造血干细胞冻存时间与细胞活性关系的初步探讨

目的　探讨造血干细胞冷冻保存时间与细胞活性之间的关系。方法　造血干细胞中加入细胞冷冻保护剂 ,通过程控冷冻 ,放入液氮保存。根据保存的时间不同 ,复苏后测定细胞活力的变化。结果　细胞液氮保存复苏后 ,绝大部分的细胞活力得以保存。结论　造血干细胞贮存在液氮中 ,深低温阻断了酶的活性和细胞代谢 ,贮存时间长短与细胞活性无关。     

免疫相关性全血细胞减少症患者骨髓Th细胞比例及功能变化

目的探讨免疫相关性全血细胞减少症（IRP）患者骨髓中辅助性T淋巴细胞（Th）亚群数量、功能改变及在发病中的作用。方法用流式细胞术同期对照研究16例正常对照组、15例初诊IRP组、24例再生障碍性贫血（AA）组、14例骨髓增生异常综合征（MDS）组骨髓Th细胞改变情况;RT-PCR方法检测10例正常人、25例初诊IRP患者、9例AA患者、9例MDS患者未经体外刺激的骨髓单个核细胞（BMMNC）中Th1细胞的代表因子IFN-γ、IL-2和Th2细胞的代表因子IL-4、IL-10的基因表达。结果（1）骨髓中Th1细胞、Th2细胞及Th1／Th2比值正常对照组为0．42％、0．24％和1．57;初诊IRP组为0．58％、1．95％和0．31;AA组为4．42％、0．41％和21．22;MDS组为0．44％、0．84％和0．96。IRP组Th1细胞与正常对照组及MDS组无显著差异（P〉0．05）,显著低于AA组（P〈0．01）;但IRP组Th2细胞显著高于正常对照组、AA组（P〈0．01）,与MDS组差异未达统计学意义（P=0．054）。IRP组骨髓中Th2细胞占优势,Th1／Th2比值显著低于正常对照组、MDS组及AA组（P〈0．01）。（2）与正常对照组比较,初诊IRP组Th2型细胞因子IL-4、IL-10 mRNA表达明显增高（P〈0．01）,而Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2mRNA表达无显著增高（P〉0．05）;AA组Th1型细胞因子显著增高（P〈0．01）,而Th2型无区别;MDS组未见细胞因子表达增高。结论IRP患者骨髓Th2细胞亚群增多,Th细胞平衡向Th2偏移,且Th2型细胞因子表达增高,细胞功能亢进,可能是IRP免疫发病环节之一,也表明IRP是一种不同于AA和MDS的全血细胞减少症。     

亚砷酸诱导人骨髓间充质干细胞凋亡的研究

目的研究亚砷酸（ATO）体外对人骨髓间充质干细胞（MSC）凋亡的影响。方法在正常人髂后上棘穿刺获得MSC,体外培养传代,取第3代细胞鉴定后进行实验。纯化的MSC与1、5、10μmol／L的ATO共孵育,分别在6、12、24h用HE染色观察细胞形态学变化,透射电镜观察细胞超微结构,流式细胞术（FCM）分析细胞凋亡情况。结果ATO可致MSC形态明显改变;不同浓度ATO对MSC作用24h可见不同阶段的凋亡细胞;FCM检测表明,ATO可诱导MSC凋亡,该作用随ATO浓度和作用时间增加而增强。结论ATO可在体外诱导MSC凋亡,并呈时间和浓度依赖性。