介入血管成形术治疗下肢动脉硬化闭塞症疗效观察

目的 观察介入血管成形术治疗下肢动脉硬化闭塞症的疗效.方法 采用介入血管成形术治疗下肢动脉硬化闭塞症患者22例(26条患肢).结果 18例患者症状明显缓解,2例开通失败后行截肢术,2例介入术后再截肢,明显减低了截肢平面.介入术后6周22支病变血管保持通畅(73％),术后3个月及半年的再通率分别为59％和51％.1例高龄患者术后出现心脑血管意外而死亡,无其他严重并发症发生.结论 介入血管成形术治疗下肢动脉硬化闭塞症的疗效满意.     

BRCA2在卵巢肿瘤组织中的表达及临床意义

目的:乳腺癌易感基因2(breast cancer suscepbility gene 2,BRCA2)是近几年发现的新的抑癌基因,本研究旨在分析BRCA2在卵巢癌组织中的表达及其临床意义?方法:采用1对引物扩增BRCA2基因第14外显子,应用聚合酶链反应和基因测序技术检测BRCA2基因,并且应用免疫组化和Western blot检测肿瘤组织BRCA2蛋白的表达?结果:卵巢黏液性囊腺瘤和正常组织BRCA2基因未发生突变,浆液性肿瘤和黏液性囊腺癌的BRCA2第14外显子的128位碱基T突变为C?Western blot检测结果显示BRCA2在卵巢囊腺癌上的表达低于正常卵巢组织和卵巢囊腺瘤,免疫组化检测结果发现BRCA2在卵巢黏液性囊腺瘤和黏液性囊腺癌中的阳性率分别为87.50%和53.33%,差异有统计学意义(P < 0.05);而BRCA2在卵巢浆液性囊腺瘤和浆液性囊腺癌中阳性率分别为53.85%和73.17%,差异没有统计学意义(P > 0.05)?BRCA2蛋白在不同年龄?组织学分型?分化程度和临床分期各组间差异均无统计学意义(P > 0.05)?结论:BRCA2在卵巢癌组织中的表达不仅可以用于诊断,也可能为治疗提供一个途径?     

人源抗EGFR抗体-鱼精蛋白融合蛋白的制备及活性分析

目的:构建人抗EGFR单链抗体(scFv)/鱼精蛋白截短体(truncated protamine,tP)融合蛋白基因,在大肠杆菌中表达并纯化,分析该融合蛋白的生物学活性?方法:设计引物扩增人抗EGFR单链抗体编码序列,将其克隆于原核表达载体pBAD-A;人工合成tP序列,将其克隆于原核表达载体pBAD-AscFv上,构建成scFv/tP融合基因,在大肠杆菌TOP10F′中诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定后,用His-trap镍亲和层析柱纯化?ELISA分析scFv/tP融合蛋白抗原亲合活性,凝胶迁移阻滞实验检测scFv/tP融合蛋白与DNA的结合活性?结果:成功构建了人源抗EGFR抗体/tP融合基因,经L-Ara诱导后在大肠杆菌中实现了可溶性表达?表达的scFv/tP融合蛋白保持了与抗原的结合活性,同时具有结合DNA的能力?结论:scFv与tP融合后,同时具有与抗原和DNA结合的活性,该scfv/tP融合蛋白为EGFR表达阳性肿瘤的靶向基因治疗奠定了基础?     

全人源抗Trop-2 IgG的制备及对卵巢癌细胞生物特性的影响

目的:构建全人源抗人滋养层细胞表面抗原2(human trophoblast cell surface antigen 2,Trop-2)抗体 IgG真核表达系统,表达并纯化该抗体,并检测其对卵巢癌细胞生物特性的影响?方法:构建全人源抗Trop-2抗体IgG的重组表达载体;在293FreeStyle(293F)真核表达体系中表达并纯化该抗体?使用SDS-PAGE?ELISA?亲和力测定?免疫荧光等方法鉴定该抗体并分析其免疫学活性;使用cell counting kit-8(CCK-8)法?划痕实验?Transwell实验和细胞凋亡实验分析其对卵巢癌细胞特性的影响?结果:成功制备出全人源抗Trop-2 IgG;经多种方法检测,该抗体能与Trop-2蛋白特异性结合;对表达Trop-2的卵巢癌细胞增殖?侵袭?迁移和凋亡有明显影响?当抗体浓度为400 μg/mL时,卵巢癌细胞HO8910的生存率仅为55.95%(P < 0.01),划痕愈合率仅为24.71%(对照组为70.80%,P < 0.01),侵袭细胞数是对照组的32.11%(P < 0.05),细胞凋亡率是对照组的2倍(P < 0.05)?结论:全人源抗Trop-2 IgG可特异性识别卵巢癌细胞表面的Trop-2 蛋白,对卵巢癌细胞的恶性行为具有明显的抑制作用?因此,全人源抗Trop-2 IgG在卵巢癌的靶向治疗中有潜在应用价值?     

中西医结合治疗气虚血瘀型儿童过敏性紫癜

2003年4月至2007年10月，笔者采用止癜汤联合西药治疗过敏性紫癜属气虚血瘀证患者93例，报道如下。     

肿瘤相关抗原Trop-2胞外区片段蛋白的表达及其特性分析

目的:从临床乳腺癌组织中扩增肿瘤相关抗原Trop-2胞外肽段基因,在大肠杆菌中表达重组蛋白,并对该蛋白的生物学特性进行鉴定。方法:RT-PCR扩增Trop-2胞外肽段基因并克隆于pMD18-T载体中进行测序分析,用NcoⅠ和EcoRⅠ将含Trop-2胞外区重组基因的质粒双酶切后,克隆到pBAD-gⅢ中。重组质粒经酶切鉴定、核酸序列分析后转化大肠杆菌TOP10,以L-阿拉伯糖诱导表达融合蛋白,表达的蛋白经后His柱亲和层析纯化后,用Western blot、ELISA检测鉴定。结果:重组表达质粒经酶切鉴定为阳性,核酸序列分析正确。SDS-PAGE和Western blot显示,表达的重组蛋白分子质量约为38ku,此抗原能够与商业化抗体特异性结合。结论:成功制备Trop-2胞外区重组基因表达的蛋白,并证明原核表达的Trop-2胞外肽段保持了原有的抗原性。     

子宫内膜癌分子分型及临床应用的研究进展

子宫内膜癌(EC)属于女性生殖系统最常见的三大恶性肿瘤之一，其5年生存率达82%,与发病年龄、病理类型、组织学分级和淋巴结转移密切相关。由于传统的组织病理学分型在临床应用上存在很大的局限性，近年来以癌症基因组图谱分子分型为基础的多种EC分子分型方式已经成为肿瘤诊断、治疗及预后判断的依据。本文就EC分子分型的研究进展以及相关分子靶向治疗进行综述，以期望为EC的临床个体化精准治疗、疗效预测及预后评估提供有价值的信息。     

人源抗Trop-2 Fab对宫颈癌细胞生物学特性的影响

目的 :观察人源抗Trop-2 Fab对宫颈癌细胞生物学特性的影响。方法 :流式细胞术和免疫荧光检测宫颈癌Hela细胞表面Trop-2蛋白的表达;划痕实验和Transwell检测人源抗Trop-2 Fab对宫颈癌细胞迁移能力的影响;流式细胞术检测人源抗Trop-2 Fab对宫颈癌细胞凋亡的诱导作用;CCK-8(cell counting kit-8)检测人源抗Trop-2 Fab对宫颈癌细胞增殖的影响。结果:Hela细胞表面有Trop-2蛋白表达,人源抗Trop-2 Fab能够抑制Hela细胞的增殖,有效降低Hela细胞的迁移和侵袭能力,同时能够诱导Hela细胞凋亡。结论:人源抗Trop-2 Fab能明显降低宫颈癌细胞的恶性生物学行为,Trop-2可作为宫颈癌治疗的潜在靶点。     

ROR1在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其与临床预后的关系*

目的：分析受体酪氨酸激酶样孤儿受体-1(the receptor tyrosine kinase-like orphan receptors-1, ROR1)在卵巢上皮性肿瘤中的表达，并探讨其表达对卵巢癌患者临床预后的意义。方法：选取南京医科大学附属妇产医院2013年1月—2018年12月行根治性手术的卵巢癌患者的组织标本55例，并随机选取同期卵巢交界性肿瘤和良性肿瘤各30例，以及非卵巢病变进行切除的正常卵巢15例为对照组，免疫组织化学检测各组ROR1的表达情况。除6例外，所有卵巢癌患者均随访，末次随访时间为2019年3月30日，分析ROR1与上皮性卵巢癌各项临床病理参数的相关性，生存分析采用Kaplan-Meier法。结果：ROR1在卵巢癌中的表达高于正常卵巢组织及卵巢交界性和良性肿瘤，卵巢癌的ROR1表达在不同肿瘤的FIGO分期及有无淋巴结转移间差异有统计学意义(P<0.05)，而与患者年龄、组织学分型及分化程度之间无明显相关性，Kaplan-Meier生存分析显示卵巢癌ROR1阳性表达组与阴性表达组生存时间差异有统计学意义(P<0.05)。结论：卵巢癌组织中ROR1蛋白表达升高，可能作为评估患者预后的潜在指标，对卵巢癌的诊治提供一定的理论依据。