骨髓间充质干细胞诱导为胰岛样细胞后自体移植治疗糖尿病猕猴

目的 观察胰腺提取物诱导骨髓间充质干细胞(BMSC)为胰岛样细胞(IC)的变化及其自体移植对糖尿病猕猴的影响.方法 分离猕猴BMSC,纯化、扩增、鉴定后分别用Ⅰ液[含20 ng/ml碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)、20 ng/ml干细胞生长因子(SCF)、2%B27和2%新生牛血清的DMEM/F12]和Ⅱ液(Ⅰ液加10%胰腺提取物和20 mmol/L尼克酰胺)诱导培养,镜检法观察细胞形态的变化,免疫细胞化学法鉴定相关蛋白的表达.将IC自体移植到链脲佐菌素(STZ)所致糖尿病猕猴胰腺,观察移植对血糖、胰岛素和C肽分泌的影响.结果 分离到CD105阳性的BMSC,经体外诱导后,由长梭形变为神经元样细胞(nestin染色阳性),随后细胞逐渐聚集呈丛状排列的IC(胰岛素和C肽染色阳性).自体移植IC后,糖尿病猕猴血糖浓度逐渐降低,而胰岛素与C肽浓度则逐渐升高,3个月后分别与移植前的浓度相比差异均具有统计学意义(P＜0.01),但仍未恢复到注射STZ前的正常水平.结论 BMSC可以在体外被含有10%胰腺提取物的条件培养基诱导为IC,自体移植IC到糖尿病猕猴后可以纠正血糖、胰岛素和C肽的分泌.     

紫杉醇对高转移性肝癌细胞株MHCC97-H中ezrin表达的影响

目的 研究紫杉醇对体外培养的高转移性肝癌细胞株MHCC97-H中ezrin的表达的影响.方法 将体外培养的MHCC97-H分为4组,分别与不同浓度的紫杉醇共培养,然后用免疫组化、Western blot法、RT-PCR检测各组中ezrin的表达水平,Transwell穿膜实验检测肝癌细胞侵袭能力的变化.结果 正常培养的MHCC97-H中有ezrin的高表达,紫杉醇可以抑制MHCC97-H中的ezrin表达,经紫杉醇处理的肝癌细胞穿透人工膜的能力下降.结论 紫杉醇可以抑制体外培养的MHCC97-H中ezrin的表达,从而抑制肝癌细胞的侵袭能力.     

鸡卵清提取液中大于3 ku蛋白促细胞升高表达多能基因Oct-3/4和Nanog

背景：将体细胞重编程为多能干细胞在生物医学研究领域有广泛的应用价值。目的：分析鸡卵清提取液中不同分子质量的蛋白促进293T细胞升高表达多能基因Oct-3/4和Nanog的作用。方法：分离鸡卵清提取液中大于3 ku和小于3 ku的成分,用于293T细胞共培养。实验分为4组：每孔加入1×10^5个293T细胞,总体积500μL。对照组加入500μL培养基;另外3个孔分别加500μL鸡卵清提取液、鸡卵清大于3 ku的成分和小于3 ku的成分。采用定量PCR检测多能基因Nanog和Oct-3/4的相对表达量。结果与结论：用共培养法大于3 ku的成分有促细胞升高表达多能基因Oct-3/4和Nanog的作用,但小于3 ku的成分没有促细胞升高表达多能基因的作用。提示在鸡卵清提取液中促细胞升高表达多能基因的成分是大于3 ku的蛋白质。     

三七总皂甙对兔血管平滑肌细胞核因子κappaB和细胞周期的影响

目的观察三七总皂甙对兔VSMC生长增殖、细胞周期和NF-κB活性的影响,以探讨其药理机理.方法胎牛血清刺激体外培养的兔VSMC使其快速增殖生长,加入不同浓度的三七总皂甙作用一定时间后,通过MTT法测定三七总皂甙对VSMC生长的抑制率、流式细胞技术测定细胞周期和NF-κB活性的影响.结果三七总皂甙能明显抑制胎牛血清刺激的VSMC的增殖(IC60为14.8μg/ml).三七总皂甙还以浓度依赖方式减少S期细胞,阻滞细胞于G0/G1期,并下调NF-κB活性,与对照组相比具有显著差异(P＜0.01).结论三七总皂甙能显著抑制VSMC的增殖生长,其抗动脉粥样硬化的作用机理之一可能是通过调控VSMC的NF-κB活性来实现的.     

膀胱癌与端粒酶活性

目的：研究膀胱癌组织端粒酶活性及其与膀胱癌临床特征，预后的关系。方法：应用端粒酶PCRELISA法检测膀胱癌组织及正常膀胱粘膜组织的端粒酶活性。结果：端粒酶在50例膀胱癌组织中阳性率为82％（41／50），正常膀胱粘膜组织无端粒酶活性表达，端粒酶活性与膀胱癌的初，复发有相关性（P＝0．028），结论：端粒酶可作为检测膀胱癌的一个敏感指标。     

抗癌药物对人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞端粒酶活性的影响

目的观察羟基喜树碱、顺铂和环磷酰胺三种抗癌药对Hep-2细胞端粒酶活性的影响。方法运用MTT法测定72h的药物IC50，在此基础上，运用端粒重复序列扩增-酶联免疫吸附法测定细胞经过不同浓度的抗癌药作用不同时间后端粒酶活性的变化。结果羟基喜树碱和环磷酰胺均能抑制Hep-2细胞增殖生长并下调端粒酶活性，而顺铂则促进Hep-2细胞增殖生长并上调端粒酶活性。结论羟基喜树碱和环磷酰胺都能通过直接或间接的方式下调端粒酶活性，其机制可能与药物浓度及时间有关。顺铂则上调端粒酶活性，其机制不清楚。     

树突状细胞在慢性乙型肝炎和肝癌治疗中的应用前景

目的:综述树突状细胞在慢性乙型肝炎和肝癌治疗中的应用前景。资料来源:应用计算机检索PUBMED2001-01/2005-12期间的相关文章,检索词为"dendritic cells,chronic type B hepatitis,hepatoma,therapy",并限定文章语言种类为English。同时计算机检索万方数据库2001-01/2005-12期间的相关文章,检索词为"树突状细胞,慢性乙肝,肝癌,治疗",并限定文章语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,并查看每篇文献后的引文。纳入标准:文章所述内容应与树突状细胞在慢性乙型肝炎和肝癌治疗中的应用相关。排除标准:重复研究或Meta分析类文章。资料提炼:共收集到56篇相关文献,30篇文献符合纳入标准,排除的26篇文献为内容陈旧或重复。符合纳入标准的30篇文献中,15篇涉及树突状细胞与慢性乙型肝炎的治疗,10篇涉及树突状细胞与肝癌的治疗,5篇涉及存在的问题与展望。资料综合:慢性乙型肝炎和肝癌的发生发展与病毒的持续感染和机体的免疫功能障碍有关,树突状细胞是机体中功能最强的抗原提呈细胞,在诱导T细胞抗病毒和抗肿瘤免疫中起核心作用。①树突状细胞与慢性乙型肝炎的治疗:许多证据表明由树突状细胞介导的细胞毒T淋巴细胞反应,通过杀伤感染的肝细胞和释放抗病毒的细胞因子来清除乙型肝炎病毒。②树突状细胞与肝癌的治疗:研究证明,经肿瘤抗原致敏的树突状细胞能明显增强特异性细胞毒T淋巴细胞对肝癌细胞的杀伤活性。结论:树突状细胞与慢性乙型肝炎和肝癌的发生发展密切相关。在乙型肝炎和肝癌治疗中,如能激发、增强机体对乙型肝炎病毒和肝癌细胞的主动免疫排斥反应,可有助于清除体内的病毒和肿瘤,达到抗病毒和抗肿瘤治疗的目的。     

自体骨髓细胞移植对老年猕猴肝脏功能与体液免疫及血细胞比例的干预

目的：分析自体骨髓细胞肝门静脉植入后对老年灵长类动物肝脏功能、体液免疫及血液细胞亚群数量变化的影响。方法：实验于2004加4／12在昆明总医院医学实验科完成。选取18-20岁老年恒河猴8只，分离骨髓有核细胞，将3 &;#215;10^9个自体骨髓单个核细胞经肝门静脉植入体内。于骨髓细胞移植前和移植后1，2，3，4，5，6个月分别采集外周血5mL，吸取上清液采用自动生化分析仪观察外周血肝功相关蛋白含量、胆红紊含量及肝酶活性的变化；以上各时间点另采集外周血2mL，应用SF-300全自动血球分析仪测定外周血白细胞总数、淋巴细胞、粒细胞、单核细胞、血小板及红细胞的数量和比例。结果：实验选用8只恒河猴，全部进入结果分析。①骨髓细胞移植后外周血肝功相关蛋白含量及肝酶活性的变化：与骨髓细胞移植前比较，血清总蛋白、清蛋白及球蛋白含量在移植后6个月内均明显升高（P〈0．05）；谷丙转氨酶、血清谷草转氨酶活性在移植后1，2，3个月内明显升高（P〈0．05），随后逐渐下降，至6个月时接近移植前水平（P〉0．05）。②骨髓细胞移植后血清胆红紊浓度的变化：与骨髓细胞移植前比较，至移植后6个月血清总胆红素浓度明显降低（P〈0．05），血清间接胆红素浓度与移植前基本相似（P〉0．05）；血清直接胆红素浓度在细胞移植后6个月内一直低于移植前水平（P〈0．05）。⑨骨髓细胞移植后血清免疫球蛋白浓度及外周血细胞亚群比例的变化：血清IgG，IgA，IgM，C3，C4浓度、白细胞总数、血小板数量和淋巴细胞、单核细胞、粒细胞比例在移植后6个月内均显著高于细胞移植前（P〈0．05）；红细胞数量未见明显变化。结论：老年猕猴自体骨髓细胞肝门静脉移植能够改善肝脏的蛋白合成和代谢功能，具有增强细胞与体液免疫力的作用。