荧光分子扩散动态测量在肥大细胞脱颗粒体外检测中的应用

 目的：建立基于荧光分子扩散动态测量的肥大细胞脱颗粒的体外快速评估方法。方法：分别采用β-己糖苷酶法、扫描电镜法及光栅图像关联光谱法（raster image correlation spectroscopy, RICS）对稳定表达CD63-绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）的大鼠肥大细胞株RBL-2H3的脱颗粒过程进行评价,比较不同检测方法的灵敏度。结果：β-己糖苷酶法的检测灵敏度为5 mg/L,扫描电镜法的检测灵敏度均为3.9×10-2 mg/L,RICS方法也在3.9×10-2 mg/L即可检测到扩散系数的降低,并与未给药组有显著差异。结论：RICS方法比传统β-己糖苷酶法更灵敏,虽然与电镜方法灵敏度相当,但该方法较扫描电镜法简便易行成本低,易操作,且所观察的指标为扫描电镜所不能做到的活体动态观测,能在细胞脱颗粒早期即可判定过敏反应的发生,具有传统方法不具备的优势,有潜力成为制药企业质量控制的标准方法,或临床过敏性物质筛查的有利工具。     

电泳光散射法测定异丙酚微乳剂的动电电位

目的采用电泳光散射法测定异丙酚微乳剂的动电电位 ,为微多相药物制剂物理稳定性的考察提供简便、快速、有效的方法。方法制备 3种处方不同、工艺相同的异丙酚微乳剂Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ ,以NICOMP3 80 /ZLS系统分别测定其电泳光散射光谱。结果与无外加电场情况相比 ,有外加电场时 ,乳剂Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ的光谱谱线向左频移分别为 (2 9 82± 0 1 2 )、(1 2 5 4± 0 44)及 (2 0 1 8± 1 1 2 )Hz,相应动电电位为 (4 5 40± 0 0 4)、(1 9 0 9± 1 1 2 )与 (3 0 72± 0 46)mv。结论 3种微乳剂电泳光散射光谱有显著差别 ,动电电位的大小顺序为乳剂Ⅰ >乳剂Ⅲ >乳剂Ⅱ。     

西妥昔单抗疗效与皮疹相关性的系统评价

目的系统评价西妥昔单抗疗效与皮疹的相关性。方法计算机检索Pub Med、EMbase、The Cochrane Library(2013年第1期)、CBM、VIP、CNKI等数据库,查找关于西妥昔单抗的皮疹严重程度与疗效相关性的文献,检索时限截至2013年8月。由2位评价员按纳入与排除标准独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的方法学质量后,采用Rev Man 5.2软件进行Meta分析。结果共纳入32个研究,1 543例患者。Meta分析结果显示:发生皮疹患者的治疗有效率明显高于未发生皮疹的患者[RR=1.53,95%CI(1.23,1.91),P=0.000 2],发生重度皮疹患者的治疗有效率明显高于轻度皮疹患者[RR=2.42,95%CI(1.89,3.11),P<0.000 01]。结论西妥昔单抗的疗效与皮疹存在相关性。     

右旋糖酐40注射液与盐酸川芎嗪注射液联合静滴致过敏性休克1例

患者,女,62岁,因头晕伴右上肢无力于2008年12月20日入院。患者既往有高血压史20余年,脑供血不足病史5年,无确切药物过敏史。入院查体：T 36.5℃,BP180／100mmHg,P85次·min^-1,R20次·min^-1,发育正常,营养中等,查体合作,双肺呼吸音正常,心界正常,肝、脾未肿大。右上肢肌力Ⅳ级,其余肢体肌力正常。     

践行科学发展观强化县级药品医疗器械技术监管能力建设的思考

药品、医疗器械技术监督是药品监督管理部门实施行政监督的重要技术依托和技术支持,是药品监督体系重要组成部分。药品技术监督建设的进程也从侧面反应一个地区药品监督进程,没有强有力的药品技术监督做后盾,药品行政监督就不会得到有力支持。县级药品监督管理部门在实施监督工作组成中很大一部分精力要用到调查、取证等工作中,而相当数量调查取证是在经过技术监督部门对药品和医疗器械的定性后展开的,     

蝎镇痛活性肽AS的一个二硫键对镇痛活性的影响

目的研究蝎镇痛活性肽AS中二硫键C12-C62对其生物活性的影响。方法利用一步聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)分别用Ser替代蝎镇痛活性肽AS中第12位、第62位及第12位和第62位的Cys,从而构建其3个突变体。采用金属离子螯合亲和层析方法对表达突变体蛋白进行纯化。采用小鼠扭体法测定3个突变体的镇痛活性。结果构建了3个突变体质粒,在BL21(DE3)中实现了可溶性表达。采用金属离子螯合层析方法获得了电泳纯样品。其镇痛活性明显低于Bmk AS(P<0.01)。结论3个突变体与rBmK AS镇痛活性有明显差异,二硫键C12-C62与蝎毒镇痛活性密切相关。     

对基础药学理科基地专业分子生物学实验教学的思考

总结几年来从事基础药学理科基地专业分子生物学实验教学的体会，从构成分子生物学实验课程的三要素——实验课程本身、教师、学生三个角度提出一些意见和建议。     

重组蝎毒素基因表达的研究进展

目的介绍重组蝎毒素基因表达的研究进展。方法根据近年来国内外公开发表的有关研究论文 ,综述重组蝎毒素基因表达的研究。结果与结论通过筛选得到的蝎毒素基因或化学合成的编码蝎毒素的基因分别在大肠杆菌、酵母细胞、哺乳动物细胞、昆虫和植物中都有过表达尝试。重组蝎毒素基因表达的关键是如何使有活性的重组蛋白高水平表达     

东亚钳蝎毒抗癫痫肽作用机制研究

本文用整体大鼠和猫隔离皮层,研究了东亚钳蝎毒抗癫痫肽(AEP)的抗癫痫作用机制。实验表明,AEP的抗癫痫作用依赖于单胺类神经递质的存在。     

转基因烟草表达东亚钳蝎抗神经兴奋肽Ⅱ的研究

研究将东亚钳蝎（Buthus martensii Karsch）抗神经兴奋肽Ⅱ（ANEPⅡ）基因序列定向克隆到植物表达载体pBI121中，构建了植物表达载体pBI-ANEPⅡ。采用三亲交配法和液氮冻融法将重组质粒pBI-ANEPⅡ导入农杆菌中，获得了工程菌pBI-ANEPⅡ／LBA4404。通过农杆菌介导的叶圆盘法转化烟草叶片外植体，在含卡那霉素的培养基上进行转化体的筛选，获得了转基因烟草。通过PCR检测、RT-PCR和Western blotting鉴定，检测结果表明ANEPⅡ蛋白在转基因烟草植株中得到表达。