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51.
细粒棘球蚴2HSP70重组质粒的构建、原核表达、纯化和初步鉴定 总被引:3,自引:0,他引:3
目的构建细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,EG)2热休克蛋白70(heat shock protein,2HSPT0)表达重组质粒,原核表达及纯化重组蛋白,并对重组蛋白进行免疫学特性的初步鉴定。方法从EG2HSP70/pGEM-T/JM109质粒中分离EG2HSP70目的基因,将此片段重组入表达载体pGEX-6P-1后转化入大肠杆菌BL21,鉴定后以IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE检测其表达水平,用亲和层析纯化并分离重组蛋白,利用Western blot来鉴定重组蛋白的免疫学特性。结果酶切鉴定及测序分析表明,成功构建细粒棘球蚴pGEX-6P-1/EG2HSP70重组质粒;IPTG诱导表达后,融合蛋白占菌体总蛋白的39%,占裂解物上清总蛋白的70.4%,表明重组的EG2HSP70基因能在BL21中高效表达,表达的蛋白大部分以可溶性状态存在。亲和层析法纯化重组蛋白EG2HSP70,通过Western blot证实该重组蛋白能被细粒棘球蚴囊壁免疫兔血清识别。结论成功构建细粒棘球蚴中国大陆株pGEX-6P-1/EG2HSP70重组质粒,重组的EG2HSP70能够高效表达,表达的EG2HSP70具有免疫学活性。 相似文献
52.
目的 分析我国典型的Rett综合征患儿甲基化CpG结合蛋白-2基因(methyl-CpG-binding protein 2,MECP2)突变。方法 使用PCR扩增、单链构象多态性分析、PCR产物克隆和DNA测序的方法。检测分析了26例Rett综合征患儿、其父母和其中2例患儿的妹妹MECP2基因3个外显子的基因突变。结果 26例Rett综合征患儿中发现14例有9种类型MECP2基因的杂合性突变,突变均位于第3外显子。其中7例有3种错义突变:C473T(T158M)4例,C674G(P225R)1例,C916T(R306C)2例;4例有3种无义突变:C502T(R168X)2例,C763T(R255X)1例,C880T(R294X)1例;2种由于缺失导致的突变:1例为1152del 44bp和1例1158-1167/1171-1186del 26bp;1鲍由于碱基插入导致的移码突变:874insA。1158-1167/1171-1186del 26bp和874insA突变为首次报千,突变均为新生突变。此外,新发现了一种源于你亲的错义变异1141G(P381A)。结论 我国Rett综合征患儿存在MECP2基因突变,典型的Rett综合征MECP2基因突变率大于50%。 相似文献
53.
目的:探索在术前 CT检查食管瘤时 CT值曲线图的应用,以及食管腔造影剂的使用,这有助于帮助判别食管壁的厚度以及外侵情况。材料与方法:100例经过病理学诊断的食管癌病人行CT检查及分析,把他们随机分成3组以观察不同造影剂的应用显示情况;此100例病人中,有65例行了食管癌开胸手术。在CT值曲线图辅助下使用“三角法”判别主动脉受侵。结果:三种不同的方法显示食管腔都是有价值的,显示满意率分别为80.00%、87.80%以及82.76%(P>0.05),显示满意的标准为:①伪影较少;②食管狭窄处的中心可以明确显示。缺乏其中任一项为显示不佳。使用CT值曲线图、“三角法”判别主动脉受侵的敏感性,特异性及准确性分别为 87. 50%、 77. 56%、 80. 00%。结论:食管腔内造影剂的使用对测量管壁厚度是有价值的;CT值曲线图亦有助于判别主动脉受侵情况。 相似文献
54.
1 病例资料
患者 男,28岁.于3月前无明显诱因出现肛周疼痛,大便变细,10余天前,小便次数增多,血清前列腺特异抗原(PSA)0.05 ng/mL. MRI检查示:前列腺区不规则团块状等T1长T2信号影(图1),内可见低信号分隔,DWI扩散受限呈明显高信号,ADC图呈低信号,边界欠清,累及直肠前壁、膀胱后壁.注射Gd-DTPA后,病灶呈明显不均匀强化(图2),直肠前壁明显增厚(图3).CT检查:前列腺区不规则软组织密度团块(图4),边界不清,增强呈不均匀明显强化(图5).患者行手术治疗,术中可见盆腔巨大肿块,与膀胱壁、直肠、精囊关系密切. 相似文献
55.
目的 观察肿瘤相关钙信号传导蛋白-2(TROP-2)基因小干扰RNA(siRNA)对胃癌细胞生物学行为的影响.方法 培养人胃癌MGC-803、HGC-27及BGC-823细胞株,以荧光实时定量聚合酶链反应(PCR)检测TROP-2基因mRNA表达;筛选出TROP-2表达最高者.采用TROP-2基因小干扰RNA转染胃癌细胞株,分别以荧光实时定量PCR和免疫荧光方法观察TROP-2基因mRNA和蛋白水平,然后以计数法检测细胞黏附,以划痕法观察癌细胞迁移、以Boyden方法检测癌细胞侵袭力.结果 荧光实时定量PCR方法显示,3株胃癌细胞中,TROP-2均有不同程度的表达,以胃癌BGC-823细胞最高;以TROP-2 siRNA转染胃癌BGC-823细胞后,癌细胞TROP-2基因mRNA和蛋白明显下降,且呈浓度依赖性;细胞黏附结果显示,转染组细胞黏附数量明显下降;划痕试验和Boyden试验结果显示,细胞迁移和侵袭力明显下降.结论 TROP-2基囚在胃癌细胞黏附、迁移和侵袭中发挥着重要作用;以siRNA转染胃癌细胞,可抑制胃癌细胞黏附、迁移和侵袭能力. 相似文献
56.
张焱生 《临床和实验医学杂志》2006,5(4):402-403
糖尿病肾病是糖尿病微血管严重的并发症,并成为导致终末期肾功能衰竭的重要原因之一.我院中西医结合治疗30例糖尿病肾病取得了比较满意的疗效,现将诊治的体会报告如下. 相似文献
58.
目的探讨预见性干预对居家长期照护老年人压疮发生风险的影响。方法采用调查问卷对909例老年人进行调查,了解压疮发生情况、分析压疮发生影响因素。在此基础上将老年人随机分为观察组453例和对照组454例。对照组采取常规护理,观察组采取预见性预防干预措施,并观察干预效果。结果干预6个月、12个月后,观察组老年人照顾者的压疮相关知识掌握程度明显高于对照组,两组压疮相关知识知晓率差异有统计学意义(P0.001)。6个月、12个月Norton量表各维度得分观察组均高于对照组,两组差异有统计学意义(P0.001);观察组老年人6个月后压疮发生率16.34%,12个月后10.38%,显著低于对照组同期的27.81%和30.02%,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论居家长期照护老年人压疮发生率较高,采取预见性干预措施可以有效预防压疮发生,降低压疮发生率。 相似文献
59.
黄芪联合丹参注射液对大鼠脑出血半暗带区神经元凋亡抑制作用的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨黄芪联合丹参注射液对大鼠脑出血半暗带区神经元凋亡的抑制作用.方法 应用脑立体定位仪于大鼠尾壳核注入肝素化Ⅶ型胶原酶建立脑出血模型.将大鼠随机分为正常组、出血对照组和治疗组.分别对各组大鼠进行神经行为学、吉姆萨(Giemsa)染色、免疫组化染色及细胞超微结构等实验观察.结果 各治疗组大鼠神经行为学评分较出血对照组明显减小(P<0.05).各治疗组脑出血灶周围细胞凋亡数量及程度较出血对照组明显降低.与相应出血对照组比较,各治疗组Bcl-2阳性表达均明显升高(P<0.05),Bax及Caspase-3阳性表达均明显降低(P<0.05);与相应术后24 h给药治疗组比较,各术后6h给药治疗组Bcl-2阳性表达均明显升高(P<0.05),Bax及Caspase-3阳性表达均明显降低(P<0.05);与相应3d各时间给药治疗组相比,7d给药治疗组Bcl-2阳性表达均明显升高(P<0.05),Bax及Caspase-3阳性表达均明显降低(P<0.05).各治疗组与出血对照组比较,神经元细胞线粒体、核膜、内质网等结构相对完整.结论 黄芪联合丹参注射液对大鼠脑出血半暗带区神经元凋亡具有较好的抑制作用. 相似文献
60.