溪黄草对肝癌HepG2细胞基因表达谱的影响

目的 采用表达谱芯片研究溪黄草水提取物对人肝癌细胞HepG2相关基因的影响,探讨溪黄草水提取物对肝癌作用的可能机制.方法 体外培养人肝癌细胞HepG2,加入溪黄草水提取物(9.54 mg/mL)作用24 h后,表达谱芯片检测溪黄草作用后HepG2基因的改变,并用RT-PCR和Western blot验证芯片的结果.结果 相差显微镜下观察,发现与阴性对照组相比,溪黄草水提取物作用后HepG2细胞数量明显减少.表达谱芯片结果显示,溪黄草水提取物(9.54 mg/mL)作用24 h后264个基因比阴性对照组上升2倍以上,194个基因比阴性对照组下降2倍以上.基因本体(GO)和KEGG分析表明溪黄草可上调HepG2细胞DUSPs、IGFBPs家族多个基因,下调MCMs家族多个基因.RT-PCR检测发现与阴性对照组相比,溪黄草处理组DUSP1和IGFBP1升高,FXR和ALDH8A1下降(P＜0.01),与表达谱芯片结果一致.Western blot结果发现溪黄草处理组DUSP1蛋白表达也显著高于阴性对照组(P＜0.01).结论 表达谱芯片研究表明溪黄草可通过调控多种基因而抑制肝癌细胞增殖.     

罗汉果甜苷对肝纤维化大鼠肝组织病理学和细胞的影响

摘要：目的研究罗汉果甜苷对复合因素所致肝纤维化病理组织改变及肝脏主要细胞肝细胞和肝星状细胞的影响。方法通过给予大鼠高脂、乙醇和四氯化碳三种因素建立复合因素所致肝纤维化模型,观察罗汉果甜苷对肝纤维化大鼠肝脏病理组织学、肝星状细胞活化标志a～平滑肌肌动蛋白（a—smoothmuscleactin,a—SMA）表达和肝细胞凋亡的影响。结果不同剂量罗汉果甜苷对肝组织纤维化病变有一定程度的改善作用,可抑制肝脏a—SMA表达,减少肝细胞凋亡的作用。结论罗汉果甜苷对肝纤维化大鼠肝星状细胞活化和肝细胞凋亡有一定的抑制作用,可能为其抗纤维化的机制之一。     

吲哚-3-原醇对乙醛所致精密肝切片中星状细胞活化的影响

目的利用精密肝切片(PCLS)技术,研究吲哚-3-原醇(I3C)对乙醛活化肝星状细胞(HSCs)的作用及其机制。方法将200～800μmol.L-1的I3C及700μmol.L-1乙醛与PCLS共同孵育6h,免疫组化法分析肝切片中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,并检测培养液中谷胱甘肽S-转移酶(GST)和乳酸脱氢酶(LDH)活性、转化生长因子-β1(TGF-β1)含量、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)表达量及组织丙二醛(MDA)和羟脯氨酸(Hyp)含量。结果200～800μmol.L-1I3C可不同程度的减少乙醛激活的HSCs,并可明显降低乙醛升高的培养液中GST、LDH活性和肝组织中MDA和Hyp含量(P<0.05或P<0.01),呈良好的浓度依赖性。I3C给药组与乙醛对照组比较,培养液中TGF-β1含量降低(P<0.01),MMP-1/TIMP-1蛋白表达比值升高(P<0.01)。结论I3C能有效拮抗乙醛所致的HSCs活化,其机制与降低细胞氧化应激和促进基质胶原降解有关。     

大鼠肝星状细胞中多种细胞色素P450亚型的表达

目的采用改良的肝星状细胞(HSCs)体外分离和纯化技术,观察刚分离的大鼠HSCs中细胞色素P450(CYP450)亚型的表达,初步探讨CYP450同工酶在HSCs生理功能和激活中的作用。方法采用链霉蛋白酶/胶原酶序贯灌流和Nycodenz密度梯度离心方法,分离和纯化大鼠HSCs,半定量RT-PCR法检测HSCs和肝细胞内多种与视黄醇代谢相关的CYP450亚型mRNA的表达。结果HSCs的得率为每肝(0.8～1.2)×107。刚分离的大鼠HSCs中均能检测到CYP1A1,CYP1B1,CYP2B1/2和CYP2E1mRNA表达,其中,HSCs中CYP1A1mRNA及CYP1B1mRNA表达量接近甚至高于同一个体肝细胞中的表达水平。但CYP3A1mRNA未检测到。结论刚分离的大鼠HSCs可较高水平地表达多种与视黄醇代谢相关CYP450亚型,提示HSCs中CYP450亚型可能参与了HSCs的生理功能调节和激活过程。     

儿茶酚-O-甲基转移酶基因Val158Met多态性与乳腺癌易感性关系研究

目的研究儿茶酚-O-甲基转移酶(COMT)基因Val158Met多态性与乳腺癌易感性的关系。方法用人工修饰双等位基因特异性引物结合SYBR Green I荧光聚合酶链式反应法对96例乳腺癌患者(试验组)和116例健康志愿者(对照组)进行COMT Val158Met基因分型,分析2组各基因型和等位基因分布频率的差异。结果试验组和对照组的COMT Val158Met G等位基因分别为65.10%和71.98%,A等位基因分别为34.90%和28.02%,差异均无统计学意义(均P>0.05)。试验组和对照组的COMT Val158Met G/G野生纯合子基因型分布频率分别为38.54%和54.31%,A/G杂合子基因型分布频率分别为53.13%和35.34%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。试验组和对照组的A/A突变纯合子基因型分布频率分别为8.33%和10.35%,差异无统计学意义(P>0.05)。相对于G/G基因型,试验组A/G基因型增加患乳腺癌风险(风险度为2.118,95%CI为1.189~3.744)。结论 COMT Val158Met基因多态性可能与乳腺癌易感性有关。     

瑶药紫九牛醇提物急性毒性及其对乙醇所致急性肝损伤的影响

目的在系统检测瑶药紫九牛醇提物对小鼠的急性毒性和其主要成分之一总蒽醌含量的基础上,进一步观察其对乙醇所致小鼠急性肝损伤的影响,为紫九牛在肝病应用中的安全性和有效性提供依据。方法采用超声结合乙醇回流方法制备紫九牛提取物,以最大浓度和最大给药体积给药,观察其急性毒性大小。建立乙醇所致小鼠急性肝损伤模型,观察紫九牛提取物对肝损伤小鼠肝功能指标、抗氧化指标和组织学的影响。结果急性毒性试验发现小鼠对紫九牛醇提物的最大耐受量为(生药)240g/kg,为人常规用量(0.25⁰.5g/kg)的4800.5g/kg)的480⁹60倍。分光光度法检测发现紫九牛乙醇提取物总蒽醌含量为0.085%。紫九牛(生药)16.7g/(kg·d)连续灌胃给药7d能降低乙醇所致小鼠血清谷丙转氨酶的升高,提高肝脏过氧化氢酶和总抗氧化能力,且可明显减轻肝组织病理改变。结论本研究结果提示紫九牛醇提物毒性低,对乙醇肝损伤有防治作用,其机制与增强肝脏抗氧化功能有关。其总蒽醌是否参与肝保护作用尚需进一步研究。     

正常及肾损伤肝肾抗氧化功能的联系：从氧化应激角度探讨“肝肾同源”

目的：观察正常及肾损伤状态下肝肾抗氧化酶系统,以探讨肝肾抗氧化功能之间的内在联系,从氧化应激角度探讨“肝肾同源’。方法：50%甘油肌内注射建立大鼠急性肾小管损伤模型,测定正常及损伤大鼠肝脏和肾脏抗氧化酶系统的活性变化。结果：在急性肾损伤的不同时期（给药6 h和56 h）,除GSH-Px外肾脏其他抗氧化酶均明显下降。与对照组相比,甘油处理6 h和56 h后肝脏GST、GSH-Re和SOD同样也下降,但GSH、GSH-Px和CAT则代偿性增强。相关分析表明,肝和肾CAT、GSH-Re、SOD和GST之间相关系数为-0.802（P<0.01）、0.601（P<0.05）、0.563（P<0.05）和0.667（P<0.05）。结论：肾损伤时肾脏抗氧化功能的降低的同时肝脏抗氧化功能也发生改变,且肝肾部分抗氧化酶存在明显的正或负相关,提示肝肾生理病理功能存在某种内在联系。     

广西部分壮族妇女CYP1B1基因Ala119Ser多态性与乳腺癌易感性研究

目的探讨CYP1B1基因Ala119Ser与乳腺癌易感性的关联性。方法采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)技术对88例广西壮族女性乳腺癌患者和106例健康对照者进行CYP1B1 Ala119Ser基因分型,并分析其与乳腺癌患病的关系。结果病例组CYP1B1 Ala119Ser T等位基因分布频率(30.7%)明显高于对照组(19.3%),差异有统计学意义(P<0.05)。病例组3种基因型(GG、GT、TT)分布频率与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);病例组CYP1B1 Ala119Ser突变型纯合子(TT)的分布频率为10.2%,明显高于对照组(2.8%);与野生型纯合子(GG)相比,病例组TT基因型能增加乳腺癌患病风险(OR=4.74,95%CI为1.22~18.51)。结论 CYP1B1 Ala119Ser突变可能增加广西壮族妇女乳腺癌易感性。     

类端粒沉默干扰体1在心血管疾病中的研究进展

[摘要] 类端粒沉默干扰体1（disruptor of telomeric silencing 1-like,DOT1L）属组蛋白H3K79甲基转移酶,其参与基因转录的表观遗传调控。研究表明,DOT1L参与调控心脏细胞的生长和分化,并影响心力衰竭发展进程,其表达抑制可延缓动脉粥样硬化发展进程。本文综述DOT1L与心肌梗死、动脉粥样硬化、高血压、心力衰竭等心血管疾病相关性的最新研究进展,以期为上述疾病的临床诊治提供新思路。