中性粒细胞在不同品系正常小鼠角膜的分布及其与角膜创伤修复的关系

背景 以往人们通常认为角膜无血管、无髓系来源的免疫细胞存在.C57BL/6J小鼠、BALB/c小鼠和裸鼠是眼科免疫学基础研究的常用模型,这些小鼠的角膜是否存在天然免疫的关键细胞——中性粒细胞是值得关注的问题. 目的 研究实验室常用的C57BL/6J鼠、BALB/c鼠和裸鼠正常角膜的中性粒细胞分布特征及其与角膜创伤修复的关系,为相关研究提供依据. 方法 选取角膜正常、10 ～ 12周龄的SPF级雄性C57BL/6J鼠、BALB/c鼠和BALB/c背景的裸鼠各16只,取3种小鼠各8只制备成中央区相连的4瓣角膜铺片,并以角膜周边血管缘为界向内以3个同心圆分区.分别用Gr-1-FITC抗体和CD31/PECAM-1-PE抗体对角膜中性粒细胞和血管进行免疫荧光染色,用免疫荧光显微镜和AR软件测量角膜血管面积并计数中性粒细胞.选取3种小鼠各8只制备角膜创伤模型,用无菌手术刀片以角膜中央为中心做十字划痕,深度至角膜前弹力层.创伤后即刻（0 h）、12h、24 h用2 g/L荧光素钠点眼,荧光显微镜下以AR软件计算不同时间点的创伤面积.于划痕后24 h取小鼠角膜制备铺片,用Gr-1-FITC抗体和CD31/PECAM-1-PE抗体行荧光染色,比较3种创伤小鼠角膜的血管分布、中性粒细胞的数量和分布情况.实验动物的饲养与使用均遵循美国视觉与眼科研究协会制定的科研动物使用规范. 结果 正常C57BL/6J小鼠、BALB/c小鼠和裸鼠角膜中性粒细胞总数分别为（1 733±237）、（353±96）和（1 601 ±223）个/角膜,BALB/c小鼠角膜中性粒细胞数明显少于C57BL/6J小鼠和裸鼠,差异均有统计学意义（P＜0.01）.3种正常小鼠角膜缘均可见血管分布,BALB/c小鼠角膜缘血管面积明显小于C57BL/6J小鼠和裸鼠,C57BL/6J小鼠角膜缘血管面积明显大于裸鼠,差异均有统计学意义（P＜0.01）.3种正常小鼠中性粒细胞的数量与血管面积均呈明显正相关（C57BL/6J：r=0.936,P=0.001;BALB/c：r =0.939,P=0.001;     

角膜透明塑料异物误诊一例

一例误诊的角膜异物病例，初次共聚焦显微镜检查未能提供诊断依据，通过联用几种裂隙灯显微镜检查方法，仔细反复检查发现了异物影，再到角膜刮片镜检确诊了角膜异物。回顾病史并再次察看既往拍摄的共聚焦显微镜图片，发现已拍摄到角膜异物影，因操作者经验不足而见而不识。强调需结合疾病特点和患者情况，联合使用相关检查。 （眼科，2020, 29： 318-319）     

简化小儿危重病例评分体系评估危重患儿预后的价值

目的探讨儿童危重病例评分体系（PCIS）及其简化评分系统对PICU儿童预后预测的价值与相关性。方法对入住PICU的239例患儿进行PCIS,以住院期间生存状态作为金标准,分别用PCIS、简化1（PCIS10项指标中减PaO2和pH）、简化2（简化1减BUN或SCr）、简化3（简化2减血钠和血钾）进行判断,采用Pearson相关和受试者工作特征曲线（ROC）统计推断。结果PCIS及各简化评分分值呈显著正相关,P〈0．01。当Youden指数最大时,PCIS、简化1、简化2和简化3预测院内死亡的敏感度分别是0．662、0．646、0．600和0．585,特异性分别是0．885、0．891、0．787和0．799。与随机面积0．5比较,PCIS及各简化评分系统预测院内死亡的R0c曲线下面积均有统计学意义（P=0．000）;简化3的面积小于其他3种评分方法（P〈0．01）,简化2和简化1的面积比较差异无统计学意义（P〉0．05）,但二者均小于PCIS的面积（P〈0．05）。结论PCIS及各简化评分系统对危重病患儿预后预测均有一定价值,可靠性依次是PCIS、简化1、简化2和简化3,基层医院可根据情况试用简化评分系统。     

血尿停颗粒对肾小球系膜细胞及细胞因子的影响

目的探讨中药血尿停颗粒治疗多种以系膜增生为主要病理改变的肾小球疾病的作用机理.方法利用小鼠肾小球系膜细胞(GMC)体外培养技术,采用血清药理学、药物与肝S9共育2种加药方式,观察细胞增殖及白细胞介素-6(IL-6)、内皮素(ET)和乳酸脱氢酶(LDH)含量的变化.结果2种加药方式均显示,血尿停颗粒具有抑制系膜细胞(MC)的增殖及IL-6、ET的产生的作用,细胞毒作用不明显.结论抑制MC增殖及抑制MC产生IL-6和ET可能是血尿停颗粒治疗多种以系膜增生为主要病理改变的肾小球疾病的作用机制之一.     

冠心二号方剂对健康人冠脉血流量的影响以及对大鼠心肌缺血再灌注模型抗心肌细胞凋亡的作用

目前缺血性心脏病仍是世界上人类的主要病死原因和公共健康问题。虽然中国的传统草药冠心二号方在中国及东亚地区广泛地用于治疗冠心病,但是其潜在机制尚不明晰。为了明确它的抗心肌缺血机制,我们招募了15名健康志愿者口服冠心二号方剂进行研究。比较服药前及服药后1小时这15个人的心率,血压和冠脉流速。结果发现口服冠心二号后,志愿者的冠脉流量成剂量依赖性地增加,而全身血流动力学参数却不受影响。此外,在大鼠心肌缺血再灌注模型中,我们研究冠心二号的心肌保护作用。细胞凋亡定量采用TUNEL法,并检测组织中caspase-3活性。冠心二号20g/kg的剂量口服给药,降低了大鼠心肌梗死面积和凋亡细胞百分比及caspase-3活性。以上结果表明,冠心二号抗心肌缺血的心脏保护作用可能是通过增加冠脉流量和抗心肌细胞凋亡实现的减少心梗面积。     

祛毒透析胶囊延缓慢性肾功能衰竭60例

许多原发性肾脏病和其他疾病累及肾脏,最终导致慢性肾功能衰竭.据统计,每1万人口中,每年约有1～1.5人发生.随着我国糖尿病发病率的增加,糖尿病肾病及其导致的慢性肾功能衰竭(CRF)也在逐步上升.从总体上讲,本病一旦发生,病理损害便不可逆转,而且在病程的某一阶段可呈进行性发展和加重.随着透析、移植等治疗手段的发展,CRF的疗效己显著提高,但仍不能用于早、中期CRF,且价格昂贵,许多患者由于经济因素无法接受此种治疗.因此,对CRF进行早期防治,延缓CRF的病情进展,降低尿毒症的发病率,是本病治疗的关键[1-2].许多专家认为,对于我国现实国情来说,非透析疗法治疗慢性肾功能衰竭十分重要,许多中药被临床及实验证实有改善肾功能、延缓CRF病程发展的作用.我们近几年来精选中西药物生大黄、大黄炭、丹参、附子、甘露醇等组成祛毒透析胶囊,祛毒化瘀降浊,兼以温肾助阳,治疗早、中期慢性肾功能衰竭,取得了较好的疗效.现报道如下.     

参芪复方对自发性糖尿病大鼠血管内皮保护的作用机制

目的:观察参芪复方对自发性糖尿病(GK)大鼠2型糖尿病(T2DM)大血管病变血管内皮保护的影响。方法:将血糖11.1 mmol/L以上的44只大鼠随机分为模型组、雷米普利组、参芪复方低剂量组、参芪复方高剂量组。4组GK大鼠腹腔注射N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)造模,高脂饮食14天。正常对照组给生理盐水。造模后给受试药物28天。用ELISA法测细胞间黏附分子-1(ICAM-1),放免法测血浆内皮素-1(ET-1),比色法测一氧化氮合酶(NOS),硝酸还原酶法测一氧化氮(NO),实时定量PCR法测胸主动脉ICAM-1mRNA表达。结果:参芪复方组的血清NO、NOS较模型组明显升高,ET-1明显降低(P<0.01),胸主动脉I-CAM-1 mRNA的表达显著低于模型组(P<0.01),血清NO与血浆ET-1的相关系数r=-0.90,P<0.01。结论:参芪复方能下调GK大鼠内皮细胞损伤的ICAM-1 mRNA的表达,抑制ICAM-1的生成,调节NO-ET系统,可能是参芪复方治疗T2MD大血管病变的机制之一。     

大豆异黄酮对胰岛素抵抗大鼠低度炎症因子水平的影响

目的探讨大豆异黄酮(SIF)对膳食诱导的胰岛素抵抗大鼠低度炎症介质水平的影响,以初步阐明大豆异黄酮改善肥胖性胰岛素抵抗状态的可能机制。方法选用高脂饲料诱导的IR雄性SD大鼠,随机分为模型对照组和3个SIF组(50、150及450mg/kg·b.w.)。各组给予相应受试物1月,禁食过夜后股动脉采血处死各大鼠,分离肾周及睾周白色脂肪。酶法检测各组动物空腹血糖,放免法检测空腹血胰岛素IL-6及TNF-α,酶免法检测血清C-反应蛋白、抵抗素与脂联素含量。结果与模型对照组比较:150mg/kg·b.w.与450mg/kg·b.w.组的内脏脂肪/体质量比、血清胰岛素、胰岛素抵抗指数TNF-α及抵抗素含量明显降低;450mg/kg·b.w.组能明显降低血清IL-6及提高脂联素的含量;3个SIF组的C-反应蛋白水平与模型组比较无明显差异。结论SIF具有提高胰岛素抵抗大鼠胰岛素敏感性的作用,可能是通过减少大鼠体内脂肪沉积、调整脂肪源低度炎症介质的分泌而实现的。