金属基质蛋白酶及其抑制因子2与宫颈癌临床分期的关系及意义

目的：探讨宫颈癌细胞金属基质蛋白酶2（MMP2）及其抑制因子2（TIMP2）的表达情况与临床分期的关系及意义。方法：采用免疫组化检测79例宫颈癌组织中MMP2与TIMP2的基因表达情况。收集各病例的临床病理学资料。分析MMP2及TIMP2表达与宫颈癌临床分期的关系。结果：MMP2、TIMP2在宫颈癌Ⅰb、Ⅱa、Ⅱb、≥Ⅲ期的阳性表达率分别为：78％，85％；75％，67％；69％，56％；75％，75％。MMP2的阳性表达与临床分期无关（P〉0.05）；TIMP2的表达在Ⅰb期与Ⅱa期宫颈浸润癌组织中的差异无统计学意义（P〉0．05）。而Ib期TIMP2的阳性表达率与Ⅱb期的差异有统计学意义（x2=4．02，P〈0．05）。结论：TIMP2的阳性表达与临床期别有关     

血红蛋白H病一例报告及文献复习

血红蛋白H病是危害严重的遗传性血液病，有些血红蛋白H病患者可以渡过一生而无明显不适，而另一些患者则病情相当严重，终身需输血治疗。有文献报道，血红蛋白H病患儿在宫内，可因严重贫血而出现致命的胎儿水肿综合征。现报道我院血红蛋白H病胎儿1例，并结合文献分析如下。     

脆性X 染色体综合征快速筛查的聚合酶链反应技术

目的 建立一种简便的筛查脆性X综合征的聚合酶链反应(PCR)方法。方法提取76例原因不明的智力低下男性患儿外周血DNA，用PCR扩增FMR1基因的三核苷酸重复序列。结果96．1％(73／76)的标本PCR反应出现产物，条带大小为400～500bp，相当于三核苷酸重复次数20～30；3．9％(3／76)PCR反应无产物，其中2例被证实为脆性X综合征患者。结论该方法简便、快速、价廉，可用于高危人群的快速筛查。     

HLA-DRB1高分辨测序分型与48例非亲缘性脐血移植者GVHD相关性分析

1998年6月至2003年7月，广州脐血库向国内21家移植中心提供非亲缘异基因脐血移植54例。本研究采用PCR产物直接测序法对HLA—DRB1进行高分辨分型（PCR—sequencing based typingPCR—SBT），并结合HLA—SSP低分辨分型结果，探讨非亲缘性脐血移植供／受者HLA—DRB1等位基因及其亚型与脐血移植GVHD发生率的关系。利用盐析或柱提法提取48例非亲缘性脐血及移植患者全血DNA，采用HLA—SBT方法分别对HLA—DRB1等位基因进行高分辨分型，并与HLA—SSP（HLA—sequencing specific primers）低分辨结果进行比较分析。结果表明：采用双盲法对48例非亲缘性脐血移植供／受者样本HLA—DRB1进行高分辨分型，结果HLA—DRB1等位基因亚型匹配全相合病例的GVHD发生率（25％）显著低于不完全相合病例的GVHD发生率（65．6％）（P=0．008）。结论：对HLA—DRB1采用高分辨分型方法在非亲缘性脐血移植HLA分型方面具有重要的临床应用价值。     

人骨髓间充质干细胞分离鉴定方法的改进

本研究的目的是建立一种基于临床移植需要的分离、培养、鉴定人骨髓间充质干细胞（mesenchymal stemcells,MSC）的方法,为配合造血干细胞移植的临床应用提供实验基础.采用Percoll分离液（1.073/gml）从新鲜成人骨髓穿刺液中分离MSC,应用贴壁筛选法传代培养,流式细胞仪检测细胞表面抗原,成骨诱导体系（地塞米松0.1 μmol/L、β-甘油磷酸钠10 mmol/L、抗坏血酸磷酸盐50μmol/L）及脂肪诱导体系（地塞米松1μmol/L、牛胰岛素5 mg/L、1-甲基-3-异丁基-黄嘌呤0.5 mmol/L、消炎痛60μmol/L）分别诱导MSC定向分化,通过细胞形态观察及免疫化学染色进行鉴定.结果表明：从成人骨髓液中分离培养出MSC,稳定表达CD73、CD105、CD166,不表达CD34、CD45.定向诱导的成骨细胞表达碱性磷酸酶活性,脂肪细胞内出现明显的脂滴.结论：采用密度梯度离心联合贴壁筛选法并通过流式细胞术检测及定向诱导分化,能够从成人骨髓液中分离出MSC,并完成细胞表型及多向分化潜能的初步鉴定.本操作方案具有一定的临床应用价值.     

流式细胞术分析冻存前后脐血CD34+细胞的分布

目的探讨低温冻存对脐血CD34+细胞的影响.方法采用流式细胞仪分析冻存前后脐血CD34+细胞百分率、CD45+细胞和CD34+细胞的荧光强度变化及死细胞群的分布情况.结果冻存后CD34+细胞占CD45+细胞的百分率[(0.84±0.39)%]明显高于冷冻前[(0.51±0.24)%](P<0.01),冻存前后CD34+细胞绝对数无明显变化[(9.372±6.072) ×106/L和(9.246±6.132)×106/L](P>0.05),冻存前后CD34+细胞百分率呈正直线相关(r=0.564, P<0.01).冻存后CD45+细胞荧光强度减弱(P<0.01),CD34+细胞荧光强度无明显变化(P>0.05);中性粒细胞比例下降,淋巴细胞和单核细胞比例增高.死细胞组分中以中性粒细胞为主,占81.52%;活细胞组分中以淋巴细胞为主,占59.44%.结论冻存后CD34+细胞占CD45+细胞的百分率增高,但低温冻存对CD34+细胞绝对数量影响不大.死细胞主要为较成熟的粒细胞,冻存后CD34+细胞的分析需排除死细胞的干扰.     

采用辅助生殖技术后出生儿安全性探讨

目的探讨辅助生殖技术后出生儿的安全性以及畸形、死亡等原因。方法回顾分析我院2001年1月至2004年12月经体外受精(IVF)、卵胞浆内单精子注射(ICSI)后妊娠分娩的101例新生儿(观察组)与同期本院自然妊娠分娩的4,435例新生儿(对照组)比较。结果观察组新生儿的早产、低体重儿、多胎妊娠率均明显高于对照组,新生儿畸形和死亡率两组相似,产前诊断可以早期诊断治疗胎儿宫内发育异常。结论经辅助生殖技术出生儿多胎妊娠及围产儿并发症多,优生优育指导,必要的产前诊断及筛查,积极的干预有利于改善新生儿的预后及生活质量。     

二甲基亚砜和右旋糖酐应用于脐血造血细胞的低温保存

探讨液氮保存中联合低温保护剂（二甲基亚砜和右旋糖酐）对造血细胞的保护作用和不同冻存时间对造血细胞活力的影响。同时分析脐血全血４℃保存造血细胞的变化。通过测定冻存前后前后有核细胞数（ＴＮＣ）、细胞活率、造订落生成情况。反映冻存后造员失情况及增成情况，反映冻存后造血细胞损失情况及增殖能力。结果显示４０例脐血冻存后细胞活率平均为９１．５％，ＴＮＣ、ＣＦＵ－ＧＭ、ＢＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－ＧＥＭＭ平均回收率为９     

雄激素改善小鼠实验性自身免疫性卵巢早衰

目的 探讨雄激素对自身免疫性卵巢早衰的影响。方法 50只小鼠随机分为空白组、早晚治疗组及对应模型组，治疗及模型组注射小鼠透明带多肽建立卵巢早衰模型。早晚治疗组分别于免疫第15、20天起腹腔注射丙酸睾酮共15d。以阴道脱落细胞涂片、血抗透明带抗体浓度、卵巢中淋巴细胞浸润及成熟卵泡比例作为观察指标。结果 对于性周期改变、血抗透明带抗体浓度、卵巢淋巴细胞浸润程度，模型组显著高于空白组，早治疗组显著低于模型组；血抗透明带抗体浓度早治疗组显著低于晚治疗组。对于卵巢成熟卵泡比例，模型组显著低于空白组，早治疗组显著高于模型组及晚治疗组。结论 雄激素能显著改善小鼠自身免疫性卵巢早衰，早期治疗效果明显优于晚期。     

三种不同方法分离脐血造血细胞的比较

脐血作为一种造血干细胞来源可替代骨髓进行造血干细胞移植，脐血移植在治疗儿童遗传性疾病和血液病方面取得了巨大的成效。为进一步推广脐血移植，必须相应地建立起完备的脐血库。脐血库不同于骨髓库，它必须冻存实物。为减少冻存体积，降低成本，需要采取有效的方法分离...