微信平台在治疗慢性病毒性肝炎患者中的应用分析

目的 对应用微信平台干预口服抗病毒药物治疗的慢性病毒性肝炎患者的依从性进行观察及评价.方法 选取我院诊断慢性病毒性肝炎并口服抗病毒药物治疗的患者,随机分为干预组和对照组,干预组通过微信平台干预方式进行健康教育、服药指导及随访,对照组给予纸质版健康宣教材料及电话随访,对效果进行比较分析.结果 干预组患者在治疗依从性方面优...     

AXIN2基因三个位点与先天性巨结肠的关联研究

目的 探讨AXIN2基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)rs2240308、rs8081536和rs9913621 3个位点与先天性巨结肠(Hirschspnmg disease,HSCR)的关联性.方法 对120例HSCR患者和120名正常人群外周血进行基因组DNA抽提,用PCR技术对AXe2基因3个位点(rs2240308、rs8081536和rs9913621)进行PCR扩增,PCR产物用内切酶CviJ I、Dde I和BaN I消化,将SNPs位点进行分型与分析,应用X2检验统计分析病例组和对照组等位基因频率、等位基因型频率及其患病风险;同时将PCR产物进行测序,以进一步确定基因突变位点.结果 HSCR组与对照组AXIN2 rs8081536 CC和CT基因型频率差异无统计学意义(P＞0.05);而HSCR组与对照组AXIN2 rs2240308 GG、AG和从基因型频率及A和G等位基因频率差异有统计学意义(P＜0.05),GC和从基因型及G等位基因的患病风险分别为2.091、0.846和1.703;HSCR组与对照组AXIN2 rs9913621 CC、CT和TT基因型频率及C和T等位基因频率差异有统计学意义(P＜0.05),CC和TT基因型及T等位基因的患病风险分别为0.535、1.113和1.569.测序rs2240308第301位密码子核苷酸GCA→CCA杂合突变;rs913621第199位密码子核苷酸CAC→CAG杂合突变.结论 AXIN2 rs8081536等位基因变异与HSCR的易感性无关;AXIN2 rs2240308和rs9913621与HSCR的发生可能有关联,具有GG基因型与CC基因型患HSCR的危险性相对较高.     

Ⅰ型胶原表面修饰生物活性多孔支架的细胞相容性

背景：前期研究已经成功制备了硫酸钙，冻干骨复合型生物多孔支架，但其表面的疏水性不利于细胞黏附、增殖。目的：观察Ⅰ型胶原表面修饰对硫酸钙，冻干骨复合型生物多孔支架亲水性和细胞相容性的影响。设计、时间及地点：体外细胞学对比观察，于2007—10／200806在山西医科大学第二医院骨科实验室及山西医科大学中心实验室完成。材料：应用Ⅰ型胶原进行表面修饰制备复合Ⅰ型胶原的硫酸钙／冻干骨复合型生物多孔支架。方法：将骨髓间充质干细胞分别与原支架（对照组）和表面修饰后的支架（实验组）复合培养。主要观察指标：测定表面修饰后支架的亲水性：扫描电镜观察表面改性后的材料及细胞与材料复合的形态学特征：分别使用MTT法、细胞蛋白质及碱性磷酸酶定量方法对细胞与材料复合培养后增殖与分化能力进行评估。结果：表面修饰后的新型多孔硫酸钙支架的亲水率高于原支架（P〈0．05）。实验组细胞的黏附率高于对照组（P〈0．05）；在培养的不同时期实验组的细胞数量、细胞的蛋白质含量及细胞碱性磷酸酶表达量均较对照组多（P〈0．05）。结论：Ⅰ型胶原表面修饰后的硫酸钙／冻干骨复合型生物多孔支架的亲水性和细胞相容性得到了显著提高。     

肝癌上皮-间叶样表型转化与Caveolin-1表达之间的关系

目的 探讨肝细胞癌中Caveolin-1表达与上皮-间叶样表型转化(EMT)之间的关系.方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot和免疫组织化学技术检测人肝癌细胞株和肝细胞癌组织标本中Caveolin-1和EMT指标mRNA和蛋白的表达.结果 RT-PCR和Westernblot结果显示,在HepG2、SMMC7721细胞株中,Caveolin-1 mRNA表达量(0.03±0.01、26.63±0.49)和蛋白表达量(0.00 ±0.00、1.56 ±0.17)均与上皮细胞标志物E-cadherin(14.97 ±0.03、0.06±0.00)、(1.04±0.06、0.00±0.00)负相关,与间叶细胞标志物N-cadherin(2.03±0.07、9.54 ±0.05、0.68 ±0.09、0.95±0.05)、Vimentin(0.13±0.06、6.13±0.68、0.00±0.00、1.09±0.15)正相关.免疫组织化学结果显示,在82例肝细胞癌组织标本中,转移组癌组织中Caveolin-1表达明显低于癌旁组织(P<0.05),且与上皮细胞标志物ZO-1、E-cadherin负相关,与间叶细胞标志物N-cadherin正相关.结论 肝细胞癌中Caveolin-1表达升高与转移和EMT有关.     

维甲酸诱导大鼠肛门直肠畸形胚胎中RARmRNA表达的研究

目的探讨胚胎发育中维甲酸诱导的RARmRNA表达异常与肛门直肠畸形发生之间的相关性。方法利用全反维甲酸(ATRA)诱导大鼠产生肛门直肠畸形胚胎，用RT-PCR法测定妊娠11、12、13、14、15、16d时大鼠胚胎尾侧部分的RARmRNA表达模式并且与对照组中RARmRNA表达模式进行对比。结果实验组中80％胚胎具有肛门直肠畸形，对照组未见明显畸形。实验组中RARαmRNA表达水平在妊娠11、12、13、15d时低于对照组，表达曲线的高峰出现时间晚于对照组，实验组中RARβmRNA表达水平在妊娠12、14d时低于对照组，而RARγmRNA表达水平在实验组中与对照组中并无明显差异。结论ATRA可诱导胚胎发育过程中RARmRNA异常表达，它可能在妊娠11～13d这一尾侧区域发育最关键时段通过抑制RARα的表达启动并最终导致肛门直肠畸形及其伴发畸形的发生。     

先天性肛门直肠畸形合并Townes-Brocks综合征SALL1基因突变的研究

目的 探讨先天性肛门直肠畸形合并Townes-Brocks综合征患儿的临床特征及基因型特征。方法 回顾2003年初至2004年4月我院新生儿外科收治的首次入院的先天性肛门直肠畸形病例，判断是否合并Townes-Brocks综合征(肛门直肠畸形是否合并拇指及外耳畸形)，对于符合诊断的病例，抽调入院时已存血样，提取基因组DNA，应用PCR及基因组测序等方法分析SALL1基因型。结果 24例先天性肛门直肠畸形患儿中，4例符合Townes-Brocks综合征的诊断，4例均为男性，均为高位肛门直肠畸形，其中1例合并直肠尿道瘘，均有耳部发育异常，耳位低垂、发育不良、耳前皮赘等，2例合并拇指发育异常，1例左肾位置异常，输尿管积水扩张、开口异位，2例隐睾，没有追溯到家族史。由于其他原因，患儿父母拒绝做听力筛查，所以不能判定这些患儿是否有感觉神经性耳聋，4例患儿均表现为SALLL1基因相同位点的突变，其中一个位点为错义突变(1792bpG→C，Gen→Bank accessionnos．X98833)，对应的丝氨酸→苏氨酸，考虑为Townes-Brocks综合征的病因，3个位点为静止突变(1919bpT→C，2240bpT→C，2311bpA→G，GenBankaccessionnos．X98833)，相应的氨基酸没有改变，考虑为等位基因的多态性。结论先天性肛门直肠畸形伴发拇指(趾)、耳部等发育畸形时多为Townes-Brocks综合征，对这样的患儿应尽可能做听力筛查，以早发现、早干预耳聋；Townes-Brocks综合征患儿SALL1基因多有突变，这是该综合征的病因。     

PCR-CTPP技术在先天性巨结肠SIP1基因多态性研究中的应用

目的 研究用相对的两对引物一聚合酶链反应(polyrnerase chain reactionwith confronting two-pair primer,PCR-CTPP)技术在SIPl基因多态性检测中的应用,探讨先天性巨结肠症(Hirschsprung disease,HSCR)SIP1基因单核苷酸多态性特点.方法 采用PCR-CTPP技术检测分析60例HSCR患儿SIPl基因第8外显子多态性,并与聚合酶链反应一限制性片段长度多态性(PCR-Restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)技术检测结果对比,探讨PCR CTPP在单核苷酸多态性(SNP)检测及分析中的应用.结果 经PCR-CTPP扩增出SIPl基因第8外显子CTG→CCG与GGC→GAC三种基因型相应的DNA片段,与DNA测序结果符合.HSCR符合杂合性突变.结论 PCR-CTPP技术成本较低、省时、操作简便,结果稳定可靠,对于SNP研究具有较高的应用价值.HSCR患儿SIPl基因单核苷酸多态性值得深入研究.     

EphB2基因多态性与先天性肛门直肠畸形的相关性研究

目的 探讨EphB2受体基因第6外显子的-1395A/G多态性在辽宁地区汉族人群中的分布及其与先天性肛门直肠畸形(CAM)的关系.方法 采用PCR-RFLP方法,对65例CAM患儿和115名健康儿童EphB2基因-1395A/G多态位点进行基因型检测,用SHEsis在线统计软件分析等位基因频率、基因型频率及其组间差异.结果 EphB2受体基因第6外显子的-1395A/G多态A等位基因频率及AA基因型频率在CAM组(85.4%、75.4%)与正常对照组(17.0%、4.3%)间差异有显著统计学意义(P＜0.01).结论 EphB2受体基因第6外显子的-1395A/G多态与CAM存在相关性.     

胆道闭锁患儿肝组织细胞因子及相关基因表达的研究

目的 研究胆道闭锁(BA)患儿肝脏组织中上皮-间充质转化过程中特异性细胞因子的表达及胚胎期发育相关基因的表达激活.旨在探讨BA肝脏纤维化等系列改变的分子机制.方法 取经手术证实为BA患儿的8例肝活检组织(年龄2～3个月),以无消化道疾病尸检婴儿8例肝脏组织做正常对照(年龄0～2个月),RT-PCR半定量法检测胆管上皮细胞特异性因子CK19,纤维化早期指标Ⅰ型胶原蛋白COL1A1,发育相关基因Notch基因受体HES1,TGF-β及其阳性信号分子Smad3的表达水平变化.结果 BA患儿肝脏组织中CK-19,COL1A1、HES1、TGF-β及Smad3等基因表达水平均明显提高,实验组及对照组差异显著.结论 BA患儿肝脏组织胶原组织增生,同时有胆管上皮细胞增生,胚胎期肝脏组织发育相关基因Notch信号通路系统重新激活,TGF-β及其阳性信号分子Smad3在这一过程中发挥作用.     

优化幽门螺杆菌最佳培养保存条件实验研究

目的:研究不同培养基对幽门螺杆菌(Hp)生长的影响;优化Hp培养保存条件;方法:采用正交设计的方法;结果:Hp最佳固体培养条件为92%哥伦比亚琼脂或脑心浸液琼脂加5%牛血清、再加2.5%混合抗生素,pH值为7.5.采用脑心浸液加甘油制成的冷冻保存液置于-70℃低温条件下保存,Hp菌株激活复苏培养成功率最高.结论:不同培养条件下Hp生长情况存在显著差异.