吉非替尼对肺癌细胞株A549和H1975放射敏感度的影响及其机制

目的 本研究旨在探讨小分子表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor, EGFR）酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼是否能增加肺癌细胞株A549和H1975的放疗敏感度及其机制。方法 选取两种非小细胞肺癌细胞株A549和H1975,分为单纯X线组和X线+吉非替尼组。单纯X线组采用单纯X线照射,X线+吉非替尼组经10 μmol/L吉非替尼作用24 h后行X线照射。两株细胞不同分组细胞,采用克隆形成实验检测放射敏感度,免疫荧光激光共聚焦显微镜观察X线照射后不同时间点细胞核中磷酸化H2AX（γ-H2AX）亮点在细胞中的定位情况,Western blot法检测放疗后胞质胞核蛋白中EGFR的表达。结果 克隆形成实验中,A549细胞X线+吉非替尼组在各放疗剂量点的SF2值（0.3475）低于单纯X线组（0.4833）;H1975细胞X线+吉非替尼组与单纯X线组在各放疗剂量点的SF2值分别为0.3094和0.3207,无明显差异。免疫荧光结果显示,照射4 Gy后各时间点X线+吉非替尼组A549细胞核中γ-H2AX亮点相比单纯X线多;单纯X线组和X线+吉非替尼组H1975细胞γ-H2AX亮点在各时间点无明显差异; Western blot结果显示,A549细胞经4Gy照射后EGFR有入核现象,而预先经吉非替尼处理再接受4Gy照射,EGFR蛋白绝大部分位于细胞质内;H1975细胞,单纯X线组和X线+吉非替尼组EGFR蛋白均在细胞质中表达,胞核中几乎没有,且两组无明显差异。结论 吉非替尼能增加肺癌细胞株A549的放射敏感度,可能与阻止放疗后EGFR入核进行双链断裂（double strand break,DSB）修复有关;对H1975细胞无影响,与其放疗后EGFR不入核相关。     

Trastuzumab对放射诱导下HER-2的入核及DNA损伤的影响

通过观察HER-2单克隆抗体trastuzumab对BT474细胞中HER-2的入核效应和对核内DNA损伤修复的影响,来探讨HER-2直接入核通路上trastuzumab放疗增敏机制。方法：将BT474细胞随机分成单纯照射组和trastuzumab干预组,通过克隆形成实验来观察各剂量下放射后两组BT474细胞的存活分数的差异,共聚焦显微镜下观测trastuzumab对放射后HER-2核转运和DNA DSB标志物γH2AX表达的影响,免疫印迹实验检测trastuzumab对放射后早期BT474细胞核内HER-2蛋白、DNA-PKcs的表达影响。结果：与单纯照射组相比,trastuzumab干预组可降低放射后各剂量下BT474细胞的存活分数（SF）,共聚焦显微镜可观察到trastuzumab推迟了照射后HER-2蛋白由细胞膜进入核内的过程,并增加放射后12 h时间点的γH2AX表达,Western blot实验结果显示trastuzumab干预下调了放射后早期核内DNA-PKcs和HER-2的表达。结论：trastuzumab能够通过减少HER-2的入核,并进一步下调DNA-PKcs活性,抑制放射诱导下BT474的早期DSB修复。     

预后营养指数与晚期结直肠癌患者三线治疗的生存相关性分析

目的 探讨营养预后指数与接受替吉奥联合阿帕替尼治疗的晚期三线结直肠癌患者的疗效的相关性。方法 回顾性收集接受阿帕替尼联合替吉奥治疗的43例三线结直肠癌患者的临床资料，计算预后营养指数（PNI）、白蛋白/球蛋白比值（AGR）、中性粒细胞/淋巴细胞比值（NLR）、血小板/淋巴细胞比值（PLR）以及淋巴细胞/单核细胞比值（LMR）等营养免疫评估指标，采用Cox比例风险回归模型及Kaplan-Meier生存曲线评价相关免疫营养指标对于患者生存的影响。 结果 根据总生存时间（OS）的受试者工作特征曲线 （ROC）曲线分析，PNI最佳临界值定义为47.08；单因素分析结果显示，美国东部肿瘤协作组（ECOG）评分、PNI、AGR、血红蛋白（HGB）、NLR及LMR与患者OS显著相关；多变量分析显示ECOG评分及PNI是OS的独立预后因素。低PNI患者中位生存时间（mOS）为5.70个月（95%CI=4.42~6.98），高PNI患者mOS为15.77个月（95%CI=7.43~24.1），P=0.000；低PNI的患者中位无进展生存时间（mPFS）为3.42个月（95%CI=2.31~4.53），高PNI患者mPFS为6.29个月（95%CI=4.96~7.62），P=0.003。结论 PNI在作为晚期结直肠癌接受替吉奥联合阿帕替尼三线治疗的生存预测方面具有较好临床应用价值，简单易行。     

宫颈癌细胞株和正常间质细胞株受X线照射后的辐射效应

目的用宫颈癌、正常血管内皮和正常成纤维细胞株体外模拟宫颈癌实质和间质组织,研究其受到不同剂量放射线照射后的辐射效应。方法采用宫颈腺癌细胞株HeLa,宫颈鳞癌细胞株SiHa、C33A、Caski,人脐静脉内皮细胞株ECV304,及小鼠成纤维细胞株NIH/3T3细胞,分别用6MV的X线（300cGy/min）照射6和10Gy,24和48h后收集细胞,行PI染色,流式细胞术检测凋亡率和细胞周期变化。结果细胞株受到照射后,C33A凋亡率最高,而SiHa凋亡率最低,其余细胞株（包括ECV304与NIH/3T3细胞）均介于两者之间;各宫颈癌细胞株及NIH/3T3照射10Gy后48h的凋亡率较6Gy稍高（P〉0.05）,而ECV304照射10Gy后48h的凋亡率（13.04%±1.08%）比照射6Gy（6.51%±0.61%）明显升高（P=0.001）;各细胞株受到不同剂量照射后,均表现出明显的G2/M期阻滞,且阻滞细胞百分比随照射剂量增加而增加;受到照射后一般在24-48hG2/M期阻滞细胞百分比最高。结论高剂量照射可以提高血管内皮细胞的凋亡率,并导致剂量依赖性的G2/M期阻滞,为预测宫颈癌的高剂量放疗提供理论依据。     

上海市某区休闲娱乐场所从业人员心理卫生状况调查

[目的]了解休闲娱乐场所从业人员的心理卫生状况,为健康促进工作提供依据。[方法]分层随机抽取某区136家休闲娱乐场所(美发厅、美容厅、足浴房和舞厅),采用症状自评量表(SymptomChecklist90,SCL-90)对其583名从业人员进行心理卫生状况的问卷调查和分析。[结果]休闲娱乐场所从业人员的SCL-90量表因子得分均值高于全国常模(P<0.01),女性得分均值均高于男性(P<0.01或P<0.05),四类行业之间比较足浴房和舞厅得分均值高于美发厅和美容厅(P<0.05)。[结论]休闲娱乐场所从业人员心理卫生状况存在一定问题,需要政府和其他组织采取措施,改善其工作生活条件,并开展相关的健康促进工作,提高其心理健康水平。     

人卵巢癌组织中Rac-1蛋白和基质金属蛋白酶-2的表达及临床意义

目的　研究Rac 1蛋白和基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )在人卵巢癌中的表达 ,探讨其与卵巢癌组织学类型、临床分期、病理分化程度和转移的关系。方法　应用辣根过氧化物酶标记的链霉卵白素免疫组织化学方法 (SP法 )对 5 0例卵巢癌、 18例良性卵巢肿瘤及 12例正常卵巢组织中的Rac 1蛋白和MMP 2蛋白进行检测。结果　Rac 1蛋白和MMP 2蛋白在卵巢癌中的表达明显比正常卵巢组织及良性病变高 ,差异有显著性意义 (均P <0 0 1)。Rac 1和MMP 2在不同组织学类型标本中表达差异无统计学意义 (均P >0 0 5 )。Rac 1及MMP 2在不同临床分期、分化程度和肿瘤转移的标本中的阳性表达率比较 ,差异有显著性意义 (P <0 0 1或P <0 0 5 )。Rac 1和MMP 2两者在肿瘤转移过程中密切相关 (r =0 74 0 ,P <0 0 1)。结论　Rac 1和MMP 2蛋白的表达与卵巢癌的临床分期、分化程度及转移密切相关 ;Rac 1/MMP 2通路在卵巢癌的侵袭转移中起着重要作用。     

裘法祖的最后一课——寄语青年肿瘤医师

裘法祖院士已经离我们远去了，但他的大医精神仍在延续。2008年6月，裘法祖院士最后一次向肿瘤医生公开演讲，讲述他行医的感悟。让我们在缅怀裘法祖院士的同时，感受大医的思想精华。     

吉非替尼对肺癌细胞株HCC827和H358放射敏感性的影响及其机制研究

背景与目的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)是决定放疗效应的一个重要因素,其过表达或是下游通路的激活与包括非小细胞肺癌在内的肿瘤的放疗抵抗相关,因而阻断EGFR的信号通路可能会增强放疗敏感性。本研究旨在探讨小分子EGFR酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼能否增加肺癌细胞株HCC827和H358的放疗敏感性及其可能的机制。方法选取HCC827和H358这两个非小细胞肺癌细胞株,分为单纯X线组和X线+吉非替尼两组。单纯X线组采用单纯X线照射,X线+吉非替尼组经1μmol/L吉非替尼作用24h后再行X线照射。克隆形成实验比较两株细胞中不同分组细胞放射敏感性,免疫荧光激光共聚焦显微镜观察X线照射后各时间点细胞核中的磷酸化H2AX(γ-H2AX)及EGFR焦点在细胞中的定位情况,Western blot法检测放疗后胞质胞核蛋白中EGFR的表达。结果克隆形成实验中,H358细胞实验组与对照组在各放疗剂量点的SF2值分别为0.355和0.433;HCC827细胞实验组与对照组在各放疗剂量点的SF2值分别为0.223和0.242,差别不明显。激光共聚焦显微镜观察照射4Gy后各时间段实验组H358细胞核中g-H2AX斑点相比对照组要多,且持续时间更长。而对照组和实验组的HCC827细胞g-H2AX斑点在各时间段并无明显差异;激光共聚焦显微镜观察照射4Gy后对照组H358的EGFR蛋白在1h内入核,而经吉非替尼处理后EGFR蛋白几乎不入核;实验组及对照组HCC827细胞的EGFR表达位置均在细胞质中,胞核中很少或者没有,可以认为并无入核现象;Western blot结果显示,H358细胞在经4Gy放射处理后有入核现象,而预先经吉非替尼处理后,EGFR蛋白几乎不在核内表达而仍位于细胞浆内。对于HCC827细胞,实验组及对照组的EGFR蛋白均在细胞质中表达,胞核中很少或没有,且两组并无明显差异。结论吉非替尼可增加肺癌细胞株H358的放射敏感性,这可能与其阻止放疗后EGFR入核、影响放疗后双链断裂(double strand break,DSB)修复有关;而对HCC827细胞无影响,可能与其放疗后EGFR不入核相关。     

Ku80蛋白在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的:研究Ku80蛋白在乳腺癌的表达及与临床病理特征的关系.方法:采用免疫组化法检测65例乳腺癌组织Ku80、ER、PR、HER-2和突变型p53表达水平.结果:65例乳腺癌标本中Ku80、ER、PR、HER-2、p53阳性率分别为78.5%、40.0%、53.8%、44.6%和32.3%.Ku80表达水平与肿瘤大小、ER、PR、HER-2和p53的表达水平有关(P＜0.05),其中Ku80与HER-2密切相关(rs=0.319,P=0.010).结论:Ku80表达水平与影响乳腺癌患者预后的生物学特征相关,特别是与HER-2关系密切;Ku80与HER-2之间可能存在调控通路.     

ERCC1和FGFR2在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的观察ERCC1和FGFR2在胃癌组织中的表达,并探讨两者相关性及其临床意义。方法采用免疫组织化学方法(SP二步法) 检测手术切除的27例胃癌组织及27例癌旁胃组织中ERCC1和FGFR2蛋白的表达情况。结果ERCC1和FGFR2在胃癌组织中的阳性表达率分别为33.3%和444%,在癌旁正常组织中的阳性表达率分别为88.9%和81.5%,两种蛋白阳性表达率在正常胃组织和胃癌组织间差异均有统计学意义(P<0.05)。ERCC1、FGFR2蛋白表达与性别、年龄、分化程度、淋巴结转移、浸润深度及TNM分期均无关(P>0.05)。ERCC1与FGFR2的表达强度呈正相关。结论在胃癌组织中ERCC1和FGFR2呈低表达,并且铂类耐药基因ERCC1的表达可能与FGFR2的表达具有一定相关性。