Survivin基因在乳腺癌组织中的表达及其与HER2、p53基因表达的关系(英文)

目的研究 survivin 基因在乳腺癌中的表达及其与 HER-2、突变型 p53的关系。方法免疫组化法检测62例乳腺癌组织中 survivin、HER-2、p53基因的表达。结果 62例乳腺癌组织中 survivin、p53阳性率分别为67.7%、35.5%;HER-2过度表达率37.1%。Survivin 表达水平与患者临床病理特征及 p53表达均无相关性(P>0.05),与 HER-2过度表达相关(P=0.013)。结论 Survivin 表达水平与 HER-2过度表达相关;HER-2基因可能与 survivin 基因之间可能存在某种调控通路。     

DNA双链断裂修复蛋白在乳腺癌和乳腺纤维腺瘤中的表达

目的 研究DNA双链断裂修复蛋白(Ku80、DNA-PKcs和ATM)在乳腺癌和乳腺纤维腺瘤组织中的表达,探讨3种蛋白在乳腺癌发生发展中的作用及相互关系.方法 应用免疫组化SP法检测55例乳腺癌和14例乳腺纤维腺瘤组织中Ku80、DNA-PKcs和ATM蛋白的表达情况.结果 Ku80、DNA-PKcs和ATM蛋白在乳腺癌患者中的阳性率分别为74.5%、54.5%和52.7%,在乳腺纤维腺瘤患者中的阳性率分别为92.9%、92.9%和71.4%;DNA-PKcs蛋白在乳腺癌组织中的表达显著低于乳腺纤维腺瘤组织(χ2＝6.975,P=0.008),而Ku80和ATM的表达虽在乳腺癌组织中的表达亦低于乳腺纤维腺瘤组织,但差异无显著性意义(均P>0.05).ATM和DNA-PKcs蛋白的表达在不同病理类型、肿块大小、临床分期和淋巴结转移状态的乳腺癌患者中差异无统计学意义(P>0.05);但Ku80的表达与患者的肿块大小和临床分期相关(P<0.01).Spearman等级相关分析提示:在55例乳腺癌患者中,Ku80与DNA-PKcs的表达呈正相关(r＝0.355,P=0.008);Ku80与ATM的表达亦呈正相关(r＝0.325,P=0.015).结论 DNA-PKcs蛋白可能在乳腺癌的发生发展中起重要作用;Ku80可以促进乳腺癌细胞生长;Ku80与DNA-PKcs及ATM存在密切关系.     

协同抑制Ku80和DNA-PKcs对HeLa细胞放射生物学功能的影响

目的:研究小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)和LY29400抑制单个或多个DNA双链断裂(DNA double-strand break,DSB)修复蛋白后,HeLa细胞放射敏感性和细胞周期的变化.方法:Ku80受抑细胞HeLa/Ku80-siRNA和对照细胞HeLa/Neg-siRNA分别转染可以靶向抑制DNA依赖蛋白激酶催化亚单位(DNA-dependent protein kinase catalytic subunit,DNA-PKcs)表达的siRNA.或用DNA-PKcs活性抑制剂LY294002处理,经6 MV X线照射后,克隆形成实验检测细胞放射敏感性的变化,FCM法检测细胞周期.结果:DNA-PKcs-siRNA转染后的HeLa/Ku80-siRNA细胞,其2 Gy照射后的存活分数(sur-vival fraction,SF2)为0.08±0.01,LY294002作用后HeLa/Ku80-siRNA的SF2达0.03±0.01,均远低于未处理HeLa/Ku80-siRNA细胞的0.20±0.05.各组细胞照射6 Gy后均出现G2/M期阻滞,转染DNA-PKcs-siRNA的HeLa/Neg-siRNA细胞以及经LY294002处理的HeLa/Ku80-siRNA、HeLa/Neg-siRNA细胞G2/M期阻滞逐渐缓慢出现,照射后72 h仍末达到顶点,而其他细胞G2/M期阻滞均于照射后48 h达到顶点.结论:在抑制Ku80已达95%的基础上,DSB修复功能可以由其他DSB修复蛋白如DNA-PKcs和共济失调毛细血管扩张症突变基因(ataxia-telangiectasia mutant,ATM)代偿,协同抑制上述蛋白可以明显增加,如HeLa细胞的辐射敏感性;Ku80、DNA-PKcs和ATM在细胞的G2/M期阻滞过程中发挥的作用不同.     

辐射诱导乏氧HeLa细胞HIE-Lα和DNA-PK相互调控机制的研究

目的 初步探讨辐射效应诱导下乏氧人宫颈癌细胞系HeLa细胞乏氧诱导因子-lα(HIF-lα)和DNA依赖蛋白激酶(DNA-PK)表达相关性及其调控机制.方法 免疫印迹法检测乏氧状态下HeLa细胞接受射线照射后HIF-lα和DNA-PK(包括DNA-PKcs及Ku80)表达情况;运用靶向抑制HIF-lα或DNA-PKcs的小发卡样干扰RNA(shRNA)表达质粒分别转染乏氧HeLa细胞,经辐射诱导后检测不同时间点各自DNA-PKcs或HIF-lα表达的变化.结果 乏氧HeLa细胞经辐射诱导后0、12、24、48 h时间点检测到HIF-lα、DNA-PKcs和Ku80表达随时间增加逐渐增高,其中HIF-lα和DNA-PKcs的相对表达量呈正相关(r=0.816,P=0.041);运用HIF-lα-shRNA表达质粒明显抑制乏氧HeLa细胞内HIF-lα表达,检测到细胞经照射后12、24、48 h时间点DNA-PKcs的表达与转染空白质粒的阴性对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05);而pDNA-PKcs-shRNA表达质粒抑制DNA-PKes表达后检测各时间点HIF-lα的表达与转染空白质粒的阴性对照组相比均明显减少(P<0.05).结论 辐射诱导乏氧HeLa细胞内HIF-lα表达与DNA-PKcs的表达水平相关;通过抑制DNA-PKcs的表达能显著降低乏氧HeLa细胞HIF-lα表达水平,对HIF-lα的调控机制提出新的思路.     

DNA-PK作为放化疗增敏靶点的研究进展

目的:总结国内外对DNA依赖性蛋白激酶(DNA-dependent protein kinase,DNA-PK)作为放化疗增敏靶点研究的现状.方法:检索Medline及CHKD期刊全文数据库检索系统,以"DNA-PK、放射敏感性和化疗敏感性"为关键词,检索1998-01-2008-03关于DNA-PK研究的文献,共检索到英文文献1 660篇,中文文献115篇.纳入标准:1)DNA-PK的功能;2)DNA-PK作为肿瘤治疗靶点的研究;3)DNA-PK抑制剂研究.根据纳入标准,精选82篇文献,最后纳入分析35篇文献.结果:放射线和类放射线药物均可导致肿瘤细胞DNA双链断裂(DSB),从而杀伤肿瘤细胞,DNA-PK具有包括促进DSB修复在内的诸多功能.抑制DNA-PK的功能和活性,就可抑制DSB的修复,提高肿瘤细胞对放化疗的敏感性.结论:DNA-PK可以成为肿瘤治疗的理想靶点,但在临床应用方面仍有很多问题需要解决.中华肿瘤防治杂志,2009,16(1):74-77     

特殊体模及膀胱充盈状态对直肠癌术后辅助放疗的影响

目的 比较特殊体模及膀胱充盈状态对直肠癌术后放疗剂量分布及正常组织受照射体积的影响,探讨直肠癌术后适形放疗较理想的治疗模式。方法 共有23例直肠癌患者入选。8例和15例患者分别采用膀胱充盈条件下常规或特殊体模固定的俯卧位3野照射,处方剂量50 Gy。15例患者CT定位同时还扫描膀胱排空状态下的图像。运用三维计划系统比较3种照射方式的靶区和正常组织体积-剂量关系、适形指数(CI_PTV)、特殊体模及膀胱充盈状态对不同剂量水平(5~52.5 Gy)小肠受照射体积影响以及小肠急性放射性反应与受照射体积的关系。结果 3种照射模式中靶区和股骨头体积-剂量分布及适形指数均无明显差异(P>0.05)。但采用特殊体模照射时,小肠在高剂量区内体积(V₂₀~V_52.5)均显著减少(P<0.01),且在膀胱充盈时更加明显,而低剂量区受照射体积(V₅~V₁₅)则减少不明显(P>0.05);膀胱充盈状态下使用特殊体模还可显著降低不同剂量水平(20~52.5 Gy)膀胱受照射体积(P<0.01)。照射过程中患者腹泻程度(RTOG 0~1和≥2)与低剂量区内(5~30 Gy)小肠受照射体积均显著相关(P<0.05)。结论 膀胱充盈状态下特殊体模固定的俯卧位照射方式明显降低了小肠和膀胱的受照射剂量,减少了小肠急性放射反应的发生。     

Ku80表达抑制细胞模型的建立及其功能检测

目的 建立利用RNAi技术抑制Ku80表达的HeLa细胞模型，探讨Ku80在放射生物学方面的功能。方法构建靶向抑制Ku80的siRNA表达质粒，转染HeLa细胞，筛选稳定表达的转化克隆；Westernblotting检测Ku80表达变化；6MVX线照射6Gy后，流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期；克隆形成实验检测细胞SF2、D0等值。结果构建的质粒转染HeLa细胞获得3个稳定转染克隆，Westernblotting分析表明2个阳性克隆Ku80蛋白抑制率分别达到89．3％和96．4％；Ku80表达抑制细胞受x线照射后48及72h的凋亡率高于对照细胞（P〈0．05），但4株细胞的细胞周期变化无统计学意义（P〉0．05）；2个阳性克隆细胞株的D0和SF2值明显降低，在D10剂量时的增敏比分别为1．315和1．365。结论运用RNAi技术建立的Ku80表达抑制克隆细胞可以成为简单实用的细胞模型；Ku80-siRNA可以抑制Ku80的表达，从而促进HeLa细胞对X线的敏感性。     

互联网+医护联合模式对门诊包皮手术管理的时效与疗效分析

目的 探讨互联网联合医护模式用于门诊包皮手术患儿的管理及效果。方法 选取2019年2月—2020年12月中山市中医院泌尿外科门诊3600例进行包皮手术的患儿进行回顾性研究,根据门诊手术管理模式不同分为对照组和试验组各1800例。结果 试验组患儿的候诊时间、术后止痛药物使用时间、脱环结束时间、创口愈合时间均显著优于对照组患儿(p<0.05),试验组患儿的疼痛程度评分低于对照组,专注程度和舒适程度评分均显著高于对照组患儿(p<0.05),试验组患儿的术后并发症发生情况显著少于对照组患儿(p<0.05)。结论 相比于使用常规门诊管理模式,包皮手术患儿使用互联网联合医护管理模式的效果更佳,术后并发症发生概率相对较低。     

阿托伐他汀治疗慢性充血性心力衰竭的临床研究

目的：观察阿托伐他汀治疗慢性充血性心力衰竭患者对心功能及C反应蛋白的影响。方法：将慢性充血性心力衰竭患者62例随机分为阿托伐他汀（20mg／d）组（n=31）与对照组（n=31）,2组均按慢性充血性心力衰竭常规治疗,治疗组另外服用阿托伐他汀,2组治疗前后检查6分钟步行距离、TC、LDC—C、CRP、LVEDD、LVESD、LVEF。结果：6个月后,阿托伐他汀组与对照组治疗前后差值相比,TC（P〈0．05、TDL（P〈0．05）、CRP（P〈0．05）、LVEDD（P〈0．05）、LVESD（P〈0．05）均有不同程度降低,6分钟步行距离（P〈0．05）、LVEF（P〈0．05）则有明显提高。结论：慢性充血性心力衰竭患者在常规扩心衰基础上加用阿托伐他汀20mg／d,治疗6个月可显著改善左室功能,降低C反应蛋白水平。     

5-氮杂-2'-脱氧胞苷对人肺腺癌A549细胞增殖及Apaf-1基因表达的影响

目的 观察DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人肺腺癌A549细胞的增殖、凋亡的影响及其对A549细胞中Apaf-1基因表达的影响.方法 不同浓度的5-Aza-CdR处理A549细胞后,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞生长抑制率;采用流式细胞术检测处理72 h后的细胞周期及凋亡情况;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法观察Apaf-1基因及甲基转移酶的mRNA水平;Western blot法检测Apaf-1蛋白的表达变化.结果 各浓度的5-Aza-CdR处理A549细胞后,A549细胞的生长均呈抑制状态,有时间和剂量依赖性.而流式细胞仪分析表明,各浓度的5-Aza-CdR作用72 h后,A549细胞的G0/G1期比例增加,S期比例明显减少,细胞凋亡率明显增加.RT-PCR结果显示,5-Aza-CdR处理组中DNA甲基转移酶的mRNA表达明显受抑,而Apaf-1基因的mRNA表达却明显增加.Western blot结果显示Apaf-1基因的蛋白表达明显增加,而阴性对照组中未观察到上述变化.结论 5-Aza-CdR可抑制A549细胞的生长,并通过抑制DNA甲基转移酶的表达而使Apaf-1基因在人肺腺癌细胞株A549中重新表达.