MYH7基因Arg453Cys突变及TNNT2基因Arg102Trp突变所致肥厚型心肌病的临床表型分析

目的分析携带MYH7基因Arg453Cys突变及TNNT2基因Arg102Trp突变的肥厚型心肌病（hypertrophic cardiomyopathy, HCM）患者的临床表型及预后特点。方法 在接受过全外显子组测序的986例HCM患者中,分析携带上述两个突变的HCM患者的临床表型特点,并通过随访分析预后。结果 在986例HCM患者中发现6例（0.6%）患者携带MYH7基因Arg453Cys突变,患者平均诊断年龄为（24.3±7.5）岁,发病年龄较小;随访过程中5例出现病情进展,其中2例出现心血管死亡。986例HCM患者中发现3例（0.3%）患者携带TNNT2基因Arg102Trp突变,均表现为轻度肥厚,平均左心室最大室壁厚度（left ventricular maximum wall thickness, LVMWT）为（17.33±2.05） mm;2例出现病情恶化,1例因心力衰竭死亡。结论 MYH7基因Arg453Cys突变和TNNT2基因Arg102Trp突变在我国HCM患者中相对常见,虽然携带突变的患者临床表型异质性较大,但发生心血管死亡的风险较高。     

ICAM-1基因K469E多态性与冠心病关联的荟萃分析

目的 探讨细胞间黏附分子-1(Intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)基因K469E多态性与冠心病的关联性.方法 全面检索中英文数据库关于K469E多态性与冠心病遗传易感性关系的病例对照研究,采用Meta分析方法合并K469E与冠心病关联的OR值,结合95％CI作为每个研究结果...     

欣力胶囊通过抑制神经内分泌的激活改善大鼠心力衰竭

欣力胶囊主要包括黄芪、丹参、泽泻、葶苈子、炙附子等6味中药材，每克胶囊制剂相当于生药量5．8g，由山东药检所制备。Wistar大鼠购自中国医学科学院实验动物研究所。高效液相仪为德国沃特斯公司产品，放免试剂盒为北京德益公司产品。     

芪红胶囊通过免疫调节治疗病毒性心肌炎小鼠

目的 观察芪红胶囊是否通过调节病毒性心肌炎小鼠的免疫系统发挥抗病毒作用.方法 实验选用纯系雄性BALB/c小鼠,分组为:正常对照组、假处理对照组、利巴韦林对照组、芪红胶囊高、中、低剂量组,每组均为20只小鼠,腹腔注射10-3 TCID50 CVB3病毒造成病毒性心肌炎模型,4 h后灌胃给予芪红胶囊进行治疗,以利巴韦林作为阳性对照药物,于第3、6、9、12、15天随机选择每组中的4只动物进行实验.应用SABA18生化分析仪检测小鼠血清中LDH和CK-MB含量;通过芪红胶囊抑制VSV病毒在L929细胞上的毒力,测定芪红胶囊刺激脾细胞产生干扰素的效价;应用固定病毒稀释血清法测定血清中中和抗体浓度,最后取出小鼠心脏,制备心肌组织悬液,检测不同分组心脏组织中CVB病毒滴度.结果 芪红胶囊能够显著降低血清中CK-MB和LDH含量(P＜0.05),显示心脏受损程度减轻,并呈现量效关系;芪红胶囊具有诱生干扰素的能力,与病毒对照组间存在显著的统计学差异(P＜0.05),利巴韦林组刺激干扰素产生的能力非常明显,优于芪红胶囊.此外,芪红胶囊具有刺激机体产生中和抗体的能力.对各组小鼠心肌组织悬液进行病毒滴度测定,发现病毒对照组小鼠的血清中,从第3天开始病毒滴度逐步上升,芪红胶囊药效组能够明显降低血清中的病毒滴度,在5个不同的时期均与病毒对照组存在显著的统计学差异(P＜0.05),利巴韦林组也有明显的降低病毒滴度的作用(P＜0.05).结论 芪红胶囊能够减少CVB病毒在心肌组织中的繁殖,其机制与芪红胶囊对小鼠免疫系统的调节有关.     

心脏型肌球蛋白结合蛋白C基因突变导致肥厚型心肌病的表型特点

目的观察心脏型肌球蛋白结合蛋白C基因(MYBPC3)突变所致的肥厚型心肌病(HCM)的表型特点。方法既往研究中,我们筛查到10例患者携带9种MYBPC3基因突变,收集患者及其家系患者(6例)的临床资料,总结其表型特点。并且根据突变的类型分为两组:单个氨基酸的错义或缺失突变组、突变改变阅读框而表达截短蛋白组,比较其表型特点。结果 16例携带MYBPC3基因突变的HCM患者发病年龄为48.4±13.4岁,最大室壁厚度19.8±6.1mm,在单个氨基酸的错义或缺失突变组和突变改变阅读框而表达截短蛋白组两组之间无明显差别(发病年龄:47.4±12.4岁vs50.0±16.1岁;最大心室壁厚度:19.0±3.8mmvs21.0±9.2mm;P>0.05)。但3例有晕厥史的患者均见于后一组。结论 MYBPC3基因突变导致的HCM发病年龄较晚,多在中年后发病,室壁肥厚程度不重,与突变的类型无明显关系。但突变改变阅读框而表达截短蛋白组的患者更容易出现晕厥等恶性的表型。     

CARP基因重组腺病毒载体的构建

目的：利用Adeasy-1系统，构建并鉴定CARP基因重组腺病毒载体。方法：PCR扩增含有CARP全长cDNA的片段，经测序验证无误后，亚克隆至pAdTrack-CMV穿梭质粒，再与pAdEasy．1质粒在大肠杆菌BJ5 183中进行同源重组产生腺病毒载体质粒。经过抗性筛选以及酶切鉴定得到阳性的重组质粒，再在293细胞中进行包装扩增，利用Adeasy系统上的绿色荧光蛋白标签鉴定病毒表达。结果：测序证实PCR产物为CARP全长cDNA；抗性筛选及酶切鉴定均表明重组腺病毒载体构建成功；转染293细胞3天后可见绿色荧光，回收病毒可以重复感染293细胞，证明病毒包装成功。     

LncRNA AL110200对脂多糖刺激的应答及其靶基因预测与鉴定

目的炎症反应被认为是动脉粥样硬化的始动环节，也是防止动脉粥样硬化的重要靶点。众多基因参与调控此过程，PPAR β/δ可通过参与炎症反应从而影响动脉粥样硬化。我们通过生物信息学分析发现lncRNA AL110200可能影响PPARB，8的表达，从而我们推测lncRNA AL110200可能通过调节PPAR β/δ表达从而影响动脉粥样硬化炎症反应。本研究旨在通过体外实验研究IncRNA AL110200对炎症刺激物脂多糖的应答并初步验证其靶基因。方法我们首先使用qRT—PCR检测在炎症刺激物脂多糖（LPS）刺激下IncRNA AL110200表达量的改变；然后我们再利用qRT—PCR检测了IncRNA AL110200干扰和过表达后PPAR β/δ mRNA表达水平的改变。结果我们研究发现LPS可上调IncRNA AL110200（1.85倍，P〈0．001）和PPAR β/δ（2．67倍，P〈0．01）表达；但是无论高表达还是低表达IncRNA AL110200都不影响PPAR β/δ的表达。结论综上所述，我们的研究发现，动脉粥样硬化炎症刺激物LPS可以上调lncRNA AL110200及PPAR β/δ表达，但是PPAR β/δ非lncRNA AL110200的靶基因。     

心脏肌钙蛋白Ⅰ基因Arg145Gln突变致肥厚型心肌病的临床表型研究

目的通过分析携带心脏肌钙蛋白I基因(TNNI3)Arg145Gln错义突变的肥厚型心肌病患者的临床表现,探讨基因型与临床表型的关系。方法对529例非亲缘关系的中国肥厚型心肌病患者及307例正常对照进行panel二代测序,检测肌小节基因TNNI3、MYH7、MYBPC3、TNNT2、MYL2、MYL3、TPM1和ACTC1,发现的突变进行Sanger测序验证,对携带TNNI3基因Arg145Gln突变的先证者进行家系筛查,完善临床评估,进行基因型及临床表型分析。结果在529例肥厚型心肌病患者中,共2例携带TNNI3基因Arg145Gln错义突变,均为男性,青年发病,室间隔厚度均大于25mm。其中1例病史20年,于37岁就诊时合并左室流出道梗阻、阵发房颤/房扑,NYHA心功能III级,随访于41岁猝死;另1例于32岁发病半年后就诊,同时携带MYH7基因Ala426Thr突变,临床表型较轻,随访8年后出现流出道梗阻征象,其5名携带TNNI3基因Arg145Gln突变和(或)MYH7基因Ala426Thr突变的家系成员均无心肌肥厚。在307例正常对照中未检测到上述突变。结论 TNNI3基因Arg145Gln突变所致肥厚型心肌病临床表型存在差异,但仍可导致心血管恶性结局,在自然病程早期进行诊断、启动规范诊疗及随访管理具有重要的临床意义。     

高效液相色谱-电化学法检测尿甲基福林和甲基去甲福林对诊断嗜铬细胞瘤的意义

目的建立高效液相色谱-电化学法（HPLC-ECD）检测24h尿甲基福林（MN）和甲基去甲福林（NMN）的方法，并通过与血尿儿茶酚胺（CA）、尿CA的比较验证MN、NMN对嗜铬细胞瘤诊断的优越性。方法使用MCX固相萃取柱对MN、NMN进行提取，采用HPLC-ECD法加以检测，计算组内、组间变异和样品回收率。用此方法对104例非嗜铬细胞瘤高血压患者和5例嗜铬细胞瘤患者进行MN、NMN检查，同时对所有病例的血CA、24h尿CA进行检测。结果MN的组内、组间变异系数和回收率分别为5．9％、7．5％、91．1％；NMN的组内、组间变异和回收率分别为6．3％、6．6％、88．5％。病例组的MN、NMN、血CA、尿CA均为阳性；对照组的MN和NMN无假阳性，而血cA、尿CA分别出现15、14例假阳性。结论本研究建立了HPLC．ECD快速准确检测24h尿MN、NMN的方法，MN、NMN是目前临床检验嗜铬细胞瘤的最佳指标。     

老年左室致密化不全患者的临床特点及预后分析

目的关于左室致密化不全(left ventricular non-compaction,LVNC)的临床研究较少,本研究的旨在评估老年患者的临床特点和预后。方法前瞻性连续入选2008年至2014年在阜外医院经心脏核磁共振(cardiac magnetic resonance,CMR)确诊为LVNC的老年患者(年龄兰60岁)。结果研究共入选32例患者(年龄65±5岁,男性占75%)。心脏超声未确诊的有12例(38%)。在接受冠脉影像评估的18例患者中,6人(33%)合并冠心病。无合并先天性心脏病和预激综合征的患者。有3例患者失访。对余29人随访期间(3.0±2.1年),9例(31%)患者死亡。Cox生存分析显示既往有晕厥史(HR:21.04;CI:1.78-248.78;P=0.02)、左室舒张末期内径增大(HR:1.13:CI:1.01-1.24;P=0.03)、左室射血分数下降(HR:0.87;CI:0.78-0.98;P=0.02)、存在钆对比剂延迟强化(HR:7.70;CI:1.14-73.08;P=0.04)是患者死亡的危险因素。结论老年LVNC在超声检查时具有较高的误诊率。冠心病在老年患者中较常见,而先天性心脏病和预激综合征少见。老年IVNC患者有较高的死亡率。