p65基因序列shRNA慢病毒载体构建及其作用功能的初步研究

Objective To obtain shRNA sequences that can stably block the expression of Nuclear Factor kappa- B (p65) in the prostate cancer cell line LNCaP and construct the lentivirus vector.And validate the gene function of p65 in the cell line. Methods According to p65 genetic information, we design siRNA1, siRNA2, siRNA3 those three siRNA sequences targeting the ods area of p65 gene and then form the corresponding four pairs of complementary single strand DNA of shRNA, including the sense strand and the antisense strand. The synthetic shRNA sequence was inserted into the empty pSIH1-H1-copGFP shRNA Vector, and after transfecting the prostate cancer cells , the inhibitory effect of p65 mRNA by different sequences was detected through real-time PCR, and the inhibitory effect of p65 protein expression was detected by Western-blotting. Thus we can obtain highly effective shRNA sequences in the inhibition of p65 in prostate cancer cells. MTT, flow cytometry, transwell were chosen to test the cell growth, migration and invasive power in vitro to compare the difference of the experimental group, control group and negative group. Results The third shRNA sequence had the best inhibitory effect and the inhibitory effect of p65 mRNA in prostate cancer cell line was 59 % and the protein was 81%. It's position locates in p65 (NM_021975 ) 1096-1113 and it's stemloop sequence is 5'-GATCCGCCCTATCCCTTTACGTCATTCAAGAGATGACGTAAAGGGATAGGGCTTTTTG-3'. After transfecting, the prostate cancer cell line had the low expression of p65 stably. Through MTT, we got the growth curve, which showed that the growth ability of experimental group was significantly decreased compared with the control group and the Logarithmic growth didn't appear in the first 96 hours. Flow cytometry test displayed that the percentage of G0-G1-phase cells in experimental group was 61.49%, and the control group was 44.89%, idle group was 41.52%, which was increasing oberviously. The S-phase cells in the experimental group was 28.58%, compared with the 47.36% and 46. 10% diminished. The results of transwell showed that the experimental group had 16. 5000±6. 62076 cells and the other two groups had 45. 6333 13. 54159 and 36. 8333±5. 68412 cells, which showed the invasive power of experimental group was significantly declined(P＜0.05).Conclusions It's successful to obtain shRNA sequences that can stably block the expression of p65 in the prostate cancer cell line LNCaP and construct the lentivirus vector. p65 can positively regulates the biological behavior of prostate cancer LNCaP cell line in the cell growth, migration and invasive power.     

宫颈电圈切除加溃疡散喷创面治疗慢性宫颈炎疗效观察

慢性宫颈炎是妇科常见病,多由急性宫颈炎未治疗或治疗不彻底转变而来,是宫颈癌的高危因素。其病因主要是分娩、流产或手术损伤宫颈后,病原体侵入而引起感染。目前,慢性宫颈炎的治愈率几乎可以达到100％,比较好的治疗方法是局部治疗。我院妇科门诊采用宫颈电圈切除术与外用溃疡散联合治疗慢性宫颈炎,取得较好的疗效,现报道如下。     

护理干预对母乳喂养的影响

目的 探讨护理干预对母乳喂养的影响.方法 2004年1月～2004年6月在我院足月顺产的初产妇105名,随机分为两组,观察组53例,对照组52例.两组产妇均得到母乳喂养有关知识的宣教,如早接触、早吸吮、按需哺乳,母乳喂养技巧等.观察组产妇在此基础上给予护理干预,即在产后3d内每日由分管护士提供3次乳房护理.结果 观察组24h内泌乳例数多子对照组(χ2=11.235,P<0.005),观察组泌乳量多于对照组(χ2=270.165,P<0.005),两组新生儿第3天小便次数的比较(χ2=12.527,P<0.005).结论 护理干预促进母乳喂养,提高母乳喂养率.     

自制稀土永磁内固定钢板对骨折愈合的动物学研究

磁场可影响电子或离子的运动速度和方向,而血液、淋巴液中的无机盐等均为带电离子,受磁场作用后,其运动速度加快,血液循环加快,营养物质及氧气供应充足,成骨细胞活性加强,促进骨折早期愈合.本文对自制稀土疗磁性内固定钢板对骨折愈合价值进行研究.1 材料与方法1.1 实验动物的准备 采用河北医科大学实验动物中心提供的新西兰家兔50只,体重在2 kg左右,雌性,随机分成治疗组与对照组,每组25只.家兔在实验室适应20 d后开验,自始至终使用同种人工合成饲料和凉开水喂养.     

系统护理干预对提高剖宫产术后泌乳量和胃肠功能恢复的影响

目的:观察系统护理干预对提高剖宫产术后泌乳量和胃肠功能恢复的影响。方法:随机将我科89例行剖宫产术产妇分为对照组和观察组,对照组45例给予常规护理干预措施,治疗组44例给予系统护理干预措施,动态对比24小时内产妇泌乳量和胃肠功能恢复。结果:观察组与对照组12小时内泌乳量比较,P<0.05;与对照组24小时内泌乳量比较,P<0.01;与对照组12小时内胃肠功能恢复情况比较,P<0.05;与对照组24小时内胃肠功能恢复情况比较,P>0.05。结论:科学、系统的护理干预措施能够明显改善术后产妇的泌乳量和胃肠功能恢复,在提高纯母乳喂养率和增强新生儿机体抵抗能力等方面具有非常重要的意义,值得临床对剖宫产术后护理继续探讨。     

癌症病人的心理特点与护理干预

癌症是多种因素作用导致的一种严重的身心疾病,其发展迅速,死亡率高,严重影响人们的健康.大多数病人都有强烈而复杂的心理反应,而这种心理反应,精神状态与癌症的康复密切相关,及时发现和掌握病人的心理变化特点并做好针对性的护理干预,能稳定病人的情绪,提高治疗效果,改善生存质量和延长生存时间.     

p16^INK4a基因与子宫颈癌及其癌前病变关系的研究进展

随着分子生物学技术的飞速发展,人们越来越认识到抑癌基因在肿瘤的发生发展过程中具有重要作用。p16^INK4a是人们发现的第一个直接参与细胞周期调控的抑癌基因。它在宫颈癌和癌前病变阶段表现为过表达,可作为一种肿瘤标志物用于宫颈癌及癌前病变的临床筛查及诊断中。     

妇科红外光谱治疗仪治疗宫颈糜烂疗效观察

宫颈糜烂是一种很常见的慢性宫颈炎症。因宫颈糜烂与宫颈癌的发病率有密切关系,危害着广大妇女的健康。故患宫颈糜烂后采取积极有效的治疗是十分必要的。我站于2005年1月-2007年10月对200例患不同程度的宫颈糜烂患者采用红外线光谱治疗仪治疗,收到了良好的效果。     

废弃的一次性静脉营养输液袋在临床护理工作中的再利用

笔者经过临床观察及实践发现废弃的一次性静脉营养输液袋有很多再利用的价值,现将其使用方法及体会介绍如下。1方法1.1将废弃的一次性静脉营养输液袋用清水冲洗干净后,用注射器注入适量的空气或水,密封后毛巾包好,用于四肢挫伤、扭伤、石膏、夹板固定患者抬高患肢,置于患肢下面,高于心脏水平。利于静脉回流,减轻患肢肿胀。1.2脊髓损伤的患者,极易发生褥疮。用一次性废弃的静脉营养输液袋注入适量的空气或水,再用柔软的棉线布包好,垫置于患者的骨隆突部位如:足跟、内外踝、肘部、肩胛部、髋部等,以预防褥疮的发生。1.3将废弃的一次性静脉营养输液袋用注射器注入适量的水,密封后置于手术后患者的伤口处,以压迫止血,减少出血和渗血。1.4将废弃的一次性静脉营养输液袋用注射器注入60℃左右的热水,密封入口后用毛巾包好,用于外科手术后患者及高热退热后的患者置于足底部,周身保暖。1.5将废弃的一次性静脉营养输液袋用注射器注入适量的水,冰镇后用于挫伤、扭伤患者急性期(不超过24h)局部冷敷,以减轻疼痛和痉挛,控制肿胀程度,以及高热患者的物理降温。1.6废弃的一次性静脉营养输液袋上的关闭阀可用于导尿袋上,脊髓损伤截瘫的患者需要膀胱机能的训练定时开放尿...     

手术室开展全面护理的分析

手术室开展整体护理,可提高手术室护理质量和手术病人的满意度。整体护理是适应护理改革和社会发展新形势需要的新模式、新方法。现结合我院手术的护理实践,手术病人的整体护理情况进行分析研究。