Rho-Rock通路在血管紧张素Ⅱ诱导肝星状细胞收缩中的作用

目的 探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)促进肝星状细胞(HSC)收缩时Rho激酶介导的非Ca2+依赖性信号转导通路的作用机制.方法 采用HSC-T6细胞系,给予AngⅡ 10 μmol/L处理,聚硅酮膜法直观检测HSC的收缩性;蛋白质印迹法检测肌球蛋白轻链(MLC)和磷酸化MLC表达水平.观察ArtsⅡ1型受体阻断剂伊贝沙坦、蛋白激酶C特异性抑制剂stauro、Rho激酶特异性抑制剂Y27632、肌球蛋白轻链激酶特异性抑制剂ML-7对磷酸化MLC表达水平的影响;逆转录聚合酶链反应检测Rho-Rock通路RhoA激酶2(Rock2)、RhoAGTP、Rho鸟核苷酸转化因子(RhoGEF)mRNA的表达.结果 AngⅡ可诱导HSC收缩;还可诱导磷酸化MLC蛋白水平的变化,并呈时间依赖性,15 min达到峰值后逐渐减低.AngⅡ+伊贝沙坦组和AngⅡ+Y27632组诱导的MLC蛋白磷酸化水平均低于AngⅡ组(1.12±0.09、1.22±0.10 vs 1.33±0.06,P=0.003);而AngⅡ+ML-7+stauro组磷酸化MLC蛋白水平(1.43±0.09)高于AngⅡ+Y27632组(P=0.003);AngⅡ+Y27632+ML-7+stauro组水平较低(0.64±0.04,P=0.000).Ang Ⅱ组Rock2、RhoAGTP、RhoGEF mRNA的表达均高于相应对照组(0.36±01vs0.12±0.01、0.80±0.01 vB 0.40±0.02、0.65±0.11 vs 0.33±0.09,均P＜0.05),AngⅡ+伊贝沙坦组3种元件的表达均低于Ang Ⅱ组.Ang Ⅱ+Y27632组Rock2与RhoGEFmRNA的表达(0.15±0.01、0.28±0.08)较Ang Ⅱ组低,RhoA GTP的表达(1.14±0.02)则较高.AngⅡ+ML-7+stauro组3种元件的表达均高于对照组,AngⅡ+Y27632+ML-7+stauro 3组3种元件的表达(0.23±0.01、0.83±0.02、0.69±0.08)均高于AngⅡ+ML-7+stauro组(均P＜0.05).结论 Ang Ⅱ可以通过Rho-Rock通路来诱导HSC的收缩.     

Barthel指数量表应用于急性脑卒中患者生活能力测量的信度研究

目的:探讨Barthel指数量表在急性脑卒中患者中的评价者间信度和内在一致性。方法:32例急性脑卒中患者参与本研究。在入院和出院时由两位护士各自独立地应用Barthel指数量表评价。检验Barthel指数量表的评价者间信度和内在一致性。结果:评价者间信度统计分析结果显示,在入院和出院时的Barthel指数量表总分的ICC值分别为0.987和0.945。内在一致性统计分析结果显示,在入院和出院时的Barthel指数量表的Cronbach’sα系数分别为0.908和0.890,Barthel指数量表的10项目Cronbach’sα系数范围为0.871～0.915。结论:Barthel指数量表具有良好的评价者间信度和内在一致性,本研究为护士在急性脑卒中患者中应用Barthel指数量表提供了参考依据。     

新生儿血培养凝固酶阴性葡萄球菌菌种分布及耐药监测

目的了解南方医科大学附属深圳市妇幼保健院新生儿血培养分离凝固酶阴性葡萄球菌（coagulase-negative staphylococci,CNS）菌种分布及耐药情况。方法采用全自动血培养仪和Phoenix100微生物分析系统进行培养和菌株鉴定,药敏试验采用K-B纸片扩散法。结果 2006年3月至2009年12月NICU血培养标本中共分离CNS 213株,其中溶血葡萄球菌73株（34.3%）,表皮葡萄球菌71株（33.3%）,人葡萄球菌45株（21.1%）,其他葡萄球菌24株（11.3%）;耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）检出率88.3%（188/213）,MRCNS药敏结果显示多重耐药;未发现对万古霉素耐药的CNS。结论新生儿血培养CNS菌种以溶血葡萄球菌和表皮葡萄球菌为主,MRCNS分离率逐年增高且呈多重耐药,万古霉素和替考拉宁是治疗MRCNS感染的首选药物,临床医生应根据CNS感染的种类和药敏结果合理使用抗生素。     

血管紧张素Ⅱ对大鼠肝星状细胞收缩及Rho-Rock通路的影响

目的 探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对大鼠肝星状细胞(HSC)ROCk通路的影响机制.方法 采用HSC-T6细胞株,给予AngⅡμmol/L处理,聚硅酮膜法直观检测HSC的收缩性;另予AngⅡ 10 μmol/L处理,免疫印迹法检测肌球蛋白轻链(MLC)磷酸化的表达水平.观察AngⅡ 1型受体(AT-1受体)阻断剂伊贝沙坦和Rho激酶特异性抑制剂Y27632对磷酸化MLC表达水平的影响;逆转录聚合酶链反应检测Rock通路Rock2(Rho kinase 2)mRNA的表达.结果 AngⅡ可诱导磷酸化MLC蛋白水平的变化,并呈时间依赖性,15min达到峰值后逐渐减低.伊贝沙坦和Y27632处理组可抑制AngⅡ诱导的MLC蛋白磷酸化水平.AngⅡ处理组Rock2 mRNA的表达显著增强,伊贝沙坦和Y27632均可抑制Rock2 mRNA的表达.结论 AngⅡ可以通过Rock通路来诱导HSC的收缩.     

血管紧张素Ⅱ对肝星状细胞早期生长反应因子-1通路的调控作用

目的 探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对肝星状细胞(HSC)早期生长反应因子-1(EGR-1)信号转导通路的影响.方法 采用HSC-T6细胞株.分别予AngⅡ 1 μmol/L处理10 min、30 min,Western blot检测磷酸化P42/44蛋白的表达.另外,观察AT-1受体阻滞剂-irbesartan、ERK1/2特异性阻断剂-U0126、抗氧化剂-乙酰半胱氨酸(NAC)(均预处理60 min,再予AngⅡ刺激)和TNFα对磷酸化P42/44蛋白表达的影响.此外,予AngⅡ、irbesartan、U0126、NAC和ACEI处理后,电泳迁移率变更分析(EMSA)检测EGR-1 DNA结合活性的变化;Western blot检测血小板衍生生长因子-B(PDGF-B)蛋白的表达.免疫组化检测AugⅡ对HSCPDGF-B蛋白表达的影响.结果 AngⅡ可诱导磷酸化P42/44的表达.U0126和irbesartan可抑制磷酸化P42/44的表达.EMSA结果显示:AngⅡ干预HSC 0.5h后,EGR-1 DNA结合活性开始增加,1 h达到峰值,然后逐渐减低.U0126和irbesartan处理后可显著抑制AngⅡ诱导的EGR-1活性增强.较高浓度的ACEI可抑制EGR-1的活性.当ACEI浓度为0.1 nmol/L时EGR-1的活性增强.NAC对EGR-1的活性无抑制作用.AngⅡ可诱导HSC PDGF-B蛋白表达.irbesartan可抑制AngⅡ诱导的PDGF-B表达.U0126、NAC和ACEI对PDGF-B表达无抑制作用.结论 AngⅡ可经ERK1/2通路诱导HSC EGR-1活性增强.AngⅡ可经EGR-1通路调控PDGF-B的表达.     

无血清培养的大肠癌Colo205细胞生成肿瘤干细胞球的研究

目的 通过含生长因子的无血清培养基(SFM)培养大肠癌Colo205细胞,分离并扩增出肿瘤干细胞球.方法 SFM培养大肠癌Colo205细胞,以含血清培养基(SSM)组为对照.观察细胞形态,检测正常肠道干细胞标志Musashi-1的表达,更换培养基为SSM诱导其分化,分别检测SFM组细胞分化前、分化后以及SSM组细胞表面标志CDl33、CD44表达的改变,分析各细胞周期的比例,最后进行核型分析.结果 Colo205细胞能在SFM中存活、增殖并形成肿瘤干细胞球,高表达Musashi-1,SFM组细胞分化前CD133、CD44的表达高于SSM组和SFM组分化后,差异有统计学意义(P＜0.05),SFM组分化后与SSM组相比差异无统计学意义(P＞0.05).细胞周期分析发现肿瘤干细胞球处于高增殖状态,核型分析发现SFM组细胞与SSM组细胞染色体条数未见明显差别.结论 含生长因子的SFM培养Colo205细胞,可生成肿瘤干细胞球,这种细胞球富集了肿瘤干细胞.     

剖宫产术后再次妊娠分娩266例临床分析

目的探讨剖宫产术后再次妊娠分娩方式及对产妇结局的影响。方法对我院3年来266例剖宫产术后再次妊娠的孕妇住院分娩资料进行回顾性分析。结果阴道试产22例,阴道分娩14例,成功率为63．64％,发生先兆子宫破裂2例,占9．09％。再次剖宫产252例,占95．45％,发生不完全性子宫破裂5例,占1．98％。再次剖宫产产后出血率（6．35％）及量（≥1500ml,1．19％）均高于首次剖宫产组（5．21％,0．87％）、阴道组（3．82％,0．03％）（P〈0．05,P〈0．01）。瘢痕子宫再次妊娠前置胎盘发生率（2．65％）显著高于非瘢痕子宫再次妊娠组（0．52％）（P〈0．01）。结论单纯剖宫产史不能作为瘢痕子宫再次妊娠剖宫产的指征,符合试产条件者,严密监护下可阴道试产,以降低剖宫产率、产后出血率及前置胎盘发生率。     

试论针灸的创新与未来

文章基于理论研究和临床实践 ,提出了进行针灸创新的许多方法 ,如开展多科学的综合研究 ,建立较细的分科体系 ,积极进行中西医结合等 ,并强调只有创新 ,针灸才有未来