PDLSCs比例的降低,炎症因子共培养组CD3+T细胞caspase3/8、IL-6、TNFα mRNA表达水平均降低,在1∶20时趋于稳定.当PDLSCs与CD3+T细胞比例分别为1∶20时H-PDLSCs(Healthy-Periodontal ligament stem cells)、I-PDLSCs(Inflammatory-Periodontal ligament stem cells)对CD3+T细胞CCND-1基因有显著抑制作用,H-PDLSCs对CD3+T细胞CCND-1的抑制作用最显著.结论:在恰当的比例时,正常及炎症PDLSCs对CD3+T细胞的凋亡及炎症因子分泌均有抑制作用,在PDLSCs与CD3+T细胞比例1∶20时,可能是由于炎症因子的存在增强了其抑制作用.     

研究者发起的临床研究项目实施过程质量评估流程的探讨

近年来我国研究者发起的临床研究(ⅡT)项目数量快速增长,对ⅡT项目规范化实施提出了全新要求。本研究在国内外临床研究法规框架下,结合ⅡT项目实施过程质量评估工作实践探索了一套基本流程,主要包括质量评估前准备、项目组自评估、中心化核查、现场核查、撰写报告、综合评估,为提高ⅡT项目质量提供参考和借鉴。     

参苓白术颗粒预防老年抗生素相关性肠道菌群失调的RCT研究

目的:观察参苓白术颗粒对住院老年人抗生素相关性肠道菌群失调的防治作用。方法:选择2012年5月~2014年5月住院老年重症肺炎患者100例,随机分配至对照组(单用美罗培南)和研究组(美罗培南+参苓白术颗粒),疗程14 d,治疗结束后判定疗效和菌群失调发生的情况。结果:美罗培南对老年重症肺炎患者有效果良好,对照组与研究组的有效率分别为68%和74%(P0.05);研究组患者肠道菌群失调的发生率、肠道二重感染的发生率显著低于对照组(P0.05)。结论:参苓白术颗粒用于预防住院老年患者抗生素相关性肠道菌群失调的发生疗效显著,可用于临床推广。     

BUB1基因在胃癌组织中高表达： 基于Oncomine数据库及生物信息学方法

目的 探讨细胞周期有丝分裂纺锤体检测点丝/苏氨酸激酶（BUB1）基因在胃癌（STAD）中的表达及临床价值。方法 分别运用Oncomine、GEPIA、BioGPS和Kaplan-Meier Plotter等数据库分析BUB1基因在胃癌组织和正常胃组织的表达差异,并且分析BUB1表达水平与胃癌患者生存预后之间的关系;利用癌症细胞系全科百科全书（CCLE）分析BUB1分别在胃癌组织T细胞和B细胞中的表达,利用String数据库绘制BUB1相关蛋白网络图及基因本体（GO）功能注释,并对京都基因和基因组百科全书（KEGG）相关通路进行分析。采用肿瘤免疫评估资源（TIMER）数据库分析BUB1在免疫浸润物中的表达及对胃癌患者生存预后的影响。为进一步验证Oncomine数据库基因芯片的结果,我们选择成都医学院第一附属医院2018年3月~2019年7月收治的胃癌患者30例,经外科手术获得胃腺癌组织30份,同时获取的癌旁正常组织30份作为对照组,通过PCR和免疫组化技术对Oncomine数据库中BUB1基因表达的数据进行验证。结果 Oncomine、GEPIA、BioGPS分析显示：与正常胃组织相比,BUB1在胃癌组织中呈现高表达（P<0.05）。通过Kaplan-Meier生存分析发现,BUB1基因高表达的胃癌患者无进展生存期（HR=0.52,95%CI=0.41~0.67,P<0.05）、总生存期（HR=0.67,95%CI=0.55~0.82,P<0.05）均有所延长。通过string数据收集到与BUB1相关 蛋白主要富集于13类细胞学组分、4类分子功能和12类生物学过程,并参与了4条信号通路。TIMER数据库分析显示在免疫微环境中高表达BUB1 mRNA的CD4+T细胞和巨噬细胞对胃癌患者5年生存预后较好。实时定量PCR结果提示胃癌组织样本 BUB1的表达水平（4.345±0.421）明显高于配对的癌旁正常胃粘膜组织（1.583±0.122）（t=34.63,P<0.05）;免疫组化结果提示胃癌组织BUB1染色成阳性。结论 胃癌组织中BUB1基因呈现高表达,BUB1可能具有减少肿瘤免疫抑制作用可协助评估胃癌患者的预后情况。     

高通量测序在肝硬化患者腹水、血清及粪便微生物群检测中的应用

肝硬化是慢性进展性肝病,且肝硬化患者极易发生感染,尤其腹水、血清、粪便的菌群变化与肝硬化的进展及并发症有关。但是,大多数患者因腹水、血液中的细菌丰度低无法进行有效的细菌培养,因此难以进行全面分析。二代测序技术的高通量和高速度优势可以用于病原体生物学及临床诊断,包括病原体检测和鉴定、菌株分型、微生物组学研究,从而帮助临床医师优化抗菌药物的使用。目前,二代测序技术不断成熟,临床上对微生物群的全基因组进行分析成为可能。