冷冻对脐血CD_(34)~+细胞上粘附分子表达的影响

目的　通过了解冷冻后脐血CD3 4 + 细胞上粘附分子表达的变化 ,评价脐血的冻存和不同输注脐血的方法对脐血移植造血恢复可能造成的影响。方法　取 15份经羟乙基淀粉分离的脐血各 2ml,保存在液氮中 6～ 8月后 ,检测新鲜标本、冻存标本复温后及短暂孵育后白细胞和CD3 4 + 细胞的变化 ,以及CD3 4 + 细胞表达CD62 L、CD2 9、CD49d、CD11b、CD44和CXCR4情况的变化。结果　冻存前后白细胞和CD3 4 + 细胞含量无明显变化。而CD62 L和CXCR4表达量在冻存后明显减少 (分别由 3.2 2 8× 10 4和 2 .931× 10 4下降到 2 .2 2 0× 10 4和 1.2 87× 10 4,P <0 .0 5 ) ,其他粘附分子无明显变化。在 37℃孵育 30min后 ,CD62 L和CXCR4表达量又快速地恢复。结论　冻存对造血细胞的数量无明显影响 ,对粘附分子表达的影响也是一过性的 ,尚未观察到对移植患者的造血恢复有明显影响。由于复苏后CD3 4 + 细胞的CD62 L和CXCR4表达有明显的波动 ,在脐血移植时 ,将脐血洗去冷冻保护液并短暂孵育后再输注比复苏后不经任何处理直接输注 ,可能更有利于患者的造血恢复。     

间充质干细胞分化的内皮细胞有免疫调控作用

为了探讨间充质干细胞（mesenchymal stem cell，MSC）诱导而来的内皮细胞的免疫调控能力，将人骨髓MSC在体外经VEGF诱导分化为内皮细胞，并用倒置相差显微镜和流式细胞术分别观察和检测细胞的形态和免疫表型，用淋巴细胞转化实验观察其免疫调控能力。结果表明：MSC在向内皮细胞分化的体系中生长迅速，诱导后的细胞经von Willebrand factor（vWF）免疫荧光染色呈阳性，能在Matrigel上形成毛细血管样网状结构。细胞表面标记无明显改变，即CD73、CD105、HLA—ABC仍阳性，CD34、CD80、CD86、HLA—DR、CD31仍为阴性。由MSC诱导分化而来的内皮细胞能抑制T淋巴细胞的增殖，其抑制作用随内皮细胞加入量的增多而增强。结论：由骨髓MSC来源的内皮细胞对T淋巴细胞具有调控作用。     

一例X连锁先天性无丙种球蛋白血症家系报告及产前诊断

目的确定一个X连锁先天性无丙种球蛋白血症(X-linked agammaglobulinemia,XLA)家系BTK基因的突变类型,探讨对XLA的基因诊断及治疗。方法以1例临床拟诊断为XLA的兄妹及家系成员共21人为研究对象(包括1名患儿已死亡,以及2名胎儿),对18名家庭成员采集外周血样及2名胎儿分别于孕16+周进行产前诊断羊水穿刺,分别提取外周血DNA和羊水DNA。首先对先证者使用聚合酶链反应扩增BTK基因19个外显子与内含子连接区,PCR产物正反向测序并与BTK基因序列进行比对确定有无BTK基因突变,及突变位点及类型。针对所找到的突变位点,对其父母及其他家系成员进行DNA序列分析。结果在先证者的BTK基因第15外显子检测到c.1366AG突变(p.K456E),该家系成员中6名女性表型正常,检出c.1366AG杂合突变。其中1名死亡患儿的母亲为携带者;2名女性携带者孕期分别进行羊水核型分析,提示胎儿为男胎,进行羊水DNA检测,未检测到此位点突变,分娩出表型正常男婴。结论对于罕见的XLA病例,需要临床医生熟悉免疫缺陷相关的严重临床表现,考虑疾病诊断的基因检测,尽早使用免疫球蛋白替代治疗,以便达到一个较好的临床结局。产前诊断或者在孕前选择胚胎植入前的基因诊断,可以预防XLA患儿出生。     

高分辨熔解曲线分析技术及其在遗传学中的应用

高分辨熔解曲线分析（High Resolution Melting,HRM）技术是建立在熔解曲线分析的基础上,通过一种新的饱和荧光染料,以及专业的高分辨率仪器,应用于突变筛查、基因分型等的遗传学分析新方法。这种技术因其简单、准确、快速、高通量、低成本,对样本无污染等优点而受到普遍关注。本文对HRM技术及其应用进行综述。     

早孕期经腹绒毛活检产前诊断地中海贫血

目的 探讨绒毛活检在重型地中海贫血早期诊断的应用价值.方法 对40例夫妇双方均为地中海贫血基因携带者的孕妇在孕11～13 w时经腹抽取绒毛,进行地中海贫血基因检测,高龄者同时做粢色体核型分析.结果 40例孕妇绒毛抽吸均一次成功,诊断重型α-地中海贫血7例,重型β-地中海贫血2例,1例孕中期超声检查发现胎儿重度脑积水引产,余30例正常妊娠至足月分娩,新生儿无异常;8例高龄孕妇绒毛染色体检查核型正常.结论 早孕期经腹绒毛活检具有早期、快速和安全的特点,适用于地中海贫血的产前诊断.     

唐氏综合征的产前筛查模式和临床应用

唐氏综合征是一种常见的出生缺陷,产前诊断的"金标准"是对侵入性检测获得的胎儿标本行染色体核型分析.目前普遍认为,早孕期绒毛活检和中孕期羊膜腔穿刺术是可接受的方案,手术相关的流产风险估计都是1%[1].但是,如果每个孕妇都进行侵入性检查,不仅成本高,而且也将丢失许多正常胎儿.按中国每年的出生率为2000万计,因侵入性检查导致的胎儿丢失将高达20万.因此,在进行侵入性检查前有必要进行筛查,以确定高危人群,并计算个性化的风险.     

不同保存温度对脐血造血细胞的影响

探讨液氮的液相和气相保存条件对脐血造血细胞的影响。方法：对１５例分离后的脐血有核细胞进行程控降温,分别保存于液相和气相中,在０．５－１．０年后复温,对脐血造血细胞的活率,有核细胞回收率和祖细胞数进行了比较。结论为避免脐血造血细胞在长期存过程中的损失,建立脐血库时宜将样本保存在液氮的液相中。     

染色体微阵列分析对于胎儿十二指肠梗阻的检测价值

目的:探讨染色体微阵列分析(chromosome microarray analysis,CMA)对于胎儿十二指肠梗阻(duodenal obstruction,DO)的检测价值。方法:选取51例超声提示存在DO的胎儿,将其分为单纯组和合并其他异常组。对其进行CMA检测,并随访所有病例的妊娠结局。结果:在51例胎儿中共...     

MMP2及TIMP2的表达与宫颈癌肌层浸润的关系

目的探讨宫颈癌肿瘤细胞金属基质蛋白酶-2(MMP2)及其抑制因子-2(TIMP2)的表达与肌层浸润的关系及意义。方法采用免疫组化检测79例宫颈癌组织中MMP-2与TIMP-2的基因表达情况,收集各病例的临床病理学资料。分析MMP2及TIMP2表达与宫颈癌肌层浸润的关系。结果宫颈癌中MMP2及TIMP2在浅-中肌层、深-全层浸润的阳性表达率分别为:78.13%,87.5%及73.91%,65.22%。提示:MMP2的阳性表达率与肌层浸润深度无统计学意义(P>0.05);TIMP2的阳性表达率与宫颈癌的肌层浸润深度有统计学意义(2=3.84,P<0.05)。结论TIMP2的阳性表达与宫颈癌的肌层浸润有关。