磷酸化PKCδ参与6-OHDA诱导的多巴胺能神经细胞凋亡

目的： 观察磷酸化PKCδ在6-OHDA诱导的大鼠PC12细胞株凋亡过程中所起的作用，探讨帕金森病发病的可能分子机制。方法： 体外培养多巴胺能神经细胞株PC12细胞，观察PKC激动剂和抑制剂对6-OHDA毒性作用的影响，分别用TUNEL染色和透射电镜法观察细胞凋亡，Western免疫印迹法观察磷酸化PKCδ的表达。结果： PKCδ激活剂PMA加重6-OHDA的毒性作用，使细胞凋亡率上升。PKCδ抑制剂Rottlerin可抑制PKCδ的磷酸化，减轻6-OHDA引起的细胞凋亡。总PKC抑制剂Bis和钙依赖性PKC抑制剂G6976不能减轻6-OHDA引起的细胞凋亡。结论： 在6-OHDA诱导PC12细胞凋亡的过程中，PKCδ的磷酸化是重要环节之一，PKCδ可能直接参与帕金森病人的神经元凋亡过程。     

定量组织速度成像对正常老年人二尖瓣环运动的分析

多普勒组织成像(DTI)是一种无创性室壁运动分析技术，它能够联机实时显示心肌组织的低速度运动信息，摒弃高速度血流信息。应用定量组织速度成像(QTVI)是DTI3种显示方式中的一种，它能够精确测量室壁运动的各种指标。本研究的目的在于应用QTVI探讨正常老年人二尖瓣环运动特征。     

应激对大鼠心肌硫氧还蛋白还原酶表达的影响

目的 探讨硫氧还蛋白还原酶在大鼠心肌抗氧化应激反应中的作用。方法 将Wistar大鼠冰泳5min，采用Northern blot和Western blot检测大鼠冰泳前后心肌硫氧还蛋白还原酶的表达情况。结果 应激后大鼠心肌中硫氧还蛋白还原酶的基因和蛋白表达均增加。结论 硫氧还蛋白还原酶增加有利于大鼠心肌对应激损伤的预防与修复。     

老年男性2型糖尿病患者并发动脉粥样硬化与罗格列酮的干预效应

目的:探讨噻唑烷二酮类药物对老年男性2型糖尿病患者的抗动脉粥样硬化作用,并了解该种作用发生的相关因素。方法:①选择2002-03/2003-03哈尔滨医科大学附属第二医院老年病科门诊就诊的男性2型糖尿病患者45例。符合纳入标准的2型糖尿病患者24例,均签署知情同意书。随机将受试者分为3组:对照组(给予格列吡嗪5mg/次,3次/d),罗格列酮4mg/d组(给予罗格列酮4mg/次,1次/d)和罗格列酮8mg/d组(给予罗格列酮8mg/d),每组8例。本实验共进行6个月。根据罗格列酮治疗3个月糖化血红蛋白下降的情况又分为2亚组:反应亚组(n=10,下降>1%为反应亚组)和非反应亚组(n=6,下降<1%为非反应亚组)。②于服药前,服药后3,6个月分别测定身高、体质量、收缩压、舒张压、空腹血糖、糖化血红蛋白、空腹血浆胰岛素、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、三酰甘油及高敏C反应蛋白、纤维蛋白原和颈动脉内膜中层厚度。并计算胰岛素抵抗指数和体质量指数。血浆胰岛素采用双相、双步时间依赖性荧光免疫法测定。高敏C反应蛋白运用比浊法检测。纤维蛋白原运用CA-1500全自动血栓/止血测定系统枸橼酸抗凝血浆检测。颈动脉内膜中层厚度应用高分辨B-型超声仪测定。③各组间比较应用方差分析,组内治疗前后比较应用HotellingT2检验。应用Pearsson相关分析和多元线性回归分析影响颈动脉内膜中层厚度的因素。结果:实验过程中无因肝肾功能改变以及药物不耐受而退出试验者,24例均进入结果分析。①对照组治疗3和6个月后空腹血糖,糖化血红蛋白,三酰甘油水平明显低于治疗前(P<0.01),其余指标无显著改变。罗格列酮治疗组在治疗3和6个月后空腹血糖、糖化血红蛋白、胰岛素抵抗指数、三酰甘油、纤维蛋白原,C反应蛋白和颈动脉内膜中层厚度明显低于治疗前(P<0.05～0.01);罗格列酮治疗组治疗后空腹胰岛素下降,但治疗6个月时才明显低于治疗前和对照组(P<0.01);罗格列酮治疗组治疗6个月后空腹胰岛素明显低于治疗3个月后(P<0.01),罗格列酮4mg/d治疗组治疗6个月后胰岛素抵抗指数较治疗3个月后明显减少(P<0.05),其余指标于治疗3和6个月后差异不明显。②反应亚组和非反应亚组治疗3和6个月后胰岛素抵抗指数、三酰甘油、纤维蛋白原、C反应蛋白、颈动脉内膜中层厚度均明显低于治疗前(P<0.01),且除胰岛素抵抗指数外上述各项二亚组间差异不明显。反应亚组治疗3和6个月后空腹血糖、糖化血红蛋白、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数、三酰甘油、纤维蛋白原、C反应蛋白、颈动脉内膜中层厚度均较低于治疗前(P<0.01),空腹血糖、糖化血红蛋白明显低于非反应亚组(P<0.05～0.01),反应亚组治疗6个月后空腹胰岛素和胰岛素抵抗指数明显低于非反应亚组和治疗3个月后(P<0.05～0.01)。反应亚组治疗6个月后低密度脂蛋白胆固醇水平明显高于非反应亚组和治疗前(P<0.05,0.01)。③Pearson相关分析表明,颈动脉内膜中层厚度的变化只与C反应蛋白的变化呈显著正相关(r=0.298,P<0.05),而与糖化血红蛋白、胰岛素抵抗指数等指标改变不相关(r=-0.018,-0.218,P>0.05)。多元线性回归分析也显示颈动脉内膜中层厚度只与C反应蛋白相关(回归系数b=0.435,P<0.05),而与糖脂代谢指标无关。结论:罗格列酮的抗动脉粥样硬化作用主要依赖于其降糖外作用,并可能与抗炎作用有关,此作用无剂量和时间依赖性。     

阿尔茨海默病海马细胞胰岛素受体和胰岛素样生长因子Ⅰ受体的异常表达

目的 探讨阿尔茨海默病(AD)和2型糖尿病(T2DM)的病理联系,从受体水平探讨AD是否存在和T2DM类似的抵抗机制.方法 用梯度浓度的淀粉样蛋白(Aβ1-42)处理体外培养的海马神经细胞,制作AD细胞模型,用流式细胞法检验成模,使用RT-PCR法和Western印迹法检测胰岛素受体(InsR)和胰岛素样生长因子Ⅰ受体(IGF-ⅠR)基因水平和蛋白水平的表达,对比AD细胞和正常细胞受体表达的变化.结果 经流式细胞术筛选,当Aβ1-42浓度≥30 μmol/L时,细胞较对照组出现明显凋亡,可以模拟AD病理状态.在各浓度梯度组,Aβ1-42 30和60 μmol/L组的InsR和IGF-ⅠR表达在基因和蛋白水平均较对照组升高(P＜0.01);在Aβ1-42 100 μmol/L组,两者均较对照组下降(P＜0.05).两受体变化趋向一致.结论 AD脑中可能存在着对胰岛素和胰岛素样生长因子Ⅰ的抵抗,与T2DM共享相同的发病机制.     

急性脑梗死患者高迁移率族蛋白B1和过氧化小体增殖剂激活型受体βmRNA的表达

目的研究急性脑梗死患者血清高迁移率族蛋白B1（HMGBI）与外周血淋巴细胞过氧化小体增殖刹激活型受体γ（PPARγ）mRNA表达的变化,及二者与脑梗死体积的相天性、方法连续收集2010年7月-12月哈尔滨医科大学附属第二医院老年病科及神经内科就诊的发病3d以内的急性脑梗死患者72例及对照人群70例。用ELISA法测定两组患者血清中HMGB1,用实时RT—PCR法测定两组患者空腹周围血淋巴细胞PPAR3,mRNA的表达情况。根据脑梗死患者发病后48～72hCT检查结果,计算脑梗死体积。结果①梗死组患者PPARγmRNA表达水平（0．54±0．37）低于对照组（1．98±0．35）,血清HMGB1水平（12．7-4-6．1）μg／L高于对照组（2．2±0．8）μg/L,差异有统计学意义,P〈0．01。②脑梗死患者周围m淋巴细胞PPARγmRNA表达水平与血清HMGB1水平呈负相关,r=-0．843,P〈0．01。③经相关性分析,脑梗死患者PPARγmRNA表达水平与脑梗死体积呈负相关,r=-0．886,P〈0．01;脑梗死患者HMGBI水平和脑梗化体积呈正相关,r=0．847,P〈0．01。结论在脑梗死急性期,PPA脚和IHMGB1均参与脑缺血炎性反应,HMGBI及PPARγ即mRNA表达水平可反映急性脑梗死患者梗死体积的大小。     

饮酒对老年慢性病的影响

近年我国老龄化进程加快,老年人成为了慢性病人群的主体,生活方式与慢性病密切关联。饮酒是老年人生活中的普遍现象,饮用不同种类和不同量的酒会对身体产生不同的影响。同时,不良饮酒习惯对老年人某些慢性疾病的成因和发展也有影响,恰当的饮酒量可改善某些疾病的发生与发展。本文就两者之间的关系做一综述。     

Rottlerin通过抑制PKCδ磷酸化减轻6羟基多巴胺对多巴胺能细胞的毒性作用

目的观察蛋白激酶C6亚型（PKCδ）磷酸化在6羟基多巴胺（6-OHDA）引起的多巴胺能神经细胞死亡过程中的作用,探讨帕金森病中神经元缺失的分子机制。方法体外培养大鼠嗜铬细胞瘤细胞系PC12细胞,观察预先加入的PKC抑制剂（bisindolylmaleimide I,Go6976及Rottlerin）和激动剂佛波酯对6-OHDA毒性作用的影响,噻唑蓝比色法检测细胞存活率,免疫印迹法观察磷酸化PKC8的表达。结果PKC8抑制剂Rottlerin（2μmol／L）可抑制PKC8的磷酸化,减轻6-OHDA引起的细胞死亡,细胞存活率上升至69．6±2．63％（P〈0．05）。PKCα抑制剂bisindolylmaleimide I和钙依赖性PKC抑制剂Go6976对6-OHDA的毒性作用及PKCδ磷酸化均无显著影响,而PKC8激活剂佛波酯（100nmol／L）能提高PKC8磷酸化水平,加重6-OHDA的损害作用,使细胞存活率下降至单用6-OHDA组水平的49．8±5．06％（P〈0．001）。结论Rottlerin能抑制PKCδ的磷酸化,进而减轻6-OHDA对多巴胺能神经细胞死亡的诱导作用,说明PKCδ505位点丝氨酸的磷酸化是6-OHDA发挥毒性作用的关键,提示PKCδ在帕金森病病人神经元缺失中起重要作用。     

硫氧还蛋白对病毒性心肌炎小鼠心肌细胞保护的抗氧化机制

目的 探讨硫氧还蛋白保护病毒性心肌炎的抗氧化作用及其调节转录因子的作用.方法 选用Balb/C小鼠24只,随机分为3组:对照组、硫氧还蛋白(TRX)保护组、病毒感染组.病毒感染组、TRX保护组给予腹腔注射1000TCID50柯萨奇B3病毒(CVB3)0.1 ml,TRX保护组同时给予尾静脉注射rhTRX(2 mg/kg),而病毒感染组同时给予生理盐水作对照.14 d后处死动物,光镜下观察心肌病理形态学变化;用免疫组化法检测心肌组织NF-κB的含量,同时检测血清过氧化脂质(LPO) 含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.结果 光镜下可见病毒感染组小鼠出现局灶性心肌坏死和炎细胞浸润,对照组和TRX保护组心肌细胞未见异常.病毒组小鼠血清中丙二醛(MDA)含量与对照组相比明显增高,差异有统计学意义(P<0.01),保护组与病毒组相比MDA 含量明显下降(P<0.01);血清GSH-Px活性与对照组比较明显下降(P<0.01),而TRX保护组与病毒组比较则明显升高(P<0.01).病毒组心肌组织中NF-κB的表达与对照组相比明显增高,而保护组心肌组织中NF-κB的表达与病毒组相比明显下降(P<0.01).结论 重组人硫氧还蛋白能够减轻心肌细胞的损伤,其机制与清除自由基、提高谷胱甘肽过氧化物酶活性以及调节转录因子的表达密切相关.     

老年冠心病患者再发心肌梗塞和猝死的危险因素分析

随访连续住院的３０６例老年冠心病患者１年～６年，观察增龄、性别、饮酒、饮茶、吸烟、肥胖、高血压、糖尿病、无痛性心肌缺血、左室肥厚、复杂室性心律失常、血脂增高、遗传史等因素对再发急性心肌梗塞或心源性猝死的影响．经Ｃｏｘ多因素分析提示合并高血压、血清总胆固醇与高密度脂蛋白胆固醇比值≥４．３、无痛性心肌缺血和复杂室性心律失常是促使再发的重要因素。