原代海马神经细胞体外培养的纯化与鉴定

目的 建立原代海马神经细胞体外培养纯化及鉴定的优选方法.方法 取新生Wistar乳鼠,分离海马后在体外采用含血清结合无血清法进行培养,并用NSE、GAP-43、MAP2等海马神经细胞特异抗体经免疫细胞化学方法鉴定细胞性质及纯度.结果 接种24 h后细胞全部贴壁,并长出突起,随时间增加,突起延长并交错形成网络,至第7～8天神经元形态最为成熟饱满,随后逐渐出现细胞老化,神经元最长可生存4周.经鉴定,海马神经元纯度达96%以上.结论 体外采用含血清和无血清法相结合进行原代海马神经细胞培养,细胞纯度高,杂细胞少,可为神经疾病体外研究提供必要细胞基础.     

哈尔滨地区中老年妇女骨质疏松症患病率与临床表现的关系

目的：讲究生沽在哈尔滨地区的中老年妇女骨质疏松症的患病情况和诊断标准。方法：对377例生活在哈尔滨地区的中老年妇女进行双能X线骨密度仪(DEXA)L2-4，ward’s骨密度测定分析，对比现有的骨质疏松症的诊断标准和临床资料研究。结果：ward’s的骨密度显著低于L2-4的骨密度(P&;lt;0．05)。有临床症状、骨量减少、骨质疏松症和严重骨质疏松症的百分比在50．55岁80例受检者中分别为35％，11．3％，5％，0；56-60岁80例中分别为82．5％，41．3％，23．7％，0％；6l-65岁79例中，百分比分别为91．6％，368％，47．4％，5．1％。66-70岁68例中，其百分比分别为100％，26．4％，63.2％，7．4％。70岁以上70例中，其百分比分别为100％，41．4％，44．3％，8．5％。绝经年限与骨密度呈显著负相关(r=-0．89)。结论：高寒地区中老年妇女骨质疏松症患病率随年龄的增长而明显增高，绝经年限与骨密度呈显著负相关。50-60岁妇女DEXA诊断骨质疏松率与临床表现相关性差，应制定本地区骨质疏松症诊断标准。     

老年冠心病患者血清脂连素水平的研究

目的测定脂连素(adiponectin)在老年冠心病患者血清中的水平变化,探讨其在老年冠心病发生、发展中的作用。方法老年冠心病组48例,老年对照组42例。测定血清脂连素、空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、肌酐(Cr)、尿酸(UA),并以脂连素为因变量,以FINS、TG、HDL-C等为自变量行多元线形回归分析。脂连素测定采用双抗体夹心酶联免疫法。结果老年冠心病组血清脂连素水平为(3.75±1.98)mg/L,显著低于老年对照组(8.02±2.98)mg/L,差异有统计学意义(P<0.05);脂连素与BMI、WHR、Waist、TG、HDL-C、FINS相关(P<0.05)。结论脂连素在老年冠心病组中水平下降;脂连素可能为冠心病的一个保护因子。     

老年男性2型糖尿病患者并发动脉粥样硬化与罗格列酮的干预效应

目的：探讨噻唑烷二酮类药物对老年男性2型糖尿病患者的抗动脉粥样硬化作用,并了解该种作用发生的相关因素.方法：①选择2002-03/2003-03哈尔滨医科大学附属第二医院老年病科门诊就诊的男性2型糖尿病患者45例.符合纳入标准的2型糖尿病患者24例,均签署知情同意书.随机将受试者分为3组：对照组（给予格列吡嗪5 mg/次,3次/d）,罗格列酮4 mg/d组（给予罗格列酮4 mg/次,1次/d）和罗格列酮8 mg/d组（给予罗格列酮8 mg/d）,每组8例.本实验共进行6个月.根据罗格列酮治疗3个月糖化血红蛋白下降的情况又分为2亚组：反应亚组（n=10,下降＞1%为反应亚组）和非反应亚组（n=6,下降＜1%为非反应亚组）.②于服药前,服药后3,6个月分别测定身高、体质量、收缩压、舒张压、空腹血糖、糖化血红蛋白、空腹血浆胰岛素、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、三酰甘油及高敏C反应蛋白、纤维蛋白原和颈动脉内膜中层厚度.并计算胰岛素抵抗指数和体质量指数.血浆胰岛素采用双相、双步时间依赖性荧光免疫法测定.高敏C反应蛋白运用比浊法检测.纤维蛋白原运用CA-1500全自动血栓/止血测定系统枸橼酸抗凝血浆检测.颈动脉内膜中层厚度应用高分辨B-型超声仪测定.③各组间比较应用方差分析,组内治疗前后比较应用HotellingT2检验.应用Pearsson相关分析和多元线性回归分析影响颈动脉内膜中层厚度的因素.结果：实验过程中无因肝肾功能改变以及药物不耐受而退出试验者,24例均进入结果分析.①对照组治疗3和6个月后空腹血糖,糖化血红蛋白,三酰甘油水平明显低于治疗前（P＜0.01）,其余指标无显著改变.罗格列酮治疗组在治疗3和6个月后空腹血糖、糖化血红蛋白、胰岛素抵抗指数、三酰甘油、纤维蛋白原,C反应蛋白和颈动脉内膜中层厚度明显低于治疗前（P＜0.05～0.01）;罗格列酮治疗组治疗后空腹胰岛素下降,但治疗6个月时才明显低于治疗前和对照组（P＜0.01）;罗格列酮治疗组治疗6个月后空腹胰岛素明显低于治疗3个月后（P＜0.01）,罗格列酮4mg/d治疗组治疗6个月后胰岛素抵抗指数较治疗3个月后明显减少（P＜0.05）,其余指标于治疗3和6个月后差异不明显.②反应亚组和非反应亚组治疗3和6个月后胰岛素抵抗指数、三酰甘油、纤维蛋白原、C反应蛋白、颈动脉内膜中层厚度均明显低于治疗前（P＜0.01）,且除胰岛素抵抗指数外上述各项二亚组间差异不明显.反应亚组治疗3和6个月后空腹血糖、糖化血红蛋白、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数、三酰甘油、纤维蛋白原、C反应蛋白、颈动脉内膜中层厚度均较低于治疗前（P＜0.01）,空腹血糖、糖化血红蛋白明显低于非反应亚组（P＜0.05～0.01）,反应亚组治疗6个月后空腹胰岛素和胰岛素抵抗指数明显低于非反应亚组和治疗3个月后（P＜0.05～0.01）.反应亚组治疗6个月后低密度脂蛋白胆固醇水平明显高于非反应亚组和治疗前（P＜0.05,0.01）.③Pearson相关分析表明,颈动脉内膜中层厚度的变化只与C反应蛋白的变化呈显著正相关（r=0.298,P＜0.05）,而与糖化血红蛋白、胰岛素抵抗指数等指标改变不相关（r=-0.018,-0.218,P＞0.05）.多元线性回归分析也显示颈动脉内膜中层厚度只与C反应蛋白相关（回归系数b=0.435,P＜0.05）,而与糖脂代谢指标无关.结论：罗格列酮的抗动脉粥样硬化作用主要依赖于其降糖外作用,并可能与抗炎作用有关,此作用无剂量和时间依赖性.     

口服葡萄糖耐量试验对老年糖耐量异常的诊断价值

2型糖尿病（diabetes mellitus，DM）在我国的发病率急剧上升。很多患者在DM出现4～7年后才被诊断，而且相当多患者在确诊时，甚至在诊断前已出现累及心、脑、肾等多器官的严重并发症，因此早期诊断DM具有重要的现实意义。本实验旨在评价口服葡萄糖耐量试验（oral glucosetolerance test，OGTT）在老年DM早期诊断中的价值。     

原发性高血压患者纤溶系统功能的变化

目的观察未经治疗的原发性高血压患者的纤溶指标的变化及临床意义。方法选取36例初次就诊的原发性高血压患者犤男17例,女19例,平均年龄(52±7)岁犦及31例血压正常者犤男16例,女15例,平均年龄(51±7)岁犦。两组受试者的临床特点无明显差别。用发色底物法测定他们的血浆组织型纤溶酶原激活物(t-PA)及其抑制剂(PAI-1)的活性和a2-PI活性。结果原发性高血压患者血浆t-PA和a2-PI活性明显低于对照者,P<0.05,PAI-l,活性明显高于对照组,P<0.05。结论原发性高血压患者存在内源性纤溶功能低下。     

炎性衰老与骨质疏松的研究进展

炎性衰老是机体在衰老过程中所显现出的慢性促炎症反应状态,并随着衰老而进行性加剧。骨质疏松是一种以骨矿物质含量低下、骨微结构损坏、骨强度降低、骨脆性增加、易发生骨折为主要特征的全身性骨代谢障碍性疾病。目前,国外一些前瞻性研究结果表明炎性衰老与骨质疏松关系密切。本文对炎性衰老的概念、机制以及炎性衰老与骨质疏松相关研究进展进行了综述。     

硫氧还蛋白生物活性及其与人类疾病的关系

硫氧还蛋白(thioredoxin，Trx)、硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase，TR)和还原型辅酶Ⅱ(NADPH)一起构成硫氧还蛋白系统(Trx系统)。这是一个广泛分布的NADPH依赖性二硫化物还原酶系统。Trx在TR的作用下可以从氧化型转变为还原型，还原型的Trx可以催化许多有二硫键暴露的蛋白质的还原反应。研究发现Trx除了基本的氧化还原调节功能，还有许多其他生物学活性，因而其与人类疾病的关系日益受到人们的重视。     

PKCδ抑制剂减轻6-OHDA诱导的多巴胺能神经细胞凋亡

目的 观察蛋白激酶Cδ抑制剂在6-OHDA诱导多巴胺能神经细胞系SH-SY5Y细胞凋亡过程中所起的作用,探讨帕金森病可能的分子发病机制.方法 体外培养SH-SY5Y细胞,观察PKC抑制剂对6-OHDA毒性作用的影响,分别用台盼蓝染色、流式细胞仪和透射电镜法观察细胞凋亡.结果 PKCδ抑制剂Rottlerin可减轻6-OHDA引起的细胞凋亡.而总PKC抑制剂Bisindolylmaleimide Ⅰ(Bis)和钙依赖性PKC(α和β)抑制剂G(o)6976不能减轻6-OHDA引起的细胞凋亡.结论 PKCδ抑制剂对6-OHDA诱导的SH-SY5Y细胞凋亡产生保护作用,PKCδ可能直接参与了帕金森病人的神经元凋亡过程.