急性冠状动脉综合征患者YKL-40水平的研究

目的: 观察急性冠状动脉综合征(ACS)患者血浆甲壳质酶蛋白40(YKL-40)、高敏C反应蛋白(hs-CRP )和尿酸(UA)水平,探讨其与冠状动脉病变的相关性.方法: 选取ACS患者102例,其中急性心肌梗死(AMI)48例,不稳定心绞痛(UAP)54例分别作为AMI组和UAP组,所有患者均经冠状动脉造影证实,根据冠状动脉病变支数分为单支病变亚组43例、双支病变亚组37例和多支病变亚组22例;另选52例冠状动脉正常者作为对照组.ELISA法检测血浆YKL-40、hs-CRP和UA水平.结果: AMI组YKL-40、hs-CRP和UA水平与UAP组及对照组差异均有统计学意义(P< 0.01);ACS组亚组血浆YKL-40和hs-CRP水平随冠状动脉病变支数的增加而升高,各亚组间除AMI组与UAP组比较UA差异无统计学意义(P >0.05)外,余差异均有统计学意义(P< 0.01);ACS患者血浆YKL-40水平与hs-CRP、UA和冠状动脉病变支数均呈正相关关系(P< 0.05).结论: YKL-40升高可能预示着ACS患者的不稳定状态,且与冠心病发病及病变程度密切相关.     

双孔钾通道TASK-1在糖尿病大鼠心肌损伤中的变化

目的观察双孔钾通道TASK-1在糖尿病大鼠心肌损伤中的变化并分析其可能机制。方法36只SD大鼠随机分为3组（n= 12/组）：正常对照组（N）、糖尿病4周组（DM 4W）和糖尿病8周组（DM 8W）,造模成功后,小动物超声测定各组大鼠心功能;测定 不同时期各组大鼠体质量及心脏重量,计算心系数（HW/BW）,Masson染色观察心肌纤维化程度,Western blotting检测心肌组 织TASK-1的蛋白表达;急性分离N和DM 8W组大鼠心室肌细胞,全细胞膜片钳技术记录其动作电位时程（APD）和TASK-1电 流,同时应用TASK-1特异性抑制剂ML-365观察TASK-1电流抑制情况。结果与N组相比,DM组大鼠心系数增加（P<0.05）, 大鼠舒张末期左室内径及收缩末期左室内径增加（P<0.01）,TASK-1的蛋白表达增加（P<0.01）,左室内径缩短率及射血分数均 下降（P<0.01）,Masson染色显示DM组心肌胶原纤维粗大,交织成网状,排列不均匀,沉积增多;与DM 4W相比,DM 8W组大鼠 舒张末期左室内径、收缩末期左室内径、心系数和TASK-1蛋白表达持续增加（P<0.01,P<0.05）,左室内径缩短率及射血分数进 一步下降（P<0.01）,Masson染色显示心肌形态更加不规则,沉积增加明显。与N组相比,DM 8W糖尿病心肌病组TASK-1的电 流明显减少（P<0.01）,动作电位时程延长（P<0.05）,TASK-1电流被ML-365成功抑制。结论糖尿病可诱发心肌纤维化,加重心 肌损伤,其机制可能与双孔钾通道TASK-1的蛋白及电流变化有关。     

低剂量乙醇对糖尿病大鼠心肌损伤后NF-κB表达的影响

目的探讨低剂量乙醇对糖尿病大鼠心肌损伤后核因子-κB（NF-κB）表达的影响。方法实验大鼠分为3组：正常对照组, 糖尿病组和糖尿病+低剂量乙醇组。后两组大鼠腹腔注射链脲佐菌素55 mg/kg复制糖尿病大鼠模型,糖尿病+低剂量乙醇组于 造模成功1周后给予2.5%（20 mg/kg/d）乙醇日常饮用,1周后改为5%（39.45 mg/kg/d）的乙醇持续至8周。小动物超声测定心室 心功能变化,透射电镜观察心肌超微结构变化,测定血浆白介素-1（IL-1）,白介素-4（IL-4）的变化,蛋白印迹检测左室心肌组织 NF-κB、IKK的蛋白表达,免疫组化测定心肌组织NF-κB的蛋白的胞内定位分布,测定心肌组织4-HNE的变化。结果与对照组 比较,糖尿病组左室收缩及舒张功能降低,血浆IL-1水平、心肌组织4-HNE表达增加（P<0.01）,血浆IL-4水平降低（P<0.01）,心 肌组织NF-κB、IKK的蛋白表达增加（P<0.01）,NF-κB蛋白在胞内分布增加,透视电镜显示心肌肌丝断裂、肌原纤维结构不完整、 线粒体损伤。与糖尿病组相比,低剂量乙醇干预组大鼠左室收缩和舒张功能得到了改善,心肌肌原纤维和线粒体损伤减轻,降 低了血浆IL-1及心肌组织4-HNE水平（P<0.01）及NF-κB、IKK的蛋白表达（P<0.01）,NF-κB蛋白胞内分布减少,血浆IL-4水平 升高（P<0.01）。结论糖尿病大鼠心肌损伤时,心肌组织NF-κB表达增加,低剂量乙醇干预使NF-κB的表达降低,提示NF-κB信 号通路参与低剂量乙醇对糖尿病损伤心肌的保护作用。     

乙醛脱氢酶2在糖尿病大鼠致心肌损伤中的变化

目的：观察线粒体乙醛脱氢酶2 （aldehyde dehydrogenase 2,ALDH2）在糖尿病大鼠不同阶段导致心肌损伤中的变化,并分析其可能机制.方法：采用链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）55 mg/kg腹腔注射复制糖尿病大鼠模型,造模成功后分别于4、8、12周时行离体心脏灌流,测定血流动力学指标;采用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测血浆白细胞介素1（IL-1）、白细胞介素4（IL-4）水平及心肌组织4-羟壬烯醛（4-hydroxynonenal,4-HNE）含量;测定心肌组织ALDH2活性;RT-PCR测定心肌组织Bax、Bcl-2 mRNA的表达.结果：与对照组相比,糖尿病组左室发展压（left ventricular developed pressure,LVDP）、心率（HR）和左室做功（rate pressure product,RPP）明显降低（P＜0.05或P＜0.01）,血浆IL-1水平增加（P＜0.01）,IL-4水平降低（P＜0.01）,心肌组织ALDH2活性下降（P＜0.01）,4-HNE含量增加（P＜0.01）;Bcl-2/Bax mRNA比值降低（P＜0.01）;随着糖尿病病程的延长,LVDP、HR和RPP进一步降低（P＜0.01）,血浆IL-4水平降低（P＜0.05或P＜0.01）,IL-1水平增加,心肌组织ALDH2活性进一步降低（P＜0.01）,心肌组织4-HNE明显增加（P＜0.01）、而Bcl-2/Bax mRNA比值降低（P＜0.05或P＜0.01）.结论：随着糖尿病病程的延长,炎性损伤逐渐加重,凋亡增加,其机制可能与心肌ALDH2活性逐渐降低有关.     

SLeX对肝癌HepG2细胞迁移和侵袭的影响

目的:探讨唾液酸化路易斯寡糖X(sialyl Lewis X,SLeX)在肝癌HepG2细胞中的表达及其对HepG2细胞迁移能力和侵袭能力的影响。方法:实时荧光定量PCR和Western blot法检测α1,3-岩藻糖基转移酶Ⅶ(α1,3-fucosyltransferase Ⅶ,FUT7)在HepG2细胞和L-02细胞中的表达,Western blot及免疫细胞化学染色检测SLeX在HepG2细胞和L-02细胞中表达,应用Transwell小室检测SLeX单克隆抗体封闭后HepG2细胞侵袭和迁移能力的改变。结果:FUT7和SLeX在HepG2细胞中表达,而在L-02细胞中无表达;0.05、0.5和5 mg/L的SLeX单克隆抗体封闭后,HepG2细胞的迁移率逐渐下降,与对照组相比差异显著(P0.05),侵袭穿膜细胞数明显少于对照组(P0.05);SLeX单克隆抗体封闭组间两两比较迁移率与侵袭细胞数的差异均有统计学意义(P0.05)。结论:SLeX在肝癌HepG2细胞中高表达,与HepG2细胞迁移能力和侵袭能力密切相关。     

Cdc42及YAP检测对非瓣膜性心房颤动诊断的相关性研究

目的探讨非瓣膜性心房颤动(房颤)病人血清细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)和转录辅助激活因子Yes相关蛋白(YAP)表达水平及临床意义。方法选取81例非瓣膜性房颤病人(其中阵发性房颤38例,持续性房颤43例)为研究对象,40例同期住院非房颤病人为对照组,采用酶联免疫吸附法检测血清Cdc42及YAP表达水平。同时结合相关血清学指标,统计分析非瓣膜性房颤病人的Cdc42及YAP水平,探讨两者与非瓣膜性房颤诊断的关系。结果同对照组相比,房颤病人CRP、国家标准化比值、D-二聚体、LAD水平增高,LVEF水平降低,差异有统计学意义(P < 0.01),房颤病人中,持续性房颤病人较阵发性房颤病人LAD增大,LVEF降低,差异有统计学意义(P < 0.01);同对照组相比,房颤病人血清Cdc42和YAP表达水平增高,差异有统计学意义(P < 0.01),持续性房颤病人血清Cdc42和YAP表达水平较阵发性房颤病人升高,差异有统计学意义(P < 0.01和P < 0.05)。Pearson相关性分析结果显示,房颤病人血清Cdc42和YAP水平与D-二聚体、LAD呈正相关(P < 0.05~P < 0.01),与左心室射血分数呈负相关(P < 0.01);Cdc42及YAP二者联合诊断房颤的受试者工作特征曲线下面积较单独诊断提高(P < 0.05)。D-二聚体、LAD、Cdc42及YAP表达增加、LVEF减小均为影响房颤的危险因素(P < 0.05~P < 0.01)。结论房颤病人血清Cdc42及YAP异常表达,可能参与房颤心房结构重构的发生发展,可用作早期潜在辅助诊断房颤的指标。     

RIP1/RIP3-MLKL信号通路与慢性心力衰竭的发生、发展及预后相关

目的 通过检测正常人与慢性心力衰竭（HF）患者血浆中受体相互作用的蛋白激酶RIP1、RIP3和混合谱系激酶结构域样蛋白MLKL的表达水平,探讨程序性坏死信号通路RIP1/RIP3-MLKL在HF过程中的表达规律及临床意义。方法 入选2020年2 月~2020年10月在我院接受治疗的慢性HF患者（NYHA Ⅱ~Ⅳ级）。正常对照组（n=21）,Ⅱ级（n=20）,Ⅲ级（n=33）,Ⅳ级（n=43）。采集所有患者的空腹静脉血,ELISA法和Western blotting分别检测RIP1/RIP3-MLKL表达水平和通路蛋白表达情况,同时对心功能Ⅳ级患者进行为期5个月的临床随访,评估临床预后指标。结果 与正常对照组相比,心功能Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级组RIP1、RIP3、MLKL表达量均增加（P<0.01）;与II级组相比,心功能Ⅲ、Ⅳ级组RIP1、RIP3、MLKL表达量均增加（P<0.01）;与Ⅲ级组相比,心功能Ⅳ级组RIP1、MLKL表达量增加（P<0.05）。WB检测RIP1/RIP3-MLKL通路中各蛋白表达量,均存在上调趋势。经pearson相关性分析,HF患者RIP1/RIP3-MLKL表达量与Scr、AST、LVEDD、NT-ProBNP呈正相关（r=0.375、0.231、0.238、0.339、 0.299、0.373、0.228、0.256、0.253、0.184、0.189、0.187,P<0.05）,与LVEF呈负相关（r=-0.268、-0.234、-0.322,P<0.05）。此外对临床随访结果运用独立样本t检验分析,发现在心功能Ⅳ级患者中RIP1/RIP3-MLKL表达量更高组临床预后指标更差。结论 RIP1-RIP3-MLKL信号通路在HF患者中表达明显增加,与HF严重程度呈正相关;慢性HF的发生、发展及预后可能与RIP1/RIP3-MLKL信号通路的激活与表达有关。     

线粒体乙醛脱氢酶在大鼠糖尿病心肌病中的表达及意义

目的观察线粒体乙醛脱氢酶2(aldehyde dehydrogen-ase 2,ALDH2)在糖尿病大鼠不同病程阶段心肌损伤中表达,并分析其作用。方法采用STZ腹腔注射诱导糖尿病大鼠模型,造模成功后分别于4周、8周、12周行离体心脏灌流,测定心室动力学指标和心肌组织SOD活性、MDA和羟脯氨酸含量变化。Real-Time qPCR测定左心室前壁心尖组织线粒体ALDH2 mRNA的表达。结果与正常对照组相比,糖尿病4周组左室发展压和左心室内压最大上升和下降速率无明显变化,但心肌SOD活性降低,MDA和羟脯氨酸含量明显增高,ALDH2 mRNA表达降低;糖尿病8周、12周组左室发展压,左心室内压最大上升和下降速率均降低,心肌SOD活性明显降低,MDA和羟脯氨酸含量明显增高,ALDH2mRNA表达降低;且随着病程的延长,糖尿病大鼠不同时间段相比,动力学、心肌SOD活性、ALDH2 mRNA表达进一步降低,MDA和羟脯氨酸含量明显增高。结论随糖尿病病程的延长,心肌ALDH2表达逐渐降低,可能与其抗氧化能力逐渐下降,心肌纤维化程度不断加重密切相关。