细粒棘球蚴2HSP70重组质粒的构建、原核表达、纯化和初步鉴定

目的构建细粒棘球蚴（Echinococcus granulosus，EG）2热休克蛋白70（heat shock protein，2HSPT0）表达重组质粒，原核表达及纯化重组蛋白，并对重组蛋白进行免疫学特性的初步鉴定。方法从EG2HSP70／pGEM-T／JM109质粒中分离EG2HSP70目的基因，将此片段重组入表达载体pGEX-6P-1后转化入大肠杆菌BL21，鉴定后以IPTG诱导表达，通过SDS-PAGE检测其表达水平，用亲和层析纯化并分离重组蛋白，利用Western blot来鉴定重组蛋白的免疫学特性。结果酶切鉴定及测序分析表明，成功构建细粒棘球蚴pGEX-6P-1／EG2HSP70重组质粒；IPTG诱导表达后，融合蛋白占菌体总蛋白的39％，占裂解物上清总蛋白的70．4%，表明重组的EG2HSP70基因能在BL21中高效表达，表达的蛋白大部分以可溶性状态存在。亲和层析法纯化重组蛋白EG2HSP70，通过Western blot证实该重组蛋白能被细粒棘球蚴囊壁免疫兔血清识别。结论成功构建细粒棘球蚴中国大陆株pGEX-6P-1／EG2HSP70重组质粒，重组的EG2HSP70能够高效表达，表达的EG2HSP70具有免疫学活性。     

基于数据挖掘《幼科杂病心法要诀》治疗小儿泄泻组方用药规律

目的：探讨《幼科杂病心法要诀》中治疗小儿泄泻的组方用药规律。方法：通过对《幼科杂病心法要诀》治疗小儿泄泻原文进行精读,对涉及的9种泻证进行分析与整理,建立病-证-方-药数据库,借助中医传承计算平台（V3.0）进行系统分析。结果：统计共17首方剂,涉及51味中药,药物频次累计148次,药物频次≥6次的有7味,依次是甘草、白术、陈皮、茯苓、生姜、人参、砂仁。功效分类位于前3位的是补虚药、利水渗湿药及理气药,四气五味以甘平、辛温为主,多归于脾胃二经。进一步通过关联规则及聚类分析得出常用药物组合有25组,以补虚药与补虚药、补虚药与温中药、补虚药与行气药配伍为多。药物聚类可分为3类,第一类：砂仁、陈皮、甘草、人参、麦芽,第二类：茯苓、甘草、泽泻、白术、灯心草,第三类：甘草、人参、白术、陈皮、生姜。得到新处方2个,以健脾清热利湿为主,核心处方为异功散加味。结论：《幼科杂病心法要诀》中认为小儿泄泻核心病机为脾虚湿盛,兼有寒、热、虚、食、惊之因;治疗时健脾补虚,常参辛温祛湿法;选方以名方为基础,注重调理脾胃气滞,重视“健脾以运脾为贵”的思想,其药物配伍巧妙灵活,切实合用。     

Rett综合征MECP2基因突变分析

目的 分析我国典型的Rett综合征患儿甲基化CpG结合蛋白－2基因（methyl-CpG-binding protein 2,MECP2）突变。方法 使用PCR扩增、单链构象多态性分析、PCR产物克隆和DNA测序的方法。检测分析了26例Rett综合征患儿、其父母和其中2例患儿的妹妹MECP2基因3个外显子的基因突变。结果 26例Rett综合征患儿中发现14例有9种类型MECP2基因的杂合性突变，突变均位于第3外显子。其中7例有3种错义突变：C473T（T158M)4例,C674G(P225R)1例，C916T（R306C）2例；4例有3种无义突变：C502T（R168X）2例，C763T（R255X）1例，C880T（R294X）1例；2种由于缺失导致的突变：1例为1152del 44bp和1例1158－1167／1171－1186del 26bp；1鲍由于碱基插入导致的移码突变：874insA。1158－1167／1171－1186del 26bp和874insA突变为首次报千，突变均为新生突变。此外，新发现了一种源于你亲的错义变异1141G（P381A）。结论 我国Rett综合征患儿存在MECP2基因突变，典型的Rett综合征MECP2基因突变率大于50％。     

代谢综合征危险分层与定量计步运动关系研究

目的通过调查日常计步运动量与体质量指数、血压、血脂指标、血糖水平等代谢综合征危险组成指标来探讨定量计步运动与代谢综合征之间的关系。方法随机调查122例青壮年常规健康体检者,测量体质量指数、血压、血脂指标、血糖水平等代谢综合征危险组成指标,通过计步器测定日常计步运动量,分析计步运动量与代谢综合征之间的关系。结果在同样运动不足的情况下,男性代谢综合征发生率显著高于女性(71%比17%,P<0.01)。男性计步运动量达标者(>7500步/d)代谢综合征发生率显著低于运动不足者(14%比71%,P<0.01)。女性代谢综合征发生与计步运动量关系不显著。结论青壮年男性计步运动量与代谢综合征关系密切,运动不足者(<7500步/d)代谢综合征发生率显著高于运动达标者,代谢综合征患者运动量显著低于非代谢综合征者。青壮年女性计步运动量与代谢综合征关系不显著,发生代谢综合征的几率比男性显著较小。     

原发性前列腺滑膜肉瘤1例并文献复习

1 病例资料 患者 男,28岁.于3月前无明显诱因出现肛周疼痛,大便变细,10余天前,小便次数增多,血清前列腺特异抗原(PSA)0.05 ng/mL. MRI检查示:前列腺区不规则团块状等T1长T2信号影(图1),内可见低信号分隔,DWI扩散受限呈明显高信号,ADC图呈低信号,边界欠清,累及直肠前壁、膀胱后壁.注射Gd-DTPA后,病灶呈明显不均匀强化(图2),直肠前壁明显增厚(图3).CT检查:前列腺区不规则软组织密度团块(图4),边界不清,增强呈不均匀明显强化(图5).患者行手术治疗,术中可见盆腔巨大肿块,与膀胱壁、直肠、精囊关系密切.     

脑黑色素瘤合并多发脑膜源性肿瘤1例

患者男,29岁,间断性头痛3个月,视力不清10 d.3个月前出现间断性头痛,常清晨出现,偶伴有呕吐,吐出为胃内容物,无发热,当地医院按"感冒"治疗,头痛可缓解,右侧颜面部及脉络膜可见黑色素浸润,神经系统体征(-).     

3.0T MRI对血管母细胞瘤的诊断

血管母细胞瘤是一种良性肿瘤,手术切除肿瘤是根治血管母细胞瘤的最佳途径,一旦肿瘤完全切除可以获得治愈.对残留肿块有必要进行术后辅助放疗 ,可以达到控制肿瘤的目的[1].术前的明确诊断对治疗有很大的临床意义.因此本文回顾性分析血管母细胞瘤MRI表现,并结合文献讨论对本病诊断及鉴别诊断.     

四二五合方治疗流产后继发性闭经的临床观察

目的观察已故临床妇科专家刘奉五先生四二五合方治疗流产后继发性闭经的临床疗效。方法将64例患者随机分为两组,治疗组43例,对照组21例。治疗组给予中药治疗,对照组给予西医人工周期治疗。结果治疗组治愈率为72.09%,对照组为23.81%,两组比较有显著性差异（P〈0.05）。结论四二五合方治疗流产后闭经具有明显优势。     

皮下注射低分子肝素钙的观察与护理

低分子肝素钙具有明显的抗Xa因子活性，药效学研究表明对体内外血栓、动静脉血栓的形成有抑制作用，而对凝血和纤溶系统影响小。产生抗血栓作用时，出血可能性小。适用于预防和治疗血栓-栓塞性疾病及血栓形成。对于治疗心肌梗塞的患者有显著的疗效。不良反应是注射部位的皮下出血，而且触之疼痛，严重影响患者使用该药的依从性。有效的注射方法及正确的按压时间、方法，可降低皮下出血的发生率并减轻其症状。     

脑静脉窦血栓形成临床特征和磁共振及血管造影影像诊断

目的 评价脑静脉窦血栓形成（CVST）的临床特征及磁共振成像（MRI），磁共振血管造影（MRA）及数字减影血管造影（DSA）对其诊断价值及早期诊断、早期治疗的意义。方法 对20例经MR、DSA确诊为脑静脉窦血栓形成的病人临床资料及影像学特点进行回顾性分析。结果 12例病人无明确病因。发病时间为2d-2年，临床表现主要有颅内压增高及皮质受损表现。18例经MRI、MRA确诊，未确诊2例经DSA检查确诊。MRI和MRA能直接显示脑静脉窦闭塞及其血栓栓子。本组14例发病〈1个月的病人经静脉窦插管溶栓术及抗凝等治疗，症状和体征完全恢复或明显好转。本组中9例行静脉窦插管溶栓术，5例病人症状和体征完全恢复。结论 CVST临床表现无特异性，MRI、MRA及DSA对脑静脉窦血栓形成的诊断和随访起重要作用。发病旱期（〈1个月）予静脉窦插管溶栓术．症状和体征完全恢复机全很大。