一条人脑胶质瘤相关新基因的克隆与表达

目的运用基因芯片技术获取正常成人脑组织与人脑胶质瘤中差异表达的基因，并对其中一条与脑胶质瘤相关的新基因进行了克隆和表达的研究。方法抽提正常成人脑组织与人脑胶质瘤组织中的mRNA来制备探针，经杂交、洗涤后，通过计算机观察二者表达谱的差异情况，对681F05克隆子进行了Northern blot，生物信息学分析和蛋白质的表达。结果通过四次基因芯片筛选，获得15条与胶质瘤相关的新基因，经northern blot证实681F05基因在人正常脑组织中低表达，而在人脑胶质瘤中高表达。BLASTn和BLASTx分析显示，它们编码蛋白与线虫Cyp-10蛋白同源性分别为52％和72％。cDNA序列分析发现这两个克隆是同一个基因[命名为cyclophilin—like gene（PPIL3）]的两个不同的剪切体（PPIL3a和PPIL3b）。并在大肠杆菌中得到了PPIL3a和PPIL3b与GST较好表达的融合蛋白。结论基因芯片筛选正常脑组织与人脑胶质瘤差异表达的基因具有样品用量少，高质量，高速度，高敏感等特性。681F05基因可能是与人脑胶质瘤形成有关的一条全长新基因。     

胶质母细胞瘤基因表达谱及相关基因的聚类研究

目的探讨人脑胶质母细胞瘤发生、发展中相关基因的表达及功能.方法用含13 939种人类基因的BioStarH140S型表达谱芯片,以正常成人脑及不同级别胶质瘤组织总RNA制备的探针杂交芯片;ScanArray 4000扫描芯片荧光信号,提取脑及胶质瘤组织差异基因并进行生物信息分析;用Hierarchical聚类对胶质瘤差异基因进行特征提取;用Northern杂交验证及进行初步功能研究.结果正常脑与18例不同级别胶质瘤组织间筛选出多类差异表达基因,通过生物信息学和Hierarchical聚类,发现α-连环素、微型染色体维护蛋白7、细胞周期素B2、FBX05、着丝粒蛋白F基因与胶质母细胞瘤密切相关,该类基因在低级别胶质瘤中表达差异不明显,但胶质母细胞瘤中表达明显上调.Northern杂交显示该类基因与胶质母细胞瘤密切相关,与芯片结果一致.结论基因表达谱芯片可快速、高效地筛选胶质瘤相关基因,发现的5条基因与胶质母细胞瘤侵袭性强密切相关,可成为判断胶质瘤预后的分子生物学指标.     

基因表达谱芯片筛选局灶性脑缺血大鼠脑相关基因的研究

目的:应用基因芯片技术研究局灶性脑缺血大鼠脑组织与假手术组大鼠脑组织基因表达谱的差异,探索局灶性脑缺血的发病机制。方法:将4096种大鼠基因PCR产物用CartesianPixsys7500点样仪按微矩阵排列制成基因芯片;按一步法抽提脑局灶性缺血大鼠脑组织与假手术组大鼠脑组织的总RNA;将等量的脑局灶性缺血大鼠脑组织与假手术组大鼠脑组织RNA分别逆转录合成以Cy5和Cy3标记的cDNA一链做探针,混合后与上述基因芯片杂交。用AxonGenepix4000B扫描仪扫描芯片荧光信号图像,用GenepixPro4.0软件进行数字化处理和分析后比较两种组织基因表达谱的差异。结果:局灶性脑缺血大鼠与假手术组大鼠脑组织基因表达谱分析,发现211个差异表达基因,其中12个基因低表达,199个基因高表达。结论:本研究从脑局灶性缺血大鼠脑组织中筛选出大量的差异表达基因,说明这些基因可能参与局灶性脑缺血后脑损伤的发生及发展过程,从而为局灶性脑缺血的诊治提供新思路。     

二尖瓣生物瓣置换术后瓣膜毁损的再手术

本文报告我院１９９２年至１９９３年间对４例二尖瓣生物瓣置换术后瓣膜毁损施行再次换瓣手术，重点对生物瓣毁损后再手术时机的选择，术中可能遇到的困难及处理方法进行讨论，４例患者术后均恢复顺利，痊愈出院。     

人膀胱癌基因表达变化的基因芯片研究

目的 研究膀胱移行上皮细胞癌（TCC）和正常组织差异表达基因。方法 应用基因芯片技术对5例TCC癌组织和正常组织的mRNA进行检测。结果 在12800条目的基因中共发现差异表达基因384条。在癌组织中87条表达增加，297条表达降低；259条能在GeneBank中登录。结论 TCC的发生、发展涉及多基因改变，基因芯片技术可同时定量研究大量基因表达水平，是一种稳定、高效的方法。     

康心宁颗粒剂保护心肌缺血和抗心律失常作用的实验研究

目的: 观察康心宁颗粒剂对心肌缺血性的保护作用和抗心律失常作用.方法:结扎大鼠冠状动脉造成心肌缺血及缺血性心律失常;静注乌头碱诱发大鼠心律失常.结果:康心宁颗粒剂可明显减少结扎大鼠冠状动脉所导致的室性异位搏动数,推迟心律失常出现时间,缩短室速时程,降低室颤发生率,减少心脏坏死面积,降低血中肌酸激酶(CK)活性和游离脂肪酸(FFA)含量;可明显延长乌头碱所导致的室早、室速、室颤的出现时间,并显著降低心脏停搏的发生率.结论:康心宁颗粒剂具有明显的保护心肌缺血作用,对结扎冠脉和注射乌头碱所导致的心律失常也有显著的对抗作用.     

实时三维超声心动图评价原发性高血压患者左室重构的研究

目的 应用实时三维超声心动图(RT-3DE)以评价原发性高血压左室霞构患者左室功能及质量的情况.方法 对30例正常人、30例无左室肥厚(NLVH)及33例高血压伴左室肥厚(LVH)患者进行常规二维超声检查及RT3DE检查,测量左室质量指数(LVMI)、左室舒张末容积(LVEDV)、左室收缩末容积(LVESV)及左室射血分数(LVEF).同时,用组织多普勒(TDI)技术测量左室舒张功能参数Ea,Aa及Ea/Aa.结果 LVH组LVMI、LVEDV、LVESV明显高于NLVH组及正常对照组(P<0.05),而LVEF、Ea/Aa降低(P<0.05).高血压病患者IVMI与LVEF呈负相关(r=-0.654,P<0.05).LVH组LVEF低于大样本正常范围低值,但两者间差异无统计学意义.结论 RT-3DE可以评估原发性高血压病患者心脏的功能及结构.对于伴有心力衰竭的原发性高血压病患者,联合LVMI和LVEF进行评估左室收缩功能可能有更重要的临床意义.     

心内直视手术后阵发性Ⅲ度房室传导阻滞的诊断与治疗

本文报告3例心内直视手术后阵发性Ⅲ°房室传导阻滞。手术过程顺利,术后循环稳定。但术后第3～5天发生短暂的意识消失、肢体抽搐等,且反复多次发生。心电图检查证实为阵发性Ⅲ°房室传导阻滞。经应用心内膜临时起搏器后,病人均度过危险期,于1～10天后,心律恢复为窦性,房室传导阻滞消失。作者对心内直视手术后阵发性Ⅲ°房室传导阻滞的临床特点、诊断、治疗和预后作了讨论。     

转染hEGF基因的表皮细胞G418长期筛选后的表达

目的:探讨外源性基因在转染表皮细胞后稳定表达情况.方法:选用构建的pBK-Signal-EGF质粒,在脂质体LipofectAMINE的介导下,转染培养成60%～70%连片的人表皮细胞,然后用G418长时间筛选出稳定表达的细胞克隆.大量培养传代后,通过ELISA试剂盒检测培养上清中表皮细胞生长因子(EGF)外源性基因稳定表达水平.结果:(1)构建的人表皮细胞生长因子(hEGF)质粒可成功转染到人表皮细胞中;(2)转基因表达在传4代后仍可存在;(3)hEGF表达水平6周内可在培养基中测出.结论:外源性hEGF基因可以在表皮细胞中稳定表达.     

改进实验课教学加强学生能力培养

改进实验课教学加强学生能力培养侯慧英，秦荣，应康（包头医学院生物学教研室，包头０１４０１０）医用生物学是一门实践性很强的基础学科。实验课是生物教学中的重要组成部分。组织好实验课这个实践环节，对于提高教学质量、培养学生的动手能力和学习能力具有极为重要的...