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61.
目的评价表面处理对双固化黏结剂Panavia F与不同界面黏接强度的影响。方法测定Panavia F与牙本质使用和不使用牙本质处理剂ED primer时的剪切强度,以及Panavia F与钴铬合金、镍铬合金、纯钛、银金钯合金使用和不使用金属表面处理剂Alloy primer时的剪切强度,数据作统计学检验,分析其黏接机制。结果使用ED primer处理后,Panavia F与牙本质的剪切强度从9.1MPa提高到17.6MPa;使用Alloy primer处理后,Panavia F与纯钛的剪切强度从29.0MPa提高到35.9MPa,而与处理后的银金钯合金的剪切强度从21.6MPa提高到30.2MPa。结论Panavia F通过采用ED primer对牙本质的表面处理显著提高对牙本质的黏结强度;Alloy primer可以显著提高纯钛和贵金属与黏结剂的黏结强度,而对钴铬合金和镍铬合金则不明显。 相似文献
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目的探讨胃液实时聚合酶链反应(real-time PCR)检测儿童幽门螺杆菌(HP)感染、克拉霉素敏感性和宿主CYP2C19基因代谢型方法的准确性,旨在寻求一种方便、快速、准确检测儿童HP感染,克拉霉素敏感性和CYP2C19基因代谢型的方法。方法选取2013年7月至2014年11月北京儿童医院消化科123例13C呼气试验检查阳性的胃炎或消化性溃疡患儿进行电子胃镜检查,胃镜下取胃黏膜并收集胃液标本。从胃液中提取DNA,然后通过聚合酶链式反应(PCR)扩增Rnase P酶和cag H以检测幽门螺旋杆菌的存在。通过PCR限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分别检测HP23SrRNA和宿主CYP2C19基因代谢型。研究共利用5对引物和9条探针进行HPcag H基因和23SrRNA基因,以及人Rnase P基因和CYP2C19*2、CYP2C19*3基因检测。将胃液结果与胃黏膜活检标本HP培养和E-test药敏试验及CYP2C19基因代谢型检测结果进行比较分析。结果以胃黏膜HP培养、E-test药敏试验及CYP2C19基因代谢型检测结果为金标准,胃液实时PCR检测HP感染诊断敏感度为100%... 相似文献
63.
幽门螺杆菌的蛋白质组分析 总被引:1,自引:0,他引:1
张建中 《现代消化及介入诊疗》2003,8(3):150-152
根据Wilkins提出的“蛋白质组”(proteome)的经典概念,幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,简称Hp)的蛋白质组是指某株Hp菌株的基因组所表达的全部相应的蛋白质及其活动方式。幽门螺杆菌蛋白质组是一个动态的概念。它不仅在同一种属的不同菌株间不同;在同一菌株的不同培养温度、不同培养时间、不同的pH等不同外界环境下也是不同的。 相似文献
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目的 重组表达鼠疫耶尔森菌纤维蛋白溶解酶原激活因子(Plasminogen activator,Pla)蛋白及其特异性片段并检测其免疫反应性.方法 以鼠疫EV76株为模板,PCR扩增pla、pla-c基因,并与质粒原核表达载体(prokaryotic expression vector,pET)32a(+)连接,将pET32a(+)-pla、pET32a(+)-pla-c分别转化E.coli BL21(DE3)诱导表达;产物经镍离子金属螯合亲和层析纯化,免疫印迹(Western blot)法鉴定其免疫反应性.结果 所表达的Pla蛋白相对分子质量(Mr)为52.8×103,以包涵体形式存在;Pla-c蛋白Mr为24.0×103,以可溶形式存在;这两个蛋白质均可与鼠疫免疫血清产生特异结合反应.结论 所表达的鼠疫菌Pla及其特异性片段具有免疫反应性,为辅助诊断鼠疫提供了选择. 相似文献
65.
目的:探讨不同的转染试剂对AGS细胞形态的影响,观察这些转染试剂能否像幽门螺杆菌那样引起AGS细胞蜂鸟状改变.方法:用多聚阳离子转染试剂(多聚乙酰亚胺、梭华-Sofast)和改良的脂类转染试剂 (Effectene Transfection Reagent)分别转染AGS 细胞,观察细胞形态的变化.用幽门螺杆菌 26695菌株攻击AGS细胞,观察细胞形态的变化并与经转染试剂作用的细胞进行形态比较.结果:幽门螺杆菌攻击后4 h能引起AGS细胞发生蜂鸟状改变.两种多聚阳离子转染试剂也均能引起AGS细胞发生蜂鸟状改变,与幽门螺杆菌引起的细胞形态改变相似,大部分细胞拉长,并且不受是否转染DNA的影响.此种变化在转染4 h时便出现,与试剂剂量的增加呈正相关.当PEI的剂量为10 μL时,细胞出现凋亡,15μL时凋亡加重.改良的脂类转染试剂对 AGS细胞的形态未产生影响.结论:在研究引起AGS细胞形态改变的因素时,不宜选择多聚阳离子转染试剂;多聚阳离子引起的AGS细胞形态改变与幽门螺杆菌引起的AGS细胞形态改变之间是否存在关系值得进一步研究. 相似文献
66.
67.
【摘要】 目的 研究本维莫德对人角质形成细胞增殖、炎症细胞因子分泌、皮肤屏障蛋白合成以及信号转导与转录激活蛋白1(STAT1)磷酸化的影响。方法 体外培养HaCaT细胞,采用0.1 ~ 1 000 μmol/L本维莫德处理24 h,用CCK8法检测细胞增殖。部分HaCaT细胞分为6组,对照组仅加入DMEM培养基,刺激剂组加入10 μg/L肿瘤坏死因子α(TNF-α)和干扰素γ(IFN-γ),本维莫德组加入10 μg/L TNF-α和IFN-γ以及终浓度为1 ~ 10或1 ~ 100 μmol/L本维莫德,AhR拮抗剂组加入10 μg/L TNF-α和IFN-γ、10或100 μmol/L本维莫德以及10 nmol/L StemRegenin1(SR1),处理24 h后,酶联免疫吸附实验检测细胞培养上清液中白细胞介素(IL)-4、IL-10、IL-22和胸腺活化调节趋化因子(TARC)的水平,RT-PCR检测HaCaT细胞芳香烃受体(AhR)、细胞色素P450 1A(CYP1A1)、聚丝蛋白、内披蛋白、胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)和TARC mRNA的表达水平,Western印迹法检测聚丝蛋白、内披蛋白、TSLP和STAT1及磷酸化STAT1(p-STAT1)的蛋白表达水平,免疫荧光检测本维莫德对HaCaT细胞中AhR核转位的影响。计量资料采用非配对Student t检验和单因素方差分析进行比较,Spearman检验分析各指标间的关系。结果 0.1、1、10、100、1 000 μmol/L本维莫德干预HaCaT细胞24 h后,细胞存活率分别为(90.2 ± 2.4)%、(85.4 ± 11.9)%、(52.8 ± 14.0)%、(39.4 ± 7.9)%、(27.5 ± 3.4)%,各组间差异有统计学意义(F = 162.5,P < 0.001),50%抑制浓度为48.54 μmol/L。与刺激剂组相比,10和100 μmol/L本维莫德组HaCaT细胞分泌的IL-10水平上升(F = 16.110,P < 0.001),但100 μmol/L组IL-22(F = 6.884,P < 0.001)和10、100 μmol/L组 TARC水平(F = 7.052,P < 0.001)显著下降。与刺激剂组相比,1 和10 μmol/L本维莫德组CYP1A1 mRNA表达(P = 0.004)和10 μmol/L本维莫德组FLG mRNA表达(P = 0.040)水平显著增高,而10 μmol/L组 TARC mRNA和10 μmol/L组TSLP mRNA表达显著降低(均P < 0.01),而刺激剂组和本维莫德组间AhR mRNA的表达差异无统计学意义(P = 0.193)。与刺激剂组相比,10 μmol/L本维莫德组聚丝蛋白(P = 0.020)和1、10 μmol/L本维莫德组内披蛋白表达水平(P < 0.001)显著上升,而10 μmol/L TSLP蛋白表达水平显著下降(P < 0.001),1和10 μmol/L本维莫德组p-STAT1蛋白表达水平显著下降(P < 0.001)。与100 μmol/L 本维莫德组相比,AhR拮抗剂组IL-10分泌水平显著下降(t = 4.794,P = 0.003),TSLP mRNA的表达显著上升(t = 3.769,P = 0.005);与10 μmol/L 本维莫德组相比,AhR拮抗剂组 IVL蛋白表达显著下降(t = 5.117,P = 0.002),TSLP蛋白表达显著上升(t = 3.117,P = 0.043), p-STAT1蛋白表达无明显变化(t = 1.400,P = 0.719)。免疫荧光染色显示对照组和1 μmol/L本维莫德组中AhR绿色荧光主要表达于HaCaT细胞胞质中,细胞核中基本无荧光表达;而在10 μmol/L和20 μmol/L本维莫德组HaCaT细胞的细胞质和细胞核均可见高密度绿色荧光。结论 本维莫德可通过活化AhR信号通路抑制HaCaT细胞增殖,调节炎症因子分泌,上调皮肤屏障相关因子的产生和抑制STAT1磷酸化。 相似文献
68.
目的比较胃黏膜标本运输状态对幽门螺杆菌(Hp)检出率的影响,为Hp分离前胃黏膜标本的保存、运输方法的选择提供科学依据。方法随机抽取快速尿素酶检测阳性胃黏膜标本72份,分别保存于含有20%甘油的脑心浸液中。根据标本到达实验室的状态分为3组:完全溶解液体状态组(20份),部分冻融状态组(32份)和冰冻状态组(20份)。所有标本都来源于13C呼气试验(13C UBT)阳性患者。标本经研磨后接种于哥伦比亚和Karmali 5%脱纤维羊血琼脂培养基,置37℃微需氧环境(5.0%O2,10.0%CO2,85.0%N2)培养3~11 d。挑取单菌落,进行革兰染色检查及生化和PCR鉴定,比较3组标本Hp检出率差异。结果冰冻状态组标本Hp检出率95.0%(19/20),完全溶解液体状态组Hp检出率为15.0%(3/20),部分溶解状态组Hp检出阳性率59.4%(19/32),三组Hp检出率差异有统计学意义(P<0.05)。结论冻融胃黏膜标本Hp检出率显著降低。 相似文献
69.
本文采用ABC法标记,观察NEU癌基因产物P~(185)在正常乳腺、不典型增生和乳腺癌组织中的分布,旨在研究乳腺癌前病变组织中不典型增生细胞P~(185)表达的变化规律,试图应用P~(185)免疫标记作为乳腺癌早期诊断的辅助手段。 108例乳腺病变组织均取自外科手术切除标本.按照1982年WHO乳腺肿瘤组织学分类,分为良性组(32例)和恶性组(69例),以及7例正常乳腺组织。良性组又按Page的 相似文献
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