人脐带间充质干细胞向神经细胞分化过程中ILK的表达变化及意义

目的 研究在人脐带间充质干细胞(hUCMSC)向神经干细胞样细胞(hucNSC)、神经细胞(Nc)诱导分化中整合素连接激酶(ILK)的表达变化及意义.方法 将体外培养、传至第3代的hUCMSC,用无血清培养基加入bFGF、EGF和B27预诱导分化为hucNSC,继之将其用BHA、弗司扣林等向神经细胞定向诱导分化,并用AF488分别标记hUCMSC、hucNSC、NC细胞骨架变化过程加以证实,免疫组化及RT-PCR检测ILK在hUCMSC、hucNSC、NC中的表达,并用实时定量PCR加以定量分析.结果 hUCMSC被诱导后首先聚集成细胞球样悬浮生长,表达nestin、CD133,ILK表达明显增强;再被诱导后表达NSE、TH,GFAP,并持续表达ILK.hUCMSC细胞骨架呈丝状规律排列,hucNSC时则成巢状,定向诱导后的神经细胞骨架转变成多突起的树枝状.实时定量PCR检测ILK在hUCMSC中微量表达,hucNSC中表达明显上调,是hUCMSC表达水平的12倍;在NC中ILK表达较hucNSC降低,但仍高于hUCMSC 8.6倍(P＜0.05).结论 人脐带间充质干细胞向神经干细胞样细胞、神经细胞诱导分化及细胞形态重塑中ILK可能发挥重要作用.     

自身免疫神经保护:MBP主动免疫对脊髓损伤后二次损害的有益作用

目的　研究髓鞘碱性蛋白 (MBP)主动免疫 ,对大鼠脊髓损伤 (spinalcordinjurySCI)后二次损害的治疗作用 ,探讨自身免疫T细胞对中枢神经系统损伤的神经保护机制。方法　用不完全福式佐剂 (IFA)乳化的MBP、全脊髓匀浆 (WSCH)、卵白蛋白 (OVA)分别免疫三组SD大鼠 ,1周后使用OHBASIKI打击器制作脊髓损伤模型 (SCI)。每周进行一次斜板试验及BBB评分 ,2 8天后标本取材行光镜及电镜检查。结果　用MBP或WSCH免疫鼠神经功能康复明显优于OVA免疫鼠 ,斜板实验及BBB评分与后者相比差异显著 (P <0 0 1)。形态学检查前两组大鼠损伤脊髓组织大部分恢复 ,形态基本正常 ,后者仍破坏严重。结论　MBP或WSCH主动免疫能中断SCI后二次损害的破坏作用 ,被激活的自身免疫T细胞对中神经系统损伤具有神经保护功能。     

NF-κB配体受体激动因子在脊髓损伤后骨髓间充质干细胞移植中的作用

目的探讨NF-κB配体受体激动因子(receptor activator of NF-kappa B ligand,RANKL)在脊髓损伤后人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)移植中对神经功能恢复的影响。方法Wistar大鼠60只,体重250～350 g,雌雄不限,随机分为3组:(1)hBMSCs组,脊髓半横切后行hBMSCs移植;(2)RANKL hBMSCs组,脊髓半横切后hBMSCs和RANKL协同移植;(3)PBS组,脊髓半横切,移植物以PBS代替。移植后1,7,14,21,28 d采用行为学指标观察大鼠神经功能恢复情况,应用免疫组化和免疫荧光技术检测移植的BrdU标记hBMSCs在宿主脊髓内胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元特异性核蛋白(NeuN)的表达情况。结果大鼠脊髓半横切损伤后,hBMSCs组和RANKL hBMSCs组均较PBS对照组有明显的神经功能恢复;而移植7,14 d时,RANKL hBMSCs组动物较hBMSCs组神经功能恢复明显。RANKL hBMSCs组中hBMSCs-Ne- uN和hBMSCs-GFAP双标阳性率高于hBMSCs组。结论RANKL和hBMSCs协同移植可提高脊髓损伤后神经病学预后,提高hBMSCs在宿主体内向神经细胞的分化。     

CNS损伤与自身免疫神经保护动物模型的建立及评价

<正>在哺乳动物,任何中枢神经系统(CNS)损伤常常导致无法避免的功能丢失。一系列的因素包括缺乏神经细胞体再生,轴突构成的贫乏,逃避了初次损害的病灶周边神经元在横向和纵向的继发退变,这些损伤的扩展被称为继发性损害。促进CNS损伤的目标有二①刺激神经细胞再生②神经保护或中断二次损害(SCI),无论损伤严重与否,最初均会引起完全性     

脐血间充质干细胞移植对大鼠局灶性脑缺血的影响

目的　从人脐血中分离纯化间充质干细胞(MSC) ,观察其移植对大鼠大脑中动脉栓塞后神经功能恢复的影响及细胞的存活、迁移向神经细胞分化的情况。方法　雄性SD大鼠45只,用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,大鼠随机分为3组:MSC移植组、单核细胞组和生理盐水组。移植后1、7、14、2 1、2 8d采用改良神经功能损害评分(mNSS)观察大鼠神经功能恢复情况,应用免疫组织化学和免疫荧光双标记技术检测5溴 2脱氧尿核苷(BrdU )标记的MSC细胞的存活、迁移及其胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元特异性核蛋白(NeuN)的表达。结果　人脐血MSC细胞移植可显著提高大鼠局灶性脑缺血后神经功能的恢复(P <0 .0 5 )。移植的MSC细胞可在大鼠脑组织中存活,并向缺血区域迁移,11.67%MSC细胞表达GFAP ,3 .72 %MSC细胞表达NeuN。结论　人脐血中含有MSC细胞并可促进局灶性脑缺血大鼠的神经功能恢复,移植细胞可在大鼠脑缺血区域中存活、迁移并向星形胶质细胞或神经元分化     

牙周非手术治疗对2型糖尿病患者牙周炎症控制的临床观察

目的探讨牙周非手术治疗对2型糖尿病伴慢性牙周炎患者牙周状况的影响。方法选择150例2型糖尿病伴慢性牙周炎患者,以2∶1的比例将其随机分为治疗组和对照组。100例治疗组患者接受牙周非手术治疗,50例对照组不进行牙周治疗,但实行与治疗组相同的口腔卫生教育。观察和对比记录两组患者基线及干预6个月后的牙周探诊深度(PD)和附着丧失(AL)情况。结果治疗组经牙周非手术治疗后,牙周探诊深度(PD)和附着丧失(AL)都明显下降(P0.05);对照组则无明显变化(P0.05)。结论牙周非手术治疗可有效对2型糖尿病患者的牙周炎症进行控制。     

2012年AHA/ASA《动脉瘤性蛛网膜下腔出血的诊疗指南》解读

动脉瘤性蛛网膜下腔出血(aneurysmal subarachnoid hemorrhage,aSAH)是致残、致死率很高的急性出血性脑血管病.美国心脏协会(American Heart Association,AHA)/美国中风协会(American Atroke Association,ASA)曾先后两次(1994年2009年)颁布了aSAH的诊疗指南[1-2].最近,它们在对2009版指南进行修订和增补的基础上,制定了2012版诊疗指南(以下简称新《指南》)[3],以适应目前aSAH的诊疗需要,现解读如下,供同道们参考.     

人脐带间充质干细胞治疗神经系统疾病的研究进展

人脐带组织中富含易于分离和扩增的间充质干细胞,这些细胞生物学性质稳定,能在适宜的体内、外环境下分化为神经元和胶质细胞,移植于脑缺血、帕金森病、脊髓损伤和视网膜退行性病变的动物模型后能通过多种机制促进其神经功能恢复,现就此方面的研究进展作如下综述。     

高血压脑出血病的术后管理

高血压脑出血为一严重威胁中老年人身体健康的疾病,对于发病急、出血量大的患者多需手术治疗,但术后并发症较多,处理不及时同样危及生命.本文结合我科近年手术治疗的130例患者,对其术后处理的经验报告如下.     

大剂量甲波尼松龙对兔脊髓空洞前状态蛋白激酶C活性变化的影响

目的 观察大剂量甲波尼松龙对脊髓空洞前状态蛋白激酶C（PKC）活性变化的影响。方法 用新西兰兔96只制作模型，随机分为Kaolin组、MP干预组，其中后者用大剂量甲波尼松龙（30mg／kg体重）干预。术后1,3,7,14、21d用光镜、干湿重法和底物磷酸化法观察两组动物上颈髓病理学演变、脊髓含水量以及胞膜、胞质PKC活性。结果 与Kaolin组比较，MP干预组动物上颈髓水肿程度减轻，高峰延迟，脊髓含水量显著降低，以3d的含水量（68．66±0．37）％和Tarlov评分（5．00±0．00）改善最为明显，同时胞膜和胞质PKC活性明显下降，以7d[（5．76±0．45）／（3．41±0．54）pmol·mg^-1·min^-1]和14d[（6．21±0．40）／（3．77±0．31）pmol·mg^-1·min^-1]最为显著，下降达50％。结论 大剂量甲波尼松龙通过抑制脊髓空洞前状态PKC移位激活、降低PKC活性发挥对空洞前状态脊髓缺血、水肿的保护作用。