Vit.C,E对60Co γ线照射家兔血清和肝脏SOD和MDA影响

目的：探讨Vit.C,E对^60Coγ线照射家兔的保护作用以及剂量效应关系。方法：中国本兔随机分为12组，每组5只，Vit.C5组iv，剂量分别为10，20，40，80和160mg.kg^-1.Vit.E油剂ig5组，剂量分别为5，10，20，40和80mg.kg^-1,第3日进行^60Coγ线（4．5Gy）照射家兔，每5日处死，剖腹取肝脏和腹腔静脉血，分别测定超氧化物歧化酶（SOD）的催化活必和丙二醛（MDA）的含量变化，结果：辐射动物补充Vit.C和Vit.E组的肝SOD的催化活性与阴性对照组相比明显升高（P＜0．01），Vit.E的作用更明显，呈现了一定剂量效关系，各Vit.C组肝脏MDA的含量变化不显著（P＞0．01），但血清MDA的含量轻微下降，各Vit.E组肝脏和血清中的MDA的含量均显著降低（P＜0．01），且呈出一定的剂量效应关系。结论：单独使用Vit.C的抗氧化作用，有时还会加重损伤；单独使用Vit.E具有一定的SOD活性保护和MDA清除作用，存在剂量效应关系，但对外周血细胞和免疫细胞则无明显的保护作用。     

氯气吸入致大鼠肺血管内皮细胞的线粒体损伤及红景天苷的干预作用

目的：观察氯气致大鼠肺损伤过程中,线粒体的结构与功能变化及红景天苷的干预作用,探讨红景天苷可能的保护机制。方法：36只雄性SD大鼠随机分为6组,分别为未染毒组（给予空气）,以及氯气染毒后0.5、1.5、3、6和9 h组,给予1 200 mg/m³氯气暴露处理5 min。另24只雄性SD大鼠随机分为4组,分别为氯气暴露组、红景天苷干预组、红景天苷对照组和阴性对照组,氯气染毒条件同上,红景天苷干预组和红景天苷对照组在氯气染毒前30 min和染毒后15 min各给予1次300 mg/kg红景天苷灌胃,阴性对照组给予生理盐水灌胃。比色法检测各组大鼠肺泡灌洗液（BALF）和血清中乳酸脱氢酶（LDH）的活力;透射电镜下观察氯气暴露后3 h肺组织血管内皮细胞线粒体超微结构改变;定磷法检测肺组织Na⁺,K⁺-ATP酶和Ca²⁺,Mg²⁺-ATP酶的活力,低温差速离心法分离并提取线粒体蛋白;Western blot法检测肺组织或线粒体中Tom 20、PINK1以及Parkin蛋白表达水平。结果：与未染毒组相比,氯气暴露0.5 h后,大鼠BALF中LDH活力显著升高（P < 0.05）;肺组织PINK1、Parkin、Tom20蛋白表达水平均显著升高（P < 0.05）,且Tom20蛋白表达在染毒后3 h最高（P < 0.05）;故选取染毒后3 h为干预时间点。透射电镜结果显示,氯气暴露后3 h,肺血管内皮细胞中线粒体明显肿胀,嵴数量减少或消失。与阴性对照组相比,氯气染毒后大鼠肺组织中PINK1、Parkin以及线粒体PINK1蛋白表达显著升高（P < 0.05）,线粒体Parkin蛋白表达显著下降（P < 0.05）;肺组织Na⁺,K⁺-ATP酶和Ca²⁺,Mg²⁺-ATP酶以及血清LDH的活力均显著升高（P < 0.05）。红景天苷干预可显著逆转因氯气暴露引起的上述检测指标的异常表达（P < 0.05）。结论：氯气致大鼠急性肺损伤过程中,血管内皮细胞线粒体结构与功能受损,呈时间效应关系。红景天苷可能通过保护线粒体,改善氯气暴露引起的急性肺损伤。     

光气急性中毒机制与防护研究

光气（COCl₂）,化学名为二氯碳酰,于1812年采用一氧化碳与氯气在强光照射下合成,因而得名“光气”,气（COCl₂）,是致死性化学武器中的重要战剂,也是化学恐怖威胁的化学毒物之一。2005年美国环保署(U.S. Environmental Protection Agency）的白皮书认为,光气是目前中毒机制不清、缺乏有效救治手段的重要化学毒剂。自光气问世并作为军用战剂的近百年来,光气中毒救治方法始终未能取得突破,关键是光气的中毒机制不清楚。目前全世界光气的储备估计有50亿磅（约230万吨）。由于光气在战争、恐怖、工业泄露、突发事件等释放后的巨大威胁性,因此国际上对其研究的热情始终不减,重点在于光气中毒机制研究。 长期以来,关于光气急性中毒机制始终存在争论。光气急性中毒,肺泡灌洗液蛋白含量、磷脂含量和酶水平增加,同时炎症细胞也增加,多形核细胞和淋巴细胞浸润以及出现红细胞渗出。光气通过氧化方式,可以损伤许多生物大分子。这种活性源自至少两种化学反应：酰化作用与水解后的盐酸作用。光气急性中毒机制占主导学说的是酰化理论,氧化应激损伤也有一定影响。酰化作用被认为是光气中毒致死的主要机制。酰化作用引起蛋白和脂质的破坏,膜结构的不可逆改变,酶和其他细胞功能的损伤。氧化应激与炎症反应损伤是近年引起国际上关注新的中毒损伤机制。急性光气接触几天后,作为肺损伤的应激反应,组织抗氧化酶的水平升高,如还原性谷胱甘肽和超氧物歧化酶。接触光气后,肺细胞的糖酵解和摄氧量下降,导致细胞内三磷酸腺苷和环磷酸腺苷的减少。这与上皮细胞、间质细胞、内皮细胞水的摄入量增加有关（Helm,1980）。光气染毒后还可引起脂质过氧化。呼吸道吸入22 ppm的光气20 min后,脂质过氧化产物（如组织和终末细支气管肺泡TBARs）含量升高。光气中毒肺泡灌洗液中的前列腺素E2(PGE2)、白细胞三烯B4(LTB4),白细胞三烯C4, D4和E4(LTCDE4),细胞活性显著降低。光气能诱发花生四烯酸代谢变化可能与其毒性有关,光气刺激了花生四烯酸代谢中脂氧合酶产物的合成,而脂氧合酶产物参与肺水肿的形成。自“六五”我军对光气、双光气立项研究以来,一直承担全军此类毒剂的指令性或重点项目研究,对双光气中毒机制研究取得突破性进展。光气水解反应产物为二氧化碳和盐酸,可与生物大分子反应,例如酶、蛋白质和其他极性磷脂,产生共价加成物,还可快速发生水解反应。酸直接烧伤是致死性光气中毒的主要机制。还提出了一套救治方案,获得了军队科技进步奖,相关成果在全国推广,为窒息性毒剂的中毒机制和防治研究做出了一定贡献,由我们起草、卫生部1988年颁布的“光气中毒诊断救治标准”目前仍在使用。经过“十五”军队指令性课题的进一步深入研究,对窒息性毒剂光气的研究取得显著进展,某些方面取得了较大,本文对此进行了综述性回顾。     

丙酮酸乙酯对光气致急性肺损伤的保护作用

目的 光气中毒可以引起急性肺损伤,常伴有肺水肿发生,其重要特征是在临床上具有一定的潜伏期。有研究表明炎症和氧化应激参与了光气诱导的急性肺损伤的发生。丙酮酸乙酯（EP）是丙酮酸的稳定代谢产物,具有重要的抗炎和抗氧化特性。它可以抑制晚期炎症因子以及活性氧（ROS）的产生。本研究试图证明EP可以在肺水肿潜伏期的不同阶段分别通过抑制炎症和氧化应激缓解光气诱导的急性肺损伤的发生。方法 本文主要研究了EP对光气导致的机型肺损伤的作用及其机制。急性肺损伤指标包括分析生存率、血氧指数、肺水产生以及血管伊文兰（Evans Blue）渗透。肺炎症指标包括中性粒细胞计数、髓过氧化物酶（MPO）活性以及炎症因子的表达。肺组织的氧化还原状态指标包括ROS产生、抗氧化酶超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胺酸半胱氨酸连接酶（GCLC）的表达和活性以及肺组织脂质过氧化TBARs。结果 EP改善了光气诱导的肺水肿和肺功能失调,从而提高了大鼠生存率。在光气诱导的肺水肿潜伏期早期,EP抑制了肺组织中性粒细胞呼吸爆发,阻断了核转录因子κB （NF-κB）p65亚基的核转位,从而降低了肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α （TNF-α）,白介素1β（IL-1β）和IL-8的水平。然而,在潜伏期晚期,EP抑制了肺泡灌洗液以及肺组织中晚期炎症因子HMGB1表达以及sPLA2-ⅡA活性。相应的,在RAW264.7细胞中,EP剂量依赖的抑制了这两种炎症因子,这主要是通过抑制JNK/SAPK和p38 MAPK磷酸化。更重要的是,EP降低了光气染毒大鼠肺组织中ROS的产生以及脂质过氧化水平。这主要是通过阻断了光气对氧化还原转录因子Nrf2的核转位的抑制,从而增加了下游抗氧化酶CAT, SOD以及GCLC的表达。结论 EP缓解了光气诱导的肺水肿,提高了动物存活率。这表明EP对于光气诱导的急性肺损伤具有潜在的治疗价值。其潜在机制是EP不但通过抑制中性粒细胞呼吸爆发以及下游早期炎症因子的表达缓解了肺组织炎症反应,而且,更重要的是EP通过增加肺组织抗氧化力,从而抑制了晚期炎症因子以及氧化应激。     

八年制学员卫生毒理学教学体会

通过八年制卫生毒理学的教学,提出教学与实验性研究相结合,培养学员的科研态度;将教员讲授与学员自学相结合,培养学员自主学习的能力;将比较式教学与主体式教学相结合,培养学员演绎思维和触类旁通的能力以及将传授知识与激发学员学习兴趣相结合,使学员树立投身医学科研事业的坚定信念,取得较好的教学效果.     

胰岛素对氧化还原平衡的调控作用：重新认识胰岛素作用本质

近年来，糖尿病发病率急剧增加。大量的研究充分表明，氧化应激在糖尿病发病过程中发挥关键性作用。作为机体内一种重要的激素，胰岛素对糖脂代谢具有不可替代的涮控作用。在胰岛功能降低的糖尿病患者中，注射胰岛素是改善糖尿病并发症的一种重要手段。最近，有研究发现，胰岛素可以对糖尿病患者某些抗氧化酶的表达产生影响。在本实验中，我们系统研究了胰岛素在体外、体内对氧化还原平衡的影响。     

红景天苷对氯气暴露致急性肺损伤肺血管通透性的保护作用

目的：观察红景天苷对氯气暴露致大鼠急性肺损伤肺血管通透性的干预作用,探讨其改善肺损伤的可能作用机制。方法：40只SD大鼠随机分为4组,分别为阴性对照组、氯气暴露组、红景天苷干预组和单纯红景天苷组。阴性对照组和单纯红景天苷组以空气为对照,氯气暴露组和红景天苷干预组给予1 200 mg/m³氯气动态染毒,染毒时间为5 min;红景天苷干预组和单纯红景天苷组在氯气染毒前30 min和染毒后15 min分两次给予300 mg/kg红景天苷灌胃,阴性对照组和氯气暴露组予以等量生理盐水灌胃。常规苏木精-伊红染色法（HE）染色后观察大鼠肺损伤的程度;二辛可宁酸（BCA）蛋白定量法测定血浆和支气管肺泡灌注液（BALF）中蛋白含量并计算肺血管通透指数;肺组织冰冻切片采用二氢乙啶（DHE）探针检测肺组织活性氧（ROS）的含量;试剂盒检测BALF中丙二醛（MDA）、氧化型谷胱甘肽（GSSG）和还原型谷胱甘肽（GSH）的含量以及超氧化物歧化酶（SOD）的活力;Western blot法检测肺组织中SOD2的表达。结果：氯气暴露后3 h观察,与阴性对照组比较,氯气暴露组肺组织可见大鼠支气管柱状上皮损伤、肺泡结构破坏以及肺间隔轻度炎细胞浸润,BALF中SOD活力升高,差异有统计学意义（P<0.05）;与氯气暴露组比较,红景天苷可升高BALF中GSH含量,降低因氯气暴露引起的肺组织ROS水平和BALF中MDA和GSSG含量（P<0.05）,下调肺组织中SOD2蛋白的表达水平（P<0.05）。结论：红景天苷可能通过降低肺内氧化应激水平,改善氯气暴露引起的急性肺损伤。     

复合抗氧化剂对阿霉素化疗引起的肝癌大鼠心脏损伤的保护作用

目的 :观察大鼠肝癌模型腹腔阿霉素化疗引起的心脏氧化损伤以及复合抗氧化剂的保护作用 .方法 :采用Walk er 2 5 6肿瘤细胞株接种大鼠皮下 ,得到实体瘤 ,将实体瘤分割成小块植入大鼠肝脏 ,制成大鼠移植性肝癌模型 ,将肝癌模型大鼠随机分成 3组 ,分别为模型组、单纯化疗组和抗氧化剂组 ,同时选取经手术但未接种肿瘤的大鼠作为阴性对照组 .抗氧化剂组每日给予复合抗氧化剂灌胃 ,单纯化疗组和抗氧化剂组每 2d进行一次腹腔阿霉素化疗 ,剂量为 2mg/kg ,8wk后处死大鼠 ,取心脏制成匀浆 ,分别测定丙二醛 (MDA)、总超氧化物歧化酶 (T SOD)、总抗氧化力 (TAC)和总蛋白含量 .结果 :单纯化疗组的MDA含量较阴性对照组和模型组显著升高 (P <0 .0 1 ) ,而抗氧化剂组的MDA含量较单纯化疗组显著降低 (P <0 .0 1 ) .单纯化疗组T SOD活性和TAC非化疗组显著降低 (P <0 .0 1 ,P <0 .0 5 ) ,抗氧化剂组T SOD活性和TAC较单纯化疗组显著升高 (P <0 .0 1 ,P <0 .0 5 ) .结论 :大鼠肝癌腹腔阿霉素化疗可以引起心脏的氧化损伤 ,而复合抗氧化剂可以起到一定的保护作用     

60Co-γ射线照射大鼠损伤作用中硫辛酸对谷胱甘肽的调节与再生

目的: 以60Co-γ射线照射大鼠损伤为模型,研究硫辛酸对大鼠谷胱甘肽(glutathione, GSH)的调节和再生作用. 方法: 二级SD大鼠40只,雌雄各半,随机分为4组,为阴性对照组、阳性对照组、低剂量组(硫辛酸0.2 g*L-1),高剂量组(硫辛酸0.4 g*L-1),60Co-γ射线照射剂量为4 Gy. 对阳性组、低剂量组、高剂量组动物进行照射后,低剂量组和高剂量组动物分别给予硫辛酸油溶液灌胃(5 mL*kg-1). 阴性组和阳性组分别给予处理精炼油灌胃作为对照;连续灌胃给药2 d后断头处死,收集全血静置、析出血清,用荧光分光法及分光光度法测定GSH,MDA和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GPx)等指标. 结果: 辐射损伤引起还原型谷胱甘肽含量的降低而氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione, GSSG)的含量增高(P<0.05);补充了硫辛酸能增加还原型谷胱甘肽的含量,且随着给药剂量的增加而升高(P<0.05),GSSG则呈相反趋势;硫辛酸能降低辐射损伤造成的GPx的活性的应激性增高(P<0.05). 结论: 硫辛酸对辐射损伤造成的氧化损伤具有保护作用,并能调节抗氧化剂GSH的含量,提高机体的抗氧化能力.