不同类型静水压对兔软骨细胞表型的影响

目的:传代和压力负荷都是影响软骨细胞表型的因素。单层培养的关节软骨细胞在培养过程中随着传代逐渐失去了典型软骨细胞的形态学特征,变得像成纤维细胞,而且II型胶原的分泌减少,失去了软骨细胞特异性,即出现了反分化[1]。Lee MS等发现,某些机械应力可诱导软骨细胞凋亡,改变软骨细胞的新陈代谢,也会导致关节软骨的退变[2]。在适当的应力刺激下,软骨细胞可以通过调节基质代谢来适应压力,但在过度或持续的应力下软骨细胞就可能产生各种病理改变[3]。本试验将兔软骨细胞放在静水压力负载装置中培养,并传代,在生理水平的流体静态压力范围内(0.1-15MPa)[4]施加不同大小的循环静水压,以及不同大小的持续静水压,观察其对兔软骨细胞损伤和表型的影响。方法:试验组循环加压组分为0.15MPa、0.5Mpa、1MPa三个小组,对照组为持续加压组(分为0.15MPa,0.5MPa,1MPa三个小组)和常压持续培养组。用酶消化法获取兔关节软骨细胞,在静水压力负载装置中按照上述分组作普通培养瓶贴壁的单层培养,并传代。检测Ⅰ型胶原和II型胶原免疫组化,苏木素套核染色,倒置显微镜观察摄影。以RT-PCR方法检测软骨细胞中Proteoglycan,Aggrecan,Ⅰ型胶原和II型胶原mRNA的表达。结果:在循环静水压力下培养,软骨细胞有较高的细胞增殖率,II型胶原,Proteoglycan和Aggrecan等表达增加。生理水平的循环静水压越高,软骨细胞表型越稳定。常压持续培养在第6代开始出现表型改变;持续静水压力培养的软骨细胞更早失去软骨细胞的特有表型,并且持续静水压力越大,表型改变越早。结论:在生理水平的静水压范围内一定频率和大小的循环静水压力能维持或促进软骨细胞的合成分泌功能,有助于软骨细胞特有表型的稳定。     

循环静水压力对维持兔软骨细胞表型的影响

目的：本研究将兔软骨细胞放在静水压力负载装置中培养，并传代，施加不同频率和大小的静水压，观察其对兔软骨细胞表型的影响。方法：用酶消化法获取兔关节软骨细胞，分别在不同的压力和频率下作普通培养瓶贴壁的单层培养，并传代。40kPa循环静水加压为实验组，40kPa持续静水加压培养和常压培养作为对照。Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原免疫组化，苏木素套核染色，倒置显微镜观察摄像。以RT—PCR方法检测软骨细胞中蛋白聚糖、聚集蛋白聚糖、Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原mRNA的表达。结果：在循环静水压力下培养，软骨细胞有较高的细胞增殖率，培养至第7代未见明显表型改变，仍然表达Ⅱ型胶原、蛋白聚糖和聚集蛋白聚糖等。常压培养，软骨细胞传代至第5代以后，逐渐失去软骨细胞的特有表型。而持续静水压力培养的软骨细胞传代至第3代以后就开始逐渐失去软骨细胞的特有表型。结论：一定的循环静水压力能维持软骨细胞的合成分泌功能，有助于软骨细胞特有表型的稳定。     

浅议中医专业《诊断学》问题教学中的"问题设计"环节

《诊断学》是中医专业的必修课程,其特点是内容多,知识量大,涉及面广,实践性强。进行系统学习需要的学时比较多,但由于中医专业课程设置的特点,使《诊断学》课程学时比较少,致使教学效果受到了影响。此外,随着医学科学技术的发展和各学科间知识的相互渗透,更感到了学时少而带来     

柱前衍生-气相色谱法测定人尿中硫氰酸盐

目的建立采用2,3,4,5,6-五氟苄基溴(PFB-Br)进行柱前衍生,气相色谱法测定人尿中硫氰酸盐的方法。方法取20.0μL尿液,分别加入1.0 m L乙腈及100.0μL PFB-Br进行衍生反应,直接采用气相色谱仪检测。结果尿中硫氰酸盐的质量浓度在1.000~10.000 mg/L呈线性关系,线性相关系数为0.999 6,方法最低检出浓度为0.112 mg/L,最低定量浓度为0.411 mg/L(以20.0μL尿样计算);方法的加标回收率为97.22%~102.04%,批内相对标准偏差(RSD)为1.46%~5.10%,批间RSD为1.56%~5.35%。氢氰酸离子对测定有干扰,其余常见的无机离子如氯离子、硫酸根离子和硝酸根离子等对测定结果均无干扰。样品在4℃至少可保存15 d。结论该方法适用于人尿中的硫氰酸盐的测定。     

氨基葡萄糖筋骨素片改善膝骨关节炎患者膝关节功能的人体试食试验

目的:观察氨基葡萄糖筋骨素片对膝关节炎患者膝关节疼痛,晨僵,关节屈曲及行走能力等骨关节功能人体试食试验的效果。方法:2003-12/2004-04上海第二医科大学附属瑞金医院伤科门诊收治骨性关节炎患者101例,按性别、年龄、关节炎病程和X射线分级分为试食组51例,对照组50例,试食组服用氨基葡萄糖筋骨素片,2片/次,2次/d,对照组服用外观与氨基葡萄糖筋骨素片相同的淀粉安慰剂,服用方法与试食组一致。观察试食组试前后症状积分中(膝关节休息痛、运动痛、压痛、肿胀、晨僵、膝关节屈曲、行走能力)7个项目的变化情况。结果:按意向处理分析,101例均进入结果分析。试食前两组的症状积分没有差异[试食组(6.20±3.23)分,对照组(6.06±2.95)分(P>0.05)],经过2个月的试食之后,两组的症状积分降低程度不同[试食组(2.88±3.12)分,对照组(4.50±3.09)分,(P<0.05)],试食组降低更加明显。治疗前后两次积分差值比较差异显著[试食组(3.31±2.67)分,对照组(1.59±2.37)分,(P<0.001)]。结论:氨基葡萄糖筋骨素片能降低膝关节退行性骨关节炎患者的症状积分,同时又具有改善膝关节骨关节屈曲功能和行走能力的作用。     

弱视儿童家庭训练治疗遵医行为的调查分析

弱视是在视觉发育敏感期,因异常视觉经验引起的没有器质性病变的视力下降,是一种可以预防和治疗的视力残疾[1]。我国的弱视检出率约为2.8%,保守估计全国弱视患者约为4 000万[2]。弱视是儿童常见的眼病之一,一般发病年龄是4~6岁,家庭仪器训练是目前治疗儿童弱视的有效方法之一。     

血清中丙酮和3种醇类的气相色谱内标同时测定法

目的建立使用内标定量同时测定血清中甲醇、乙醇、异丙醇和丙酮的气相色谱法。方法将血清与内标液异丁醇以1∶1混合,以10∶1的分流比进样0.6μl,柱流量1.00 ml/min,采用程序升温,经HP-INNOWAX毛细管柱分离,气相色谱火焰离子化检测器内标法测定。结果在15.70～790.00 mg/L的线性范围内,所得甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮的回归方程均呈较好的线性关系,r0.999。方法的检出限为0.31～0.46 mg/L,定量下限为1.05～1.54 mg/L。批内和批间RSD分别为0.8%～3.6%和2.5%～5.5%,加标回收率为94.4%～101.8%。空气中的10种常见有机物对这4种化合物不造成干扰,样品在-8℃以下可保存14 d。结论该方法操作简单,快速,回收率高,重现性好,适合人群血清中甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮的监测。     

工作场所空气中锡及其无机化合物测定样品前处理方法的改进

目的 对样品前处理方法进行改进,建立火焰原子吸收光谱法快速、准确测定滤膜中锡及其无机化合物的样品前处理方法。 方法 本法使用1 ml浓盐酸比色管加塞60 ℃水浴30 min消化样品,消化后样品溶液用去离子水定容至10 ml。 结果 锡浓度0.0~160.0 mg/L范围内线性关系良好,相关系数r=0.999 9(n=6),检出限为0.3 mg/L,定量下限为1.0 mg/L,样品最低检出浓度为0.03 mg/m³,最低定量浓度为0.1 mg/m³,加标回收率为98.5%~99.5%,批内相对标准偏差(RSD)为0.9%~1.5%,批间RSD为0.9%~2.3%。对锡质控样进行测试,结果符合要求。 结论 利用本样品前处理方法测定滤膜中锡及其无机化合物,方法简便,精密度、准确度高,结果满意。     

大剂量吡喹酮冲击疗法治疗儿童脑囊虫病-附252例临床分析

作者采用大剂量冲击疗法治疗儿童脑囊虫病 ,经临床观察 ,治疗效果满意 ,疗效快 ,病程短。现将 1994年 1月～ 1999年 12月跟踪观察治疗 2年以上的 2 5 2例患儿疗效分析如下。1　临床资料1.1　一般资料　全部病人为住院患者。本组 2 5 2例均经脑 CT或 MRI及囊虫血清免疫学检查确诊。其中男 14 3例 ,女 10 9例 ;年龄 0～ 2岁 6例 ,3～ 7岁 5 2例 ,8～ 11岁 5 2例 ,12～ 14岁 73例 ,15～ 18岁 6 9例 ;病程 3d～ 5年 ,半年以内 195例 ;单纯神经系统囊虫 2 4 6例 ,合并皮肌型 6例。1.2　临床表现　癫痫发作 2 14例 ,其中全身性发作 187例 ,局限…     

青年人与老年人胃癌的临床特点分析

目的 总结分析青年人与老年人胃癌的不同临床特点，探讨其治疗方法。方法 对我院1990年1月～12月住院手术治疗，经病理检查确诊的59例青年人胃癌与356例老年人胃癌进行回顾性分析，比较两组的临床特点。结果 青年组女性所占比例明显高于老年组女性，发病性别比例具有统计学差异（P〈0．01）；肿瘤部位，青年组多位于胃窦部，占66．10％，老年组虽然以胃窦部为主，但贲门部比例较青年组高，占39．16％，两组发病部位分布具有统计学差异（P〈0．01）；青年组病理组织类型分化差，以低分化腺癌为主，占49．15％。老年组以中分化腺癌为主，占49．16％，发病病理组织类型分布具有统计学差异（P〈0.01）；青年组胃癌手术方式与老年组相近（P〉0．05）；青年组与老年组预后均较差，两组无统计学差异（P〉0．05）。结论 青年人与老年人胃癌具有不同的临床特点，整体病期均较晚，预后均差。因此，早期发现、早期诊断是提高疗效的关键。