DNA芯片分析乙型肝炎病毒基因多态性简便方法研究

目的 建立一种简便方法,用于乙型肝炎病毒基因(HBV DNA)多态性分析.方法 将标记生物素的dUTP在双重聚合酶链反应(PCR)时掺入DNA样品目的断片,并将目的断片杂交于含HBV核苷酸序列(1896、1814、1762、1764、P区552)的野生型及突变型探针的DNA芯片上,用亲和素-碱性磷酸酶进行显色,并转印于尼龙膜上,再用光学扫描仪读取结果.结果 42例乙型肝炎患者HBV核苷酸序列1896、1814、1762、1764、P区552位点突变率分别为40%、31%、50%、50%、10%;该法检测敏感度为5.6×102病毒拷贝数/毫升;特异性高;强、弱阳性批内变异系数(CV)分别为15.1%和19.8%.结论 生物素-亲和素系统用于HBV DNA多态性芯片显色,该法简便,不需特殊设备,易于推广应用.     

小剂量硫氮唑酮加地戈辛治疗老年心力衰竭伴快心室率房颤初探

目的 探讨能控制老年心衰伴快心室率房颤的一种有效、安全的新方法。方法 ８２例病人随机分为２组，治疗组５１例服用小剂量硫氮唑酮加地戈辛；对照组３１例单用地戈辛。Ｈｏｌｔｅｒ观察治疗前和治疗后一周心率及功能变化。结果 研究表明治疗组静息心率，最高心率和降低程度与对照组比较有显著差异（Ｐ〈０．０５）；心功能亦明显好转（Ｐ〈０．０５）。结论 在老年心力衰竭中使用小剂量硫氮唑酮加地戈辛可安全有效地控制房颤地     

二重RT-FCR同时测定HGV与HCV RNA方法学研究

本文对二重RT-PCR同时测定HGV与HCV RNA的反应条件进行了最佳化研究,发现在用于HGV扩增的三组引物中,NS5b区的L与S二组引物较5'NCR区的N组引物有更高的检测敏感度(P<0.01)。不同的样本贮存对HGV与HCV RNA检测结果影响较大,将逆转录与第一次扩增分开进行可使测定敏感度提高约100倍。本法在同一反应体系中可同时检测HGV与HCV RNA,减轻了实验人员的操作强度,可降低测定费用近50％。     

人乳腺癌组织中增殖诱导配体及受体mRNA水平定量测定

目的:分析乳腺癌组织中增殖诱导配体(APR IL)及其受体mRNA的表达水平。方法:采用实时荧光定量PCR(RFQ-PCR)技术检测临床样本中靶基因mRNA准确含量,并以靶基因和内参β2M mRNA含量的比值作为评价靶基因表达水平的指标。结果:RFQ-PCR检测靶基因mRNA含量的线性范围为109~101pg/m l,批内和批间重复性测定的变异系数v分别为3.87%~10.12%和6.86%~12.29%。乳腺癌25例组织样本的检测结果显示乳腺癌及癌旁组织中APR IL的水平均显著高于远端正常组织(P<0.05),而β细胞成熟抗原和穿膜蛋白活化物的表达水平在3组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:成功建立RFQ-PCR检测APR IL及其受体mRNA含量的方法,具有较好的检测灵敏度和重复性;发现APR IL在乳腺癌组织中高表达,提示APR IL在乳腺癌发生、发展过程中可能起了重要作用。     

引物标记与掺入标记在HBV基因多态性芯片检测中应用的研究

目的 研究引物标记与掺入标记在乙型肝炎病毒（HBV）基因多态性芯片检测中的应用。方法 用掺入标记或引物标记荧光分子Cy5，扩增HBV P区、前C／C区，制备含荧光分子Cy5的目的片段后，分别与HBV基因多态性芯片杂交、扫描并分析结果。结果 掺入标记法信号强度略高于引物标记法，但非特异信号强度也高，两法检测42份乙型肝炎患者血清，结果完全一致，重复性均较好，批内CV15％－20％，引物标记法用于检测HBV基因多态性灵敏度达10^4 copies/ml。结论 引物标记法信号强度虽略低于掺入标记法，但检测灵敏度、特异性仍满足临床要求。     

庚型肝炎病毒感染对肝功能的影响

为了解庚型肝炎病毒感染对肝功能的影响,用逆转录－聚合酶链反应技术检测８５例病毒性肝炎患者ＨＧＶ－ＲＮＡ并检测其肝功能指标。结果显示ＨＧＶ在病毒性肝炎患者中感染率为１０．６％,除１例单纯感染外,其余８例均以与ＨＢＶ或ＨＣＶ重叠感染形式出现。对照ＨＧＶ和ＨＢＶ重叠感染组与ＨＢＶ单纯感染组之间肝功能指标,未发明明显差异,表明与ＨＧＶ重叠感染未加重肝功能损害。     

二重RT—PCR同时测定HGV与HCVRNA方法学研究

本文对二重ＲＴ－ＰＣＲ同时测定ＨＧＶ与ＨＣＶＲＮＡ的反应条件进行了最佳化研究。     

MOPP方案治疗放疗后复发性何杰金氏病的长期随访分析

作者报告澳大利亚墨尔本市Peter MacCallum肿瘤研究中心自1968年-1971年共收治何杰金氏病161例,男101例,女60例,年龄11-75岁(中位数31岁):结节硬化型最多为91例,淋巴细胞优势型10例,混合细胞型41例,淋巴细胞排空型5例,8例组织学不能分类;临床分期Ⅰ期14例、Ⅱ期57例,Ⅲ期63例,Ⅳ期27例;A组105例,B组56例。资料完整可作评价的155例中获CR110例(71%),初经放疗后复发的127例经改良MOPP方案治疗获CR 98例(77%),而28例未经放疗者仅12例获CR(43%),两者有显著性差异(P=0.0007)。本组平均随访10.2年,最短随访5.2年。116例CR者的5年