三七总皂苷防治大鼠腺嘌呤肾间质纤维化作用的实验研究

目的:观察三七总皂苷对大鼠腺嘌呤性肾间质纤维化的防治作用.方法:将Wister大鼠58只,随机分为5组,正常组、假手术组、模型组、尿毒清组和三七总皂苷组.模型组、尿毒清组和三七总皂苷组大鼠,手术切除左侧肾脏,而假手术组手术取出左侧肾脏,剥离深包膜但不切除肾脏.模型组、尿毒清组、三七总皂苷组以腺嘌呤180mg/kg灌胃,并同时给予尿毒清和三七总皂苷治疗,实验在第2周和第4周时称重,并留取24h尿液.第4周末处死大鼠,留尿、取血测定尿、血Ca2 、P3-及Scr、BUN,取肾组织称重、福尔马林固定,并进行肾组织染色.用SPSS11.0进行统计学处理.结果:三七总皂苷组与模型组比较,可以明显改善肾间质纤维化大鼠的血Ca2 、P3 (P<0.05),提高血RBC、Hb水平,降低血清Scr、BUN(P<0.05),减少肾组织中腺嘌呤结晶的沉积,减轻肾脏病理损害.结论:三七总皂苷通过减少腺嘌呤性大鼠肾组织中腺嘌呤结晶的沉积、降低P3-,提高Ca2 、RBC、Hb水平,改善肾功能,从而对腺嘌呤性大鼠肾间质纤维化有明显的防治作用.     

交替连续给药法救治急重感染举隅

急重感染以发病急、病情重、转变快、多虚实夹杂为特点。笔者认为急重感染可运用交替连续给药法（简称交续给药法），即将功效不同的二方，同时应用于急重感染的救治中。采用二方分煎取汁后，间隔一定时间，让患者交替连续服用．而不拘每日服几剂之限。该用药方法，验之临床，屡屡应手，现举例说明。     

Rg1、Rb1对糖尿病肾病大鼠肾结缔组织生长因子的影响

目的:探讨Rg1、Rb1对糖尿病肾病(DN)大鼠肾结缔组织生长因子(CTGF)蛋白表达的影响。方法:雄性SD大鼠75只,按体质量随机分为正常组10只,模型组65只。模型组大鼠按55 mg/kg体质量腹腔一次性注射链脲佐菌素,72 h后血糖≥16.7 mmol/L,尿糖≥4"+"者为糖尿病造模成功。将造模成功的大鼠按血糖高低随机分为模型组、厄贝沙坦组、Rg1大剂量组、Rg1小剂量组和Rb1组。用药12周,处死大鼠无菌取肾,行肾组织HE、Mallory染色,观察各生化指标和肾组织病理形态学改变,采用免疫组化方法分析肾组织CTGF蛋白的表达情况。结果:模型组肾组织表现为DN病理改变;正常组及用药组肾小管上皮细胞、肾间质细胞胞浆有轻度CTGF表达,模型组CTGF则呈强阳性表达,Rg1、Rb1组CTGF表达较模型组明显减少(P<0.05)。结论:Rg1、Rb1可通过对肾组织CTGF蛋白表达下调而发挥治疗和预防糖尿病肾病的作用。     

复方鳖甲软肝方对阿霉素肾病大鼠肾组织内皮素-1蛋白及其mRNA表达的影响

目的:探讨复方鳖甲软肝方对阿霉素肾病大鼠肾组织的保护作用机制.方法:将45只大鼠随机分为3组,正常对照组(9只)、假手术组(9只)及手术组(27只).切除大鼠右侧肾脏并腹腔注射阿霉素建立阿霉素肾病大鼠模型.于术后1周,手术组按体重再次随机均分为模型组、苯那普利组和复方鳖甲软肝方组.从开始注射阿霉素后,苯那普利组(25 mg/kg)和复方鳖甲软肝方组(14 g/kg)开始灌胃治疗,假手术组给予等量生理盐水灌胃.观察并记录实验2、4、6、8和10周大鼠体重、24 h尿蛋白;于10周末处死大鼠,取大鼠颈动脉血检测尿素氮、血肌酐、胆固醇、甘油三酯、总蛋白和白蛋白;观察肾组织病理形态学改变,采用免疫组化及原位杂交方法分析肾组织ET-1蛋白及其Mrna表达.结果:除正常对照组和假手术组外,其余3组大鼠均有不同程度的摄食减少、精神不振、活动迟缓、尿量减少、体重减轻、24 h尿蛋白定量增高、血生化指标异常等,而苯那普利组和复方鳖甲软肝方组均有不同程度改善,且复方鳖甲软肝方组优于苯那普利组,但两者差异无显著性.模型组大鼠肾小管上皮细胞、肾小球系膜细胞以及肾小球脏层上皮细胞胞浆中ET-1蛋白及Mrna表达呈强阳性;复方鳖甲软肝方组与苯那普利组大鼠肾组织ET-1蛋白及Mrna表达均较模型组显著减少,但两者比较差异无显著性.结论:复方鳖甲软肝方能够减少阿霉素肾病大鼠肾小管上皮细胞、肾小球系膜细胞以及肾小球脏层上皮细胞胞浆中ET-1蛋白及其Mrna表达,降低肾组织ET-1含量,从而起到保护肾功能,延缓肾功能衰竭的作用.     

翻白草含药血清对高糖培养肾小管上皮细胞增殖作用及其对RhoA/ROCK信号通路的影响

目的:探讨翻白草含药血清对高糖培养小鼠肾小管上皮细胞增殖及其对转分化机制的影响。方法:制备各组大鼠含药血清;10%胎牛血清(FBS)-RPMI 1640培养基培养小鼠肾小管上皮细胞,传代培养后按3 000个/孔接种于96孔培养板,分为正常组、高糖组、厄贝沙坦组及翻白草组;加入相对应6%含药血清的高糖RPMI 1640培养基;培养12,24,48,60 h时分别观察各组细胞形态,并应用噻唑蓝(MTT)比色法检测各组吸光度A;高糖培养24 h后应用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组肾小管上皮细胞小G蛋白(RhoA),Rho蛋白激酶1(ROCK1),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和钙黏附蛋白-E(Ecadherin)蛋白表达情况。结果:高糖培养后肾小管上皮细胞由扁平不规则的多角形变为长梭形;加入相应含药血清干预后细胞呈扁平不规则的多角形;与正常组比较,12 h时高糖组肾小管上皮细胞呈明显增殖状态(P0.05),24,48,60 h时增殖显著(P0.01);与高糖组比较,12 h时翻白草组能抑制肾小管上皮细胞增殖(P0.05),24,48,60 h时翻白草组抑制肾小管上皮细胞增殖作用显著增强(P0.01);与厄贝沙坦组比较,48,60 h翻白草组能抑制肾小管上皮细胞增殖(P0.05);与模型组比较,翻白草组E-cadherin蛋白表达显著增加,RhoA,ROCK1和α-SMA蛋白表达显著减少(P0.01)。结论:翻白草含药血清可以抑制高糖培养的肾小管上皮细胞增殖、抑制肾小管上皮细胞转分化,可能与RhoA/ROCK信号通路有关。     

肾康注射液对肾小管上皮细胞LLC-PK_1分泌型胶原的影响

目的 :探讨肾康注射液对肾小管上皮细胞 L L C PK1 分泌 型胶原 (Co )的影响。方法 :用细胞酶联免疫吸附法 (EL ISA ) ,以单味大黄注射液为实验对照组 ,检测肾康注射液对肾小管上皮细胞 L L C PK1 分泌Co 含量的影响。结果 :肾康注射液可以显著抑制肾小管上皮细胞 L L C PK1 分泌 Co 的含量 ,并呈剂量依赖关系 ;肾康注射液作用明显优于同等含量的单味大黄注射液。结论 :肾康注射液抑制肾小管上皮细胞 L L CPK1 分泌 Co 含量 ,是该中药复方延缓慢性肾功能衰竭进展的机制之一。     

糖肾平对糖尿病肾病大鼠足细胞nephrin与CD2AP蛋白及其mRNA表达的影响

目的：观察糖肾平对糖尿病肾病（DN）大鼠足细胞裂孔隔膜蛋白分子nephrin和CD2AP表达的影响,探讨其防治DN的作用机制.方法：雄性Wistar大鼠74只,按体重随机分组为正常组10只,造模组64只.造模组大鼠腹腔一次性注射链脲佐菌素（STZ）（45 mg/kg）,72 h后检测大鼠血糖和尿糖,以血糖≥16.7 mmol/L、尿糖（＋＋＋＋）者为DN大鼠造模成功.模型成功的大鼠按体重随机分为模型组、厄贝沙坦组、糖肾平小、大剂量组,各组分别干预14周.于第14周处死大鼠,无菌取肾,采用原位杂交和免疫组化技术观察肾组织足细胞裂孔隔膜蛋白nephrin和CD2AP蛋白及其mRNA的表达水平.结果：模型组与正常组相比,nephrin和CD2AP蛋白及mRNA表达水平明显下调（P〈0.01）;与模型组相比,厄贝沙坦、糖肾平干预后糖尿病大鼠肾小球足细胞nephrin和CD2AP蛋白及mRNA水平表达明显增加（P〈0.05）.结论：糖肾平可能通过维持足细胞裂孔隔膜蛋白nephrin和CD2AP的稳定性,从而发挥对DN肾脏的保护作用.     

海昆肾喜对UUO大鼠肾组织及体外培养肾小管上皮细胞MMP9/TIMP1表达的影响

目的：探讨海昆肾喜对单侧输尿管结扎（unilateral ureteral occlusion,UUO）大鼠肾组织中的MMP9/TIMP1及LPS刺激体外培养肾小管上皮细胞不同时段MMP9、TIMP1表达的影响。方法：采用UUO大鼠模型,将57只大鼠随机分为4组：假手术组、模型组、苯那普利组和海昆肾喜组。药物干预4周处死大鼠观察肾组织病理改变,应用免疫组化学方法检测肾组织MMP9/TIMP1的表达;以含100μg/ml纯品海昆肾喜的5%BCSDMEM培养肾小管上皮细胞,分别于LPS刺激24h及48h采用免疫组化及Westernbloting方法检测各组MMP9、TIMP1的表达。结果：模型组肾间质表现为明显的纤维化病理改变,而海昆肾喜组纤维化病理改变明显减轻。正常组及假手术组肾小管上皮细胞、肾间质细胞胞浆有轻度MMP9/TIMP1表达;模型组MMP9表达明显减少而TIMP1则呈强阳性表达。海昆肾喜组与模型组比,MMP9强阳性表达明显增强（P〈0.05）,TIMP1的表达较模型组明显减少（P〈0.05）。LPS刺激肾小管上皮细胞12h后,细胞胞浆内MMP9活性逐渐增强;24h达到高峰;TIMP1于LPS刺激24h逐渐增强,48h达到高峰上。海昆肾喜降低24h时MMP9的表达,同时也降低48h时TIMP1的表达。结论：海昆肾喜可以调节UUO大鼠肾组织MMP9/TIMP1的表达;海昆肾喜能抑制体外培养肾小管上皮细胞早期MMP9的表达,可降低MMP9早期对基膜的破坏引起的上皮细胞转化,同时又降低后期TIMP1的表达,从而促进细胞外基质的降解。其双向调节作用可能是其防治肾间质纤维化的机制之一。     

糖尿病肾病“肾痿”假说探讨

糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病慢性并发症之一,属于中医"消渴病"继发"尿浊"、"水肿"、"关格"等病证范畴。我们在整理古代文献的基础上,参照现代医学相关认识,结合临床实际,提出DN     

慢性再生障碍性贫血的中医药研究

慢性再生障碍性贫血(CAA)是由多种病因引起的骨髓造血干细胞和骨髓微环境严重受损,以全血细胞减少为主要表现的一组综合征。中医认为其基本病机在于肾虚,肾不藏精、生髓,髓不化血,强调"以肾为本、从肾论治",临床上治疗慢性再生障碍性贫血疗效满意,文章就再生障碍性贫血从肾论治的中医理论基础、病因病机、辨证论治等方面进行综述。