Rg1、Rb1对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用及其对肾组织TGF-β1mRNA与蛋白表达的影响

目的 探讨人参皂甙Rg1、Rb1对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1mRNA及蛋白表达的影响.方法 采用腹腔内一次性注射STZ 55 ms/kg复制糖尿病大鼠模型.各组分别给予相应药物灌胃治疗;每周测体重,于第4、8、12周末用考马斯亮蓝法测24 h尿蛋白.12周后检测BUN、Scr、TG,计算肾重体重比,肾组织进行HE、Mallory染色,观察大鼠肾脏病理学变化.用免疫组化、原位杂交方法 分别检测肾组织TGF-β1mRNA及其蛋白的表达.结果 Rg1、Rb1组大鼠体重各周均高于模型组,但没有统计学差异.Rb1组大鼠肾重体重比具有极显著性差异(P<0.01),Rg1大剂量组、Rg1小剂量组有显著性差异(P<0.05).与模型组比较,Rg1大剂量组、Rg1小剂量组及Rb1组大鼠在第4周、第8周,可以降低24 h尿蛋白含量,有极显著性差异(P<0.01),第12周,Rg1大剂量组、Rg1小剂量组及Rb1组有显著性差异(P<0.05).血液生化方面与模型组比较,Rg1大剂量组、Rg1小剂量组及Rb1组可以降低大鼠BUN,均有极显著性差异(P<0.01);可以降低Scr,Rg1大剂量组及Rb1组有极显著性差异(P<0.01),而Rg1小剂量组有显著性差异(P<0.05);同时Rg1、Rb1可以减轻肾脏病理学改变.与模型组比较,Rg1小剂量组、Rg1大剂量组及Rb1组可以减少肾组织TGF-β1蛋白的表达,均有极显著减少(P<0.01);Rg1小剂量组、Rg1大剂量组及Rb1组TGF-β1mRNA表达,具有有极显著性差异(P<0.01).结论 Rg1、Rb1通过抑制DN大鼠肾组织TGF-β1mRNA及蛋白表达,进而保护DN大鼠肾脏功能,这可能是Rg1、Rb1防治糖尿病肾病进展的机制之一.     

糖尿病肾病“肾痿”学说的建立与阐释

糖尿病肾病（DiabeticKidneyDisease,DKD）是糖尿病（DiabetesMellitus,DM）严重的远期并发症和DM患者主要死因之一,严重威胁着人类健康。赵宗江教授首次提出了糖尿病肾病“肾痿”学说,并领导科研团队长期致力于“肾痿”学说指导下的糖尿病肾病研究,取得了一定的成果,归纳起来讲,主要在整体动物实验和体外细胞实验两个方面,从药效学、氧化应激水平和信号转导通路等角度进行深入研究。围绕着减少细胞外基质在肾小球系膜区以及肾小管间质的沉积、抑制足细胞损伤、抑制足细胞凋亡、抑制和逆转足细胞转分化、抑制肾小管上皮细胞转分化等科学问题,系统地阐明了糖尿病肾病“肾痿”学说的科学内涵。本文主要对“肾痿”学说的提出和相关的研究成果进行归纳整理与总结,以期补充“脏痿”学说和发展中医理论。     

糖肾宁含药血清对高糖刺激肾小管上皮细胞增殖作用及RhoA/ROCK信号通路影响的实验研究

目的：探讨糖肾宁含药血清对高糖刺激肾小管上皮细胞增殖作用及RhoA/ROCK信号通路的影响。方法：10% FBS的RPMI 1640培养细胞,培养细胞分为正常组、模型组、厄贝沙坦组和糖肾宁组,按每孔3000个细胞接种于96孔板中。每组8个复孔,加入6%的各组含药血清培养,分别于12、24、48、60 h观察细胞形态并应用MTT法检测细胞增殖情况;Western blotting检测RhoA、ROCK1、α-SMA和E-Cadherin蛋白的表达。结果：正常组细胞呈扁平不规则多角形,高糖刺激下,细胞呈梭型,加入含药血清后呈扁平不规则多角形。MTT：24、48 h,正常组与模型组比较,有极显著性差异（P<0.01）,60 h,正常组与模型组比较,有显著性差异（P<0.05）;24 h,糖肾宁组与厄贝沙坦组比较,有显著性差异（P<0.05）;48 h,糖肾宁组与厄贝沙坦组、Y27632组比较,有极显著性差异（P<0.01）;60 h,糖肾宁组与厄贝沙坦组、Y27632组比较,有显著性差异（P<0.05）。Western blotting：正常组与模型组、Y27632组比较RhoA蛋白表达减少,有极显著性差异（P<0.01）;糖肾宁组与模型组比较,有极显著性差异（P<0.01）;糖肾宁组与Y27632组比较,有显著性差异（P<0.05）。正常组与模型组比较ROCK1蛋白表达减少,有极显著性差异（P<0.01）;Y27632组、各治疗组和模型组比较,有显著性差异（P<0.05）。正常组与模型组比较α-SMA蛋白表达减少,有极显著性差异（P<0.01）;Y27632组、各治疗组和模型组比较,有显著性差异（P<0.05）。正常组与模型组组比较E-Cadherin蛋白表达增加,有显著性差异（P<0.05）;Y27632组与糖肾宁组比较,有显著性差异（P<0.05）;模型组与Y27632组、各治疗组比较,有显著性差异（P<0.05）。结论：糖肾宁可抑制高糖培养肾小管上皮细胞增殖和RhoA/ROCK信号通路相关分子的表达,逆转肾小管上皮细胞转分化、减轻肾间质纤维化、延缓DKD进程。     

Rg1、Rb1对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用及其对肾组织MCP-1 mRNA与蛋白表达的影响

目的：探讨人参皂苷Rg1、Rb1对糖尿病肾病大鼠肾组织MCP-1 mRNA及蛋白表达的影响。方法：75只雄性SD大鼠,正常组10只,其余采用腹腔内一次性注射STZ55mg/kg复制糖尿病大鼠模型,造模后血糖≥16.7mmol/L,尿糖（＋＋＋＋）以上者列入实验对象。随机分为模型组、厄贝沙坦组、Rg1大剂量组、Rg1小剂量组及Rb1组,各组分别给予相应药物灌胃治疗;每周测体重,于第4、8、12周末分别留尿用考马斯亮蓝法测24h尿蛋白。12周后处死大鼠,取血清检测BUN、Scr、TG。取肾脏称重,计算肾重体重比,将肾组织固定、包埋、切片后进行HE、PAM、Mallory和Masson染色,观察大鼠肾脏病理学变化。用免疫组化、原位杂交方法分别检测肾组织MCP-1 mRNA及其蛋白的表达。结果：各治疗组大鼠体重各周与模型组比较均有所增加,但无统计学差异。与模型组比,肾重/体重,Rb1组有统计学差异（P〈0.01）,Rg1大、小剂量组有统计学差异（P〈0.05）。24h尿蛋白定量与模型组比较,4周、8周,Rg1大、小剂量组及Rb1组有统计学差异（P〈0.01）;12周,Rg1大、小剂量组及Rb1组有统计学差异（P〈0.05）。Rg1、Rb1可以见降低BUN、Scr与TG,与模型组比较,BUN均有统计学差异（P〈0.01）,Scr为Rg1大剂量组及Rb1组有统计学差异（P〈0.01）,Rg1小剂量组（P〈0.05）;TG治疗组均有降低趋势,但无统计学差异。Rg1、Rb1均可以减轻DN大鼠肾脏病理损害。同时Rg1、Rb1还可以减少肾组织MCP-1蛋白及其mRNA的表达,与模型组比较,Rg1大、小剂量组及Rb1组肾组织MCP-1蛋白的表达均显著减少,具有统计学意义（P〈0.01）,Rg1大、小剂量组及Rb1组肾组织MCP-1 mRNA表达明显减少,其中Rg1大剂量组与模型组相比有统计学意义（P〈0.05）。结论：Rg1、Rb1可以改善DN大鼠肾脏功能、减轻肾脏病理损害,其具体机制可能与下调大鼠肾组织MCP-1 mRNA及蛋白表达水平有关。     

肾康注射液延缓5/6肾切除大鼠慢性肾功能衰竭进展的机理探讨

目的：探讨肾康注射液延5／6肾切除(5／6NX)大鼠延缓慢性肾功能衰竭的作用机理。方法：采用苯那普利、来适可为实验对照组,研究了肾康注射液对5／6NX大鼠肾小球硬化、肾功能、高脂血症及肾组织TGF-β1的影响。结果：肾康注射液可以显著降低5／6肾切除大鼠的血压、24h尿蛋白定量、血尿素氮(BITN)、血肌酐(Scr)、胆固醇(CH)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL),明显减轻5／6肾切除大鼠的肾脏病理损害,显著抑制肾组织TGF-β1的表达。对以上指标的改善作用,与苯那普利、来适可无明显差异。结论：肾康注射液可以减轻5／6肾切除大鼠肾脏病理损害,改善肾功能,降低尿蛋白含量、高脂血症及肾组织TGF-β1。     

肾康注射液对肾小管上皮细胞转化生长因子-βmRNA基因表达的影响

目的：探讨肾康注射液对体外培养的肾小管上的细胞LLC-PK1转化生长因子-βmRNA（TGF-βmRNA）基因表达的影响。方法：用逆转录聚合酶链反应（TR-PCR）、Northern印迹杂交（Northern blot）方法，以单味大黄注射液为实验对照组，检测肾康注射液对肾小管上皮细胞TGF-βmRNA基因表达的影响。结果：肾康注射液可以明显下调肾小管上皮细胞TGF-βmRNA基因的表达，并呈剂量依赖关系，肾康注射液作为明显优于同等含量的单味大黄注射液。结论：肾康注射液下调肾小管上皮细胞TGF-βmRNA基因表达，是其防治慢性肾功能衰竭（CRF）的机理之一。     

基于数据挖掘分析256例慢性肾脏病肾阳虚证候的演变规律

目的 分析肾阳虚证候在不同慢性肾脏病（CKD）病程阶段和时间演变中的变化特征，从而探索肾阳虚证候在CKD中的演变规律。方法 按照相关标准于2020年10月至2022年9月收集256例CKD患者的证候信息，制定“慢性肾脏病肾阳虚证评价量表”，利用SPSS Statistics 20.0软件、SPSS Modeler 18.0软件、Gephi 0.9.2软件和R 4.2.1软件，采用复杂网络分析、关联规则分析、概率转移矩阵分析和卡方检验等方法对CKD各期人群的证候信息及1周年时的证候变化进行数据挖掘和统计分析，并对各期患者的肾阳虚证进行综合评价。结果 在CKD人群中，女性中的肾阳虚证比例显著高于男性（P<0.01），65岁以上人群中占比高于65岁以下人群，并且随着肾病进展，肾阳虚证人群比例上升，CKD Ⅳ~Ⅴ期人群中的肾阳虚证比例显著高于CKD Ⅰ~Ⅱ期（P<0.01）。CKD Ⅰ~Ⅴ期，暗淡舌频率持续升高，胖大舌和齿痕舌在CKD Ⅲ期以后频率升高，厚苔和腻苔在CKDⅤ期位居频率分布的前3位，在CKD Ⅲ期以后，位居频率分布前3位的全是以肾阳虚证为特征的弱脉、沉脉和细脉。舌脉复杂网络分析显示CKD终末期患者的核心舌脉特征是齿痕舌、白苔、沉脉和细脉。症状频数分析和复杂网络分析结果显示，畏寒喜暖、膝软乏力、形寒肢冷是CKD Ⅰ~Ⅲ期肾阳虚证患者症状频率分布位居前3位的主要症状，在CKD Ⅳ~Ⅴ期，困倦乏力、水肿、夜尿频多等阳虚水泛的表现成为特征性症状。水肿、面色晄白、腰膝酸软、便溏、精神萎靡症状的积分及肾阳虚证总积分随疾病进展逐渐升高，在CKD不同阶段之间差异有统计学意义（P<0.05，P<0.01）。病性证素频数分析显示，随着疾病进展，阳虚证、痰湿证、血瘀证、浊毒证频率逐渐升高并且在CKD不同阶段分布具差异有统计学意义（P<0.05，P<0.01）。复杂网络分析结果显示阳虚证是贯穿CKD各期的核心证素，是CKD的主要证素类型，而痰湿证、血瘀证和浊毒证等兼证在CKD中后期逐渐显现。在CKD肾阳虚证人群中，作为兼夹证的痰湿证、血瘀证和浊毒证在不同CKD阶段的分布具差异有统计学意义（P<0.05，P<0.01），关联规则分析显示，随着疾病进展，痰湿证、血瘀证、浊毒证和饮停证这些兼证与肾阳虚证的关联程度逐渐增强。比较CKD肾阳虚证在1年内的变化情况，结果显示，病位以肾为中心，在脾、胃、心和肝之间传变，肾阳虚证有23.81%的概率向气虚相关证候（脾肾气虚、肝郁脾虚和心气亏虚）转化，23.79%向阴虚相关证候（肝肾阴虚，气阴两虚和肝胃阴虚）转化，9.52%向湿证相关证候（痰湿内阻和风湿痹阻）转化。而脾肾气虚证有20%向肾阳虚证转化，气虚血瘀证有33.33%向肾阳虚证转化。结论 随着CKD Ⅰ期进展到CKD Ⅴ期，肾阳虚症状的严重程度在逐渐加重，肾阳虚证候特征逐渐显著，并且痰湿、血瘀和浊毒等实邪证素在逐渐增多。随着时间的变化，CKD肾阳虚证有向气虚、阴虚和湿证相关证候演变的趋势。这些规律的发现，为CKD辨证论治提供了理论基础和参考指导。     

慢性肾脏病肾阳虚证特点解析

慢性肾脏病(chronic kidney disease，CKD)是一种起病隐匿的临床综合征，随着社会经济发展和生活方式的转变，其发病率呈现出逐年增高的趋势，严重影响着人们的生活质量和生命健康。综合中医、西医之长对其进行研究，有效发挥中医药治疗特色与提高其疗效，是目前亟待解决的问题。本文从理论特点、发病病机、中医辨证与微观辨证三方面对慢性肾脏病肾阳虚证进行探析，从证候研究与疗效评价阐释慢性肾脏病肾阳虚证的现代应用，理论与应用相结合阐释慢性肾脏病肾阳虚证的特点，为慢性肾脏病肾阳虚证的进一步研究奠定理论基础。     

慢性肾脏病“肾阳虚”证候与生物学指标相关性研究

慢性肾脏病发病率呈逐年递增趋势，不仅给众多患者增加了精神和经济负担，也给我国社会公共卫生事业带来重大问题，而结合传统中医药与现代医学手段对其进行干预、治疗，已经成为当前我国全民大健康事业的重要组成部分。历代中医大家都曾对“肾阳虚”证候进行了大量的阐述，并提出了相应的治法方药，现代中医药工作者依据中医典籍理论，对这一证候进行了深入研究，并认为其与慢性肾脏病有着密不可分的联系，并通过运用一系列的现代科学实验技术对二者的相关内涵进行探索且取得了一定的成果。本文从慢性肾脏病临床常用相关生物学指标和“肾阳虚”证候的相关研究入手，并将一系列临床、实验研究进行阐述分析，进而对二者相关性论述，针对当前关于“肾阳虚”证候与慢性肾脏病生物学指标相关研究较为片面、欠缺的现状，系统总结慢性肾脏病“肾阳虚”证候相关生物指标的研究方法，为慢性肾脏病“肾阳虚”证辩证标准规范化研究提供科学思路，进而为中医学证候本质研究奠定基础。     

慢性肾脏病肾阳虚证的研究与思考

慢性肾脏病（Chronic Kidney Disease，CKD）是肾病科常见疾病，主要表现为水肿、高血压、蛋白尿和肾功能异常等，病情反复、缠绵难愈，并且发病率呈逐年升高趋势，严重危害人们的生命健康。研究表明，肾阳虚是CKD的重要病机，肾阳虚证与CKD的发展过程具有密切联系。肾阳虚证是中医脏腑辨证理论中的重要证候之一，肾阳为人体阳气之本，对各脏腑、组织器官起着推动、温煦的作用，若肾阳不足，对各脏腑的温煦功能减弱，则出现肾阳虚证，以畏寒肢冷，面色?白或黧黑，神疲乏力，小便清长，夜尿多，舌淡苔白，脉弱为主要临床表现。本文通过总结近年来慢性肾脏病肾阳虚证的相关研究，从动物模型及组织病理学、水液代谢、神经内分泌、生化代谢指标及血液流变学等方面分析其异常变化，并深入探讨慢性肾脏病肾阳虚证证候标准化研究和治疗研究，分别从基础研究、临床研究方面对慢性肾脏病肾阳虚证的研究进展进行综述，并对其存在的问题进行分析，提出研究思路与方向，为将来慢性肾脏病肾阳虚证的研究提供理论依据。