高分辨熔解曲线分析技术检测α-地中海贫血常见三种点突变

α-地中海贫血(简称α-地贫)是由于α珠蛋白基因缺失(缺失型)或点突变(非缺失型)导致α珠蛋白肽链合成减少或完全不合成而引起的一种溶血性贫血,呈常染色体隐性遗传.我国长江以南为高发区,其中广西、广东和海南发病率最高.最新的广东省大样本分子流行病学调查显示,α-地贫携带者频率约为8.53％[1].我国最常见的3种缺失型突变为--SEA、-α 3.7和-α4.2,最常见的3种非缺失型突变为Hb Constant Spring (Hb CS)、Hb Quong Sze (Hb QS)和Hb Westmead( Hb WS).这3种点突变都位于α2珠蛋白基因第3外显子,由于α2珠蛋白基因比α1珠蛋白基因在珠蛋白合成中具有更重要的功能,因此非缺失型α-地贫突变所引起的功能缺陷往往比缺失型更为严重[2].特别是当合并α0-地贫(即--SEA)时,非缺失型Hb H病的临床表现往往重于缺失型Hb H病[2].因此,在临床实践中,对非缺失型α-地贫的明确诊断亦十分重要.     

羊水穿刺449例染色体检测指征及结果分析

目的 分析产前诊断的孕妇羊水细咆染色体核型，探讨羊膜腔穿刺术的指征对产前诊断胎儿染色体病的意义。方法 对449例有产前诊断指征的孕妇于孕中晚期在B超介导下行羊膜腔穿刺术，取羊水常规细胞培养和染色体镧备，并对核型结果进行分析。结果 在B超介导下行羊膜腔穿刺术，均获得一次性穿刺成功。术后随访仅1例有术后少量阴道出血，无一倒胎儿丢失。羊水细胞培养成功并进行核型分析的为427例，培养成功率为95．1％。染色体分析核型正常433例(916．5％)，核型变异2例(0．4％)，核型异常14例(3．1％)。在产前诊断指征中，高龄孕妇异常核型检出率5．6％(9／160)，其中21三体综合征6倒，18三体1例，1例为Kinefelter综合征，1例为罗伯逊易位；唐氏风险高孕妇21三体综合征检出率2．9％(5／171)；夫妇一方染色体异常8例，检出异常核型1例，占12．5％；不良生育史19例，仅1例检出为罗伯逊易位，后查其母亲核型亦为同一种易位类型，未见其他异常核型。结论 羊水穿刺术是一种安全、可靠的产前诊断方法，应对有产前诊断指征的孕妇大力推广。高龄、唐氏风险高、夫妇一方染色体异常是产前诊断最主要的指征，三体综合征仍为孕期主要的异常核型。对于曾育不明原因智低、聋哑儿等不良生育史的病例，并非都与染色体有关，对于这类指征应慎重。     

广州脐血库3种HLA等位基因频率分布规律分析

目的：以HLA高分辨测序分型技术为平台,调查广州脐血库HLA-Cw、DPB1、DQB1等位基因的多态性及HLA等位基因分布规律,建立相应的基因遗传数据分析资料,并为临床移植提供必要的HLA分型数据。方法：采用基于测序的PCR技术（sequencing based type SBT）,对广州脐血库128份脐血进行HLA-Cw、DPB1、DQB1等位基因测序分型。结果：HLA-Cw共检出20个等位基因型,其中HLA-Cw＊0102基因频率最高,达22．70％;HLA-DQB1共检出16种等位基因型,其中HLA-DQB1＊0301基因频率最高,达24．20％;HLA-DPB1共检出20种等位基因型,其中HLA-DPB1＊0501基因频率最高,达41．0％。统计分析表明Cw、DPB1、DQB1位点的基因分布符合Hardy-weinburg平衡（P=0．081,0．156和0．079,均〉0．05）。结论：统计数据显示HLA-Cw、DPB1、DQB1位点处于遗传平衡状态,具有较丰富多态性。广州脐血库HLA-Cw及HLA-DQB1等位基因分布与中国北方人群差异无统计学意义,而HLA-DPB1等位基因分布与中国北方人群差异有统计学意义。     

抑制素A水平与中孕期筛查标志物及影响因素的相关性分析

目的评估中孕期母亲血清中抑制素A水平与其它血清标志物和影响因素的相关性。方法选择2008年3月-2010年12月在广州市妇女儿童医疗中心接受中孕期＂三联＂唐氏筛查的单胎妊娠孕妇共2802例。采用全自动酶联免疫化学发光分析法检测血清中抑制素A水平。结果 （1）在正常妊娠孕妇血清样本,抑制素A与中孕期血清标志物freeβ-hCG、AFP相关且有统计学意义（P〈0.01）,尤其与freeβ-hCG的相关性最高（r=0.502）,而与uE3相关性没有统计学意义（P〉0.05）;在胎儿唐氏综合征孕妇血清样本,抑制素A与freeβ-hCG、AFP和uE3的相关性均没有统计学意义（P〉0.05）。（2）135例阴道流血和40例糖尿病孕妇血清中抑制素A水平与无合并症的孕妇没有差异（P均〉0.05）。孕期母亲体重与血清中抑制素A水平呈负相关（r=-0.101）,并有统计学意义（P〈0.01）。男性胎儿孕妇血清中抑制素A水平低于女性胎儿孕妇并有统计学意义（P〈0.01）。结论血清中抑制素A水平与中孕期标志物freeβ-hCG的相关性最高,与母亲体重呈负相关性,且与胎儿性别相关,但不受孕期母亲阴道流血或糖尿病的影响。     

早孕期胎儿颈项透明层增厚与不良妊娠结局关系的研究

颈项透明层（nuchal translucency,NT）是指在早孕期利用超声观察到的胎儿颈后部的无回声层。国外研究已表明NT增厚与染色体异常、心脏畸形等结构异常有关。国内对NT各文献报道较少。本文回顾我院1652例单胎NT厚度数据,探讨NT增厚与不良妊娠结局之间的关系,为进一步产前筛查、诊断提供参考。     

采用辅助生殖技术后出生儿安全性探讨

目的探讨辅助生殖技术后出生儿的安全性以及畸形、死亡等原因。方法回顾分析我院2001年1月至2004年12月经体外受精(IVF)、卵胞浆内单精子注射(ICSI)后妊娠分娩的101例新生儿(观察组)与同期本院自然妊娠分娩的4,435例新生儿(对照组)比较。结果观察组新生儿的早产、低体重儿、多胎妊娠率均明显高于对照组,新生儿畸形和死亡率两组相似,产前诊断可以早期诊断治疗胎儿宫内发育异常。结论经辅助生殖技术出生儿多胎妊娠及围产儿并发症多,优生优育指导,必要的产前诊断及筛查,积极的干预有利于改善新生儿的预后及生活质量。     

应用微阵列比较基因组杂交技术产前诊断DiGeorge综合征一例

胎儿孕25+周,B超提示宫内生长发育受限,心脏室间隔缺损(图1),主动脉转位,合并羊水过多.父母非近亲结婚,孕期无不良因素接触史,无家族病史.     

孕妇弓形体IgM抗体检测及其临床意义

材料与方法 收集早孕妇女血标本416份,分离血清,同荷兰阿克苏公司弓形体IgM试剂盒(酶联免疫吸附试验)包括阳性对照,阴性对照标准血清,进行弓形体IgM测定,按试剂盒上说明进行操作及有效标准进行判断、对检出IgM阳性的孕妇均用上海第二医科大学弓形体PCR试剂盒再次进行DNA检测,所有阳性孕妇均在孕21～24周抽取胎儿脐静脉血查胎儿弓形体IgM,所有孕妇均观察至妊娠结束,对阳性孕妇均给予螺旋霉素及磺胺嘧啶治疗。     

脆性X 染色体综合征快速筛查的聚合酶链反应技术

目的 建立一种简便的筛查脆性X综合征的聚合酶链反应(PCR)方法。方法提取76例原因不明的智力低下男性患儿外周血DNA，用PCR扩增FMR1基因的三核苷酸重复序列。结果96．1％(73／76)的标本PCR反应出现产物，条带大小为400～500bp，相当于三核苷酸重复次数20～30；3．9％(3／76)PCR反应无产物，其中2例被证实为脆性X综合征患者。结论该方法简便、快速、价廉，可用于高危人群的快速筛查。     

三种不同方法分离脐血造血细胞的比较

脐血作为一种造血干细胞来源可替代骨髓进行造血干细胞移植,脐血移植在治疗儿童遗传性疾病和血液病方面取得了巨大的成效。为进一步推广脐血移植,必须相应地建立起完备的脐血库。脐血库不同于骨髓库,它必须冻存实物。为减少冻存体积,降低成本,需要采取有效的方法分离...