NOD小鼠未成熟树突状细胞体外诱导淋巴细胞生成并扩增调节性T细胞的研究

目的 探索非肥胖糖尿病(non-obese diabetic,NOD)小鼠未成熟树突状细胞(immature dendritic cell,imDC)诱导并扩增调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的优化方案.方法 分离、培养NOD小鼠骨髓来源的imDC和淋巴细胞,并进行混合淋巴细胞培养,分别加...     

中医治疗颈椎综合征临床疗效分析

目的观察中药内服与中药内服加局部外敷治疗颈椎综合征的疗效。方法随机将94例颈椎综合征分为观察组63例和对照组31例,观察组采用中药内服加局部外敷治疗,对照组单用中药内服治疗。两组均10d为1个疗程,连续治疗2个疗程,比较两组疗效。结果两组治疗都有良好的疗效,但观察组治愈率和总有效率均高于对照组,两组比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论中药内服加局部外敷治疗颈椎综合征,疗效优于单用内服中药治疗。     

小鼠胰岛的分离与纯化

目的 探讨稳定、高效的小鼠胰岛细胞的分离纯化方法.方法 采用胆总管内灌注不同浓度胶原酶(分别为0.5、1.0、1.5 g/L)消化胰腺的方法分离BALB/C小鼠胰岛,Ficoll-400不连续密度梯度离心法纯化胰岛.双硫腙(DTZ)对胰岛进行特异性染色计算胰岛产量及纯度,葡萄糖刺激释放试验体外测胰岛功能.结果 不同浓度的胶原酶在不同时间内消化胰腺后收获的胰岛数量有较大的差异,其中采用0.5 g/L胶原酶V、38 ℃水浴消化20 min组收获量最大为(230±20)个胰岛细胞团,纯度约为90%.DTZ染色后胰岛呈腥红色,形态完整.葡萄糖刺激释放实验示高糖刺激后胰岛素释放量为低糖刺激后的2.3倍.结论 胶原酶浓度、消化时间和温度是影响小鼠胰岛分离结果的重要因素,当胶原酶浓度为0.5 g/L,消化时间20 min时可获得数量较多,纯度较好的胰岛细胞.

Abstract：

Objective To investigate the stable and efficient method of isolation and purification from mice pancreas. Methods BALB/C mouse islets were isolated by different concentrations of collagenase digestion (0. 5, 1. 0, 1. 5 g/L respectively) and purificated by Ficoll density gradient centrifugation.The number, purity and vitality of the islets were analyzed. The production and purity of the islets were checked by Dithizone immunofluorescence staining. The glucose-induced insulin secretion was detected by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) for islet function in vitro. Results Different number of islets was obtained by mice pancreas digestion with different concentrations of collagenase and for different digestion durations.After the mouse pancreata were digested in 38 C and with 0. 5 g/L collagenase V for 20rmin, maximum number of islets was obtained, and the purity of the final preparation was ＞ 95%. After culture in vitro, insulin release of islets under high glucose stimulation was 2. 3 times of that under low glucose stimulation. Conclusion Concentration of collagenase, temperature, and digestion duration were important factors of islet isolation and purification from mice pancreas. More production and higher purity of islets were obtained under the concentration of 0. 5 g/L collagenase Ⅴ for 20 min.     

三氧化二砷对裸鼠人乳腺癌移植瘤的作用及机制

目的探讨三氧化二砷（As2O3）对乳腺癌移植瘤的作用及其机制。方法建立BALB／C—nu／nu裸鼠ER阴性MDA—MB-435s人乳腺癌移植瘤模型,分别以不同浓度的As2O3、顺铂和生理盐水（NS）腹腔内注射,观察移植瘤的瘤重及抑瘤率。并用免疫组化检测乳腺癌石蜡标本中PTEN和Caspase-7的表达。结果As2O3高剂量组、As2O3低剂量组、顺铂组均能明显抑制裸鼠皮下肿瘤的生长,抑瘤率分别为48．68％、32．80％、66．67％。用药后移植瘤组织中PTEN和Caspase-7蛋白阳性细胞数显著增多（P〈0．05）。结论As2O3能明显抑制乳腺癌移植瘤的生长,其作用机制可能是通过上调PTEN和Caspase-7的表达,促进细胞的凋亡来抑制人乳腺癌细胞的生长。     

胰肾同期移植术式选择与并发症分析

【目的】总结胰液膀胱引流(BD)与肠道引流(ED)两种胰肾一期移植(SPK)手术方式,分析术后并发症发生情况、原因和处理方式。【方法】12例Ⅰ型糖尿病(IDDM)合并尿毒症患者施行了SPK,最初2例为BD术式,另10例为改进的ED术式。术后早期采用他克莫司(FK506)／环孢素A(CsA) 霉酚酸酯(MMF) 皮质激素 抗淋巴细胞球蛋白(ALG)或抗CD25单抗四联诱导治疗．以后改为三联维持。抗凝治疗使用肝素、低分子右旋糖酐。【结果】12倒手术均获得成功,术后移植胰、移植肾功能恢复良好,停用外源性胰岛素。4例出现移植肾急性排斥,其中3例治疗后逆转,1例移植肾功能丧失。手术并发症包括：腹腔感染3例,切口感染2例。分别经引流换药治疗后二期愈合;肾周血肿2例．经手术探查清理后好转。多与抗凝剂短期应用过量有关。远期并发症：2例BD术式患者长期存在化学性膀胱炎．其中1例发生2次反流性移植物胰腺炎．经保守治疗好转。所有病例术后均未发生吻合口漏和移植物血管栓塞等严重并发症。【结论】改进的ED—SPK术式安全、简单,远期并发症少,是治疗IDDM合并尿毒症的理想方法;但应积极预防术后早期出血、感染并发症。     

肾移植术后微小病毒B19复发感染诊疗分析

目的 总结肾移植术后受者感染微小病毒B19(human parvovirus B19,HPV-B19)且多次复发的诊断方法、临床表现及防治措施。方法 2020年6月至2022年5月于华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植中心行肾移植术后感染HPV-B19的37例受者中有8例复发,本研究对这8例受者的临床表现、诊疗措施、实验室检查及预后进行回顾性分析和总结。结果 8例受者经过多疗程静脉注射丙种球蛋白（intravenous immunoglobulin G,IVIG）、转换免疫抑制剂及降低免疫抑制强度等综合治疗后,贫血症状改善,血红蛋白（hemoglobin,Hb）水平稳定,并在复发时使用同样治疗措施有效。8例受者最后1次复发后继续随访1年,8例受者再无复发且Hb水平稳定[（136.8±12.0）g/L],整个感染期间肾功能稳定。结论 肾移植术后受者因免疫力低下,易感染HPV-B19且容易复发。当受者感染HPV-B19后,应定期监测Hb及网织红细胞水平,尤其是治疗好转的受者一旦再次出现Hb进行性下降应立即引起重视,进一步通过聚合酶链反应（polymerase chain reacti...     

CD3/Crry共刺激通路对小鼠CD4~+ T细胞的免疫调控

目的:探讨CD3/Crry共刺激通路对小鼠CD4+T细胞的免疫调控及其机制.方法:分离C57BL/6小鼠的脾脏CD4+T细胞,体外检测CD3、CD28、Crry、CD3/CD28、CD3/Crry、CD3/CD28/Crry共刺激对CD4+T细胞增殖的作用效果,并检测其细胞上清液中白细胞介素-2(IL-2)、γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-10(IL-10)的水平.结果:与CD3组相比,CD3/CD28、CD3/Crry和CD3/CD28/Crry共刺激后.CIM+T细胞均出现显著增殖反应(P<0.05),而且CD3/CD28/Crry共刺激组的增殖活性较CD3/CD28或CD3/Crry共刺激组显著增高(P<0.05).CD3/CD28共刺激后,IL-2和IFN-γ水平较CD3、CD28、Crry组和CD3/Crry组显著升高(P<0.05),CD3/Crry共刺激后,IL-4水平较CD3、CD28、Crry组和CD3/CD28共刺激组显著升高(P<0.05),各组IL-10水平无显著差异(P>0.05).结论:CD3/Crry共刺激通路诱导CD4+T细胞产生分泌IL-4,抑制IL-2和IFN-γ的产生,有可能诱导同种移植免疫低反应性.     

CD3/CD46共刺激通路调控同种移植免疫反应的实验研究

目的:探讨CD3/CD46共刺激通路对同种移植免疫反应的调控作用及其机制.方法:分离转人CD46的C57BL/6小鼠的脾脏淋巴细胞,采用MACS免疫磁珠分选CD4+T细胞,以阴性对照组作为对照,体外检测CD3、ConA、CD3/CD28、CD3/cD46、CD3/CD28/CD46共刺激对CD4+T细胞增殖的作用效果,并检测其细胞上清液中白细胞介素2(IL-2),γ-干扰素(γ-IFN),白细胞介素10(IL-10)和转化生长因子β(TGFβ-p)的水平,并以BALB/c小鼠的脾细胞作为刺激细胞,以转人CD46的c57BL/6小鼠的淋巴细胞作为反应细胞进行同种混合淋巴细胞培养,MMT法检测淋巴细胞增殖活性.结果:与CD3组或阴性对照组相比.ConA、CD3/CD28、CD3/CD46和CD3/CD28/CD46共刺激后,CD4+T细胞均出现显著增殖反应(P<0.05),而且CD3/CD28/CD48共刺激组的增殖活性较CD3/CD28或CD3/CD46共刺激组显著增高(P<0.05).CD3/CD28共刺激后,IL-2和γ-IFN水平较阴性对照组和CD3组显著升高(P<0.05),CD3/CD46共刺激后,IL-10和TGF-β水平较阴性对照组、ConA组、CD3组和CD3/CD28共刺激组显著升高(P<0.05).CD3/CD46共刺激后可以显著地抑制同种混合淋巴细胞的增殖反应(P<0.05).结论:CD3/CD46共刺激通路可以诱导CD4+T细胞产生IL-10和TGF-β,抑制同种移植免疫反应的发生.     

胰腺切除后自体胰岛移植治疗慢性胰腺炎

慢性胰腺炎的处理一直是外科难题之一,八十年代后国外开始尝试一种新的治疗方法,即用胰腺全切或次全切来控制患者的疼痛,同时从切下的胰腺中分离出胰岛并行自体移植以防止糖尿病的发生,其疗效在部分患者已得到肯定。本文介绍了这一方法的技术及效果,指出若能改进胰岛分离方法,提高胰岛收获量甚至移植同种或异种胰岛,有可能使这一疗法更为完善,效果更好。     

肝移植术后胆泥及胆结石形成原因分析

目的 探讨肝移植术后胆泥和胆结石形成的原因。方法 对13例肝移植术后发生胆泥和／或胆结石的临床资料进行回顾性分析。结果 13例发生胆泥和／或胆结石的时间为1.5－12个月（平均5.5个月）,供肝热缺血时间平均为5.5min,冷缺血时间11.5h;UW液经门静脉灌注;胆道冲洗时间在热缺血后15-20min;11例供肝动脉与受者的肝动脉吻合,2例与结肠中动脉吻合。结论 肝移植术后发生胆泥及胆结石有多种原因,其中主要是缺血、灌注损伤及肝动脉供血不足。