Hedgehog信号通路在激素性股骨头坏死作用机制中的研究进展

糖皮质激素的不正确使用导致股骨头内骨代谢异常、脂代谢失衡、血微循环障碍是激素性股骨头坏死发生、发展的重要原因之一。Hedgehog通路作为一条高保守信号通路,在组织器官骨骼的形成发育以及疾病过程中有着重要调控作用。近年来,随着精准医学的进一步发展以及对于细胞和分子生物学的广泛深入研究,发现Hedgehog信号通路可以通过促进骨髓间充质干细胞成骨分化,抑制脂肪细胞的生成,加速血管内皮细胞的新生对激素性股骨头坏死进行有效的靶向调控。现以Hedgehog信号通路在激素性股骨头坏死病理机制中发挥的调控作用进行综述,以期为临床治疗激素性股骨头坏死提供精确的靶点。     

dNCPs、TGF-β1及联合应用对人牙髓成纤维细胞增殖、ALP及矿化的影响

目的 :观察牙本质非胶原蛋白 (dentinnon collageproteins ;dNCPs)、转化生长因子 (transforminggrowthfactor ;TGF β1)及联合应用对人牙髓成纤维细胞生物学特性的影响。 方法 :利用混合酶消化法成功培养了人牙髓成纤维细胞 ,角蛋白及波形丝蛋白鉴定其来源。在细胞中分别加入牙本质粉、dNCPs、TGF β1及其复合物 ,通过MTT、ALPase和Von Kossa染色检测其作用。 结果 :dNCPs和TGF β1可显著增加细胞的增殖及ALPase分泌 ,细胞可聚集成团形成矿化结节。 结论 :dNCPs和TGF β1可改变人牙髓成纤维细胞的生物学活性 ,但两者间无相互促进作用。     

大张皮片法与小皮条法培养表皮细胞的比较研究

目的　比较研究用大张皮片和小皮条培养表皮细胞的方法。　方法　将皮肤组织切成大张皮片 ,用锐刀网状切割真皮面 ,Dispase酶消化充分后用镊子分离真、表皮 ,然后消化表皮进行表皮细胞培养 (大张皮片法 )。将同样大小的皮肤组织切割成小皮条 ,消化充分后用镊子分离真、表皮 ,然后进行表皮细胞培养 (小皮条法 )。记录两种方法切割皮肤和分离真、表皮所需时间 ,比较培养出表皮细胞的数量和纯度。　结果　将 5 cm2 大小的皮肤切割成小皮条需要 8～10分钟 ,而将同样大小皮肤切割成大张皮片仅需 1～ 2分钟 ;从小皮条上分离真、表皮耗时 10～ 15分钟 ,大张皮片法仅需2分钟。通过对比培养发现 ,大张皮片法获得的表皮细胞较多 ,活力较强 ,发生成纤维细胞污染的机会少。　结论　大张皮片法较小皮条法操作更简便、快捷 ,培养获得的表皮细胞活性高 ,成纤维细胞污染机会明显减少     

化学萃取异种组织工程化神经支架的方法和组织学研究

目的：研究新的化学萃取方法，清除成年兔坐骨神经中的细胞和髓鞘，建立成年兔坐骨神经的化学萃取方法，获得去细胞异种神经体移植物，方法：切取健康成年兔双侧坐骨伸经，以triton X-100和脱氧胆酸钠溶液按一定浓度和程序进行化学处理。萃取神经和新鲜神经行HE染色及电镜检查，以观察细胞、髓鞘及神经基底膜；免疫组织化学染色以显示雪旺细胞基底板层，并进行组织相容性的试验结果：去细胞神经的延展性和神经外膜的韧性和弹性良好，细胞和髓鞘被彻底清除，神经基底膜被保留，雪旺细胞基底板层保留完好，去细胞神经为一种没有细胞髓鞘及其碎片的空的神经基质管，其植入的临近部位无急性炎症反应，有较好的生物相容性，无脓肿形成和组织坏死发生。结论：Triton X-100及脱氧肌酸钠化学处理方法，可有效清除周围神经中的细胞及髓鞘，萃取长段的去细胞神经，该神经移植物保持了网管柱状组织结构，保留了雪旺细胞板层素，可能是制备具有仿生结构的组织工程化神经支架较为理想的方法。     

骨髓间充质干细胞复合组织工程化脱细胞真皮基质构建组织工程皮肤

目的：体外培养扩增SD大鼠骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs），复合组织工程化脱细胞真皮基质构建组织工程皮肤，为进一步临床应用奠定基础。方法：将SD大鼠骨髓间充质干细胞进行体外培养扩增后，以生长状态良好的骨髓间充质干细胞接种于制备好的组织工程化脱细胞真皮支架上，进行体外联合培养，构建组织工程皮肤。观察细胞生长情况及组织工程皮肤结构。结果：体外培养的SD大鼠骨髓间充质干细胞生长良好，传代扩增容易，组织工程化脱细胞真皮基质去细胞完全，骨髓间充质干细胞在脱细胞真皮基质中生长良好，可体外构建组织工程皮肤。结论：利用体外扩增培养的骨髓间充质干细胞及制备的组织工程化脱细胞真皮基质可以体外联合构建组织工程皮肤。     

组织工程全层皮肤修复糖尿病性皮肤溃疡创面的临床研究

目的探讨利用组织工程全层皮肤（ActivSkin）修复糖尿病性皮肤溃疡创面的临床应用方法。方法对皮肤溃疡患者采用控制血糖、增如营养、防治感染等措施，ActivSkin直接覆盖于创面，创面分3层包扎，常规换药，分别于术后观察组织工程皮肤的有效性及安全性。结果患者术后病情平稳，可见ActivSkin在创面存活，创面边缘可见白色新生组织形成，随时间延长创面逐渐缩小，平均28d后达到临床愈合。结论利用ActivSkin修复糖尿病性皮肤溃疡创面可促进创面早期修复、缩短病程和降低由此产生的致残率；为ActivSkin的临床应用提供了切实可行的方法。     

中药单体调控成骨相关信号通路治疗激素性股骨头坏死的研究进展

激素性股骨头坏死是一种主要由糖皮质激素诱导的多种因素共同作用而造成的骨科常见疾病,其具有治愈难度大、愈后效果差等特点。而且其具体发病机制至今仍未明确。成骨相关信号通路对骨形成的影响至关重要,糖皮质激素诱导的成骨相关信号通路异常激活及转运所导致的骨髓间充质干细胞分化异常、骨代谢功能紊乱、成骨形成障碍等因素或是造成激素性股骨头坏死发生和发展的主要原因。骨骼的形成、重塑能力都离不开骨髓间充质干细胞的参与,其是一种拥有不断自我更新和分化能力的干细胞,更好地强化骨骼重塑能力关键就在于提高其成骨分化能力,并且这是抑制骨吸收,阻止破骨细胞分化的重点。传统中药对骨坏死的治疗在古时已有应用,《本草汇言》记载：“凡下焦之虚,非杜仲不补……足胫之酸,非杜仲不去;腰膝之痛,非杜仲不除……补肝益肾,诚为要药。”这表明古代医家早已开始运用杜仲补益肝肾,强健筋骨的功效对骨坏死进行有效治疗。随着国家支持中医药发展的力度加大,传统中医药在防治激素性股骨头坏死方面的研究不断增加,多项研究都发现中药通过影响靶向信号分子可以对骨髓间充质干细胞的分化产生积极的作用,促进成骨及骨缺损修复,进而对抗激素性股骨头坏死的发生及发展。中药调控成骨相关信号通路防治激素性股骨头坏死已成为当今研究的热点。现就中药单体通过调控成骨相关信号通路防治激素性股骨头坏死的研究进展做一综述,挖掘探究促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化、抑制破骨细胞分化、促进骨形成的机制,以期为中药治疗激素性股骨头坏死的更深层次研究提供参考。     

大鼠牙髓干细胞与牙乳头间充质细胞成牙能力的比较研究

目的:探讨采用牙髓干细胞替代牙乳头间充质细胞进行牙齿再生研究的可行性。方法:分别分离培养6周龄SD大鼠切牙牙髓干细胞(DPSCs)和出生1d的SD仔鼠切牙牙乳头间充质细胞(DPMCs),对上述2种细胞的表面标记、增殖能力、体外矿化能力以及向成牙本质细胞分化能力进行比较。结果:DPSCs与DPMCs均具有较强的增殖能力和矿化能力,体外诱导均有成牙本质细胞特异性标记物DSPP基因表达,体内移植后均能够形成牙本质样结构。结论:DPSCs是一种较为理想的牙胚间充质细胞的替代细胞,在适宜的诱导环境中能够替代DPMCs进行牙齿的再生研究。     

大鼠外胚间充质细胞向成牙本质细胞样细胞定向诱导分化--三维诱导模型的建立

目的：探讨大鼠面突外胚间充质细胞向成牙本质细胞分化的机制。方法：以胶原作为支架，建立外胚间充质细胞三维培养模型，并在培养液中加入10ng／mlbFGF和(或)100ng／mlIGF-1等生长因子，观察和检测细胞表型的变化。结果：经bFGF和IGF-1诱导4d后，在胶原的周边细胞出现平行排列的具有细长单极突起的成牙本质细胞样细胞，通过免疫组化抗DSP抗体染色阳性。而其余组细胞排列较紊乱，抗DSP染色阴性。结论：含有bFGF和IGF-1的三维诱导模型可诱导大鼠外胚间充质细胞向成牙本质细胞样细胞分化，为研究牙齿发育的分子机制奠定了基础。     

Gluma脱敏剂在活髓牙保存治疗中的应用

为预防牙体充填后出现牙髓刺激症状,我们自 1996年起,应用Gluma脱敏剂对窝洞制备后的牙齿进行预处理,取得了较为满意的效果,现报道如下。1　材料和方法1. 1　病例选择门诊患者 56例,共 82个患牙,其中中龋 74个,深龋 8个,均表现为不同程度的冷热刺激症状,无自发痛。随机分为两组,每组 41个患牙,同一患者的不同患牙尽量分在不同组,以便对照。1. 2　材料Gluma脱敏剂(贺利氏古莎 -上海齿科有限公司 ),磷酸锌水门汀、氧化锌丁香油水门汀 (上海齿科材料厂 ),银汞合金(北京四泰新技术开发公司)。1. 3　方法对照组:去腐,制洞,以 750mL/L的乙醇清洗…