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目的探讨叉头盒蛋白A1(fork-head box protein A1,FOXA1)过表达对结肠癌SW480细胞增殖、凋亡及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)形成的影响,为结肠癌发生发展机制研究提供一定参考。方法收集南京医科大学第一附属医院2014-03-01-2016-10-31结肠癌手术切除癌组织及其配对正常组织标本各50例。体外培养结肠癌细胞SW480、T84、DIFI及人正常结肠上皮细胞NCM460,以随机数字表法分成空白对照组(CK组)、转染含慢病毒载体对照液的阴性对照组(NC组)和转染含FOXA1过表达慢病毒载体的FOXA1过表达(FOXA1过表达组)3组。采用qRT-PCR法检测细胞中FOXA1mRNA表达水平,采用MTT法检测细胞增殖,采用AnnexinⅤ/PI双染法检测细胞凋亡,采用流式细胞术法检测细胞周期,采用蛋白质印迹法检测细胞中FOXA1蛋白及EMT过程相关蛋白的表达。结果结肠癌组织FOXA1mRNA及蛋白表达水平分别为0.42±0.12、0.28±0.07,低于正常组织的1.11±0.24、0.98±0.21,t值分别为18.183、22.361,均P<0.05。结肠癌SW480、T84、DIFI细胞中FOXA1mRNA分别为0.11±0.02、0.14±0.03和0.15±0.03,蛋白表达水平分别为0.34±0.07、0.38±0.09和0.37±0.08,均低于正常上皮细胞的0.27±0.06、0.67±0.09,F值分别为10.259、10.385,P值分别为0.004、0.004;与CK、NC组比较,FOXA1过表达组结肠癌SW480细胞凋亡率(F=32.511)、G0/G1期细胞比例(F=8.860)、FOXA1mRNA(F=325.500)及其蛋白(F=39.670)、E-cadherin(F=37.507)、Cytokeratin蛋白水平(F=14.957)均升高,均P<0.05;24(F=22.407)、48(F=65.290)和72h(F=46.778)的A值、S期细胞(F=11.042)、G2/M期细胞比(F=6.139)、N-cadherin(F=20.746)、Vimentin(F=26.493)、Twist(F=11.024)、β-catenin蛋白(F=29.359)表达水平均降低,均P<0.05。结论过表达FOXA1能够抑制结肠癌SW480细胞增殖,诱导其凋亡,可能抑制结肠癌细胞EMT过程。 相似文献
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目的：探讨荧光原位杂交( fluorescence in situ hybridization, FISH)法在尤因肉瘤家族肿瘤( Ewing family tumor, EFT)石蜡包埋组织中检测EWSR1基因易位的可行性及其在临床病理学中的应用价值。方法收集4例EFT疑难病例,观察临床病理学特点,并采用EWSR1双色分离型探针检测EWSR1基因是否断裂。另以15例其他类型的软组织肿瘤作阴性对照。结果4例EFT 疑难病例的EWSR1基因均出现易位,对临床特点、病理学形态或免疫表型不典型的EFT 病例具有辅助诊断价值。结论 FISH 检测EWSR1基因易位可作为EFT 诊断的重要辅助依据,诊断时仍需结合病理形态学和免疫表型综合判断。 相似文献