S100 mRNA在胰腺癌中的表达及其意义

目的 观察S100A4、S100A6、S100P mRNA在胰腺癌中的表达,探讨S100亚型的分布规律及与胰腺癌发生、发展的关系.方法 选取胰腺癌和癌旁正常胰腺组织各20例,用半定量RT-PCR方法检测S100A4、S100A6、S100P mRNA表达水平.结果 胰腺癌组织中S100A4、S100A6、S100P mRNA均为高表达,与癌旁正常胰腺组织比较,均具有显著性差异(P＜0.01).S100A4 mRNA的表达水平与胰腺癌的肿瘤分化、淋巴结转移及远处转移相关,与肿瘤大小无关;S100A6、S100P mRNA在胰腺癌中的高表达则与胰腺癌的临床病理特征无关(P＞0.05).结论 S100A4、S100A6、S100P与胰腺癌的发生有关,S100A4与胰腺癌的分化程度、淋巴结转移和远处转移有关,S100A6、S100P与胰腺癌的临床病理特征无关.     

胰腺癌细胞中血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA和蛋白的表达

目的　近年来的研究显示 ,血管紧张素Ⅱ 1型受体 (AT1)具有促肿瘤细胞生长和促进肿瘤血管生成作用 ,运用其拮抗剂则具有抑制肿瘤生长作用。对胰腺癌细胞中AT1mRNA和蛋白的表达进行探讨。方法　应用SW 1990、PaTu8988s和PANC 1胰腺癌细胞系。RT PCR方法检测胰腺癌细胞系中AT1mRNA的表达 ;分别用免疫细胞化学染色与SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)检测胰腺癌细胞系中蛋白的表达。结果　在 3个胰腺癌细胞系中均有AT1mRNA的表达 ;AT1蛋白表达位于细胞膜和细胞质内 ;蛋白电泳也证实 3个人胰腺癌细胞系中均有相对分子质量为 4 4× 10 3 的AT1蛋白的表达。结论　AT1在胰腺癌细胞生长中似乎发挥重要作用 ,抑制AT1可能是一种有用的治疗策略。     

络沙坦对大鼠急性坏死性胰腺炎肺损伤的保护作用

目的:研究络沙坦(Losartan)对急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠肺损伤的保护作用.方法:SD大鼠30只随机分为3组:正常对照组、ANP组、Losartan治疗组.采用大剂量精氨酸腹腔注射诱导ANP模型,治疗组于造模后30 min给予Losartan200 μg/kg,2次,每次间隔1 h.各组于造模后24 h处死大鼠,观察大鼠血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、肾素(PRA)、淀粉酶(AMY)、TNF-α、IL-1β、肺组织髓过氧化物酶(MPO)、肺湿/干重比值、胰腺/体重比值、胰腺和肺组织病理变化.结果:ANP组血浆AngⅡ、PRA、AMY、TNF-α、IL-1β、MPO、肺湿/干重比值、胰腺/体重比值较对照组明显升高;Losartan治疗组血浆AngⅡ、PRA较ANP组变化不明显,AMY、TNF-α、IL-1β、MPO、肺湿/干重比值、胰腺/体重比值较ANP组明显下降,胰腺和肺组织病理损伤明显减轻.结论:络沙坦对血浆AngⅡ、PRA无明显影响,可以减少TNF-α、IL-1β、MPO的产生,对ANP肺损伤具有保护作用.     

肿瘤相关基因Cap43在胰腺癌中的表达及意义

目的研究肿瘤相关基因Cap43在胰腺癌组织中的表达情况,探讨其对胰腺癌的诊断价值。方法收集1999年4月～2002年8月长海医院外科手术切除胰腺癌标本和癌旁正常组织33例,诊断均由病理证实。男性22例,女性11例,年龄30～73岁,平均58．1岁。所有组织标本按肿瘤、癌旁(正常)配对。采用RT-PCR和Northern杂交方法研究Cap43 mRNA表达情况。结果 RT-PCR结果显示,Cap43在肿瘤组织中表达显著上调,其在肿瘤组织和癌旁正常组织的扫描值分别为4 033±1 986和2 244±1 145,有显著差异(P<0．001)。Northern杂交亦显示Cap43在肿瘤组织中表达显著上调,相同病例的RT-PCR结果与Northern杂交的结果有较好的一致性,经回归分析,没有显著性差异(P>0．1)。结论 Cap43在胰腺癌组织中呈显著高表达,其有可能成为胰腺癌早期诊断的重要标志物。     

胰腺癌的基因不稳定性

目的分析胰腺癌细胞和组织的基因不稳定性. 方法应用RAPD方法7种引物扩增4株胰腺癌细胞株BxPC-3、AsPC-1、SW1990和PaTu8988,3例手术切除胰腺癌及其癌旁组织,1例正常胰腺组织的DNA片段.结果PaTu8988与SW1990扩增的DNA片段类型基本一致,但与BxPC-3、AsPC-1的类型不同;胰腺癌和癌旁组织扩增的DNA类型多数相同,少数存在差异,但与正常胰腺组织及胰腺癌细胞株不同.结论胰腺癌组织中存在着基因不稳定性,这是造成肿瘤异质性的基础.     

胰腺癌组织相关蛋白质分子的差异表达

目的用双向凝胶电泳的方法建立胰腺癌、癌旁组织和正常胰腺组织的蛋白质组二维图谱并分析差异蛋白质点。方法提取人正常胰腺组织、胰腺癌和癌旁组织总蛋白质，双向电泳分离蛋白，比较不同组织中蛋白质表达的差异。每份组织均重复电泳3次。结果在同一份组织的3张银染的凝胶蛋白质图谱上均可辨识1000个左右的蛋白质点，蛋白质点在形状、位置和密度上一致，重复性好。在不同组织之间发现了22个明显差异的蛋白质点，初步确定了其等电点和分子量。正常胰腺组织有一个高表达的蛋白质点，癌和癌旁组织有21个高表达的蛋白质点。结论正常胰腺组织、胰腺癌、癌旁组织蛋白质组二维图谱存在明显的差异，部分差异蛋白质可能具有诊断应用价值。     

人胰腺癌hedgehog信号转导途径中PTCH基因的克隆与鉴定

目的 克隆人胰腺癌hedgehog信号通路中PTCH基因,构建PTCH基因表达载体并诱导融合蛋白表达.方法 从人胰腺癌细胞株SW1990抽提总RNA,经R-PCR扩增出PTCH基因,经纯化、回收目的基因PTCH,将其插入表达载体PET22b,转化E.coliBL21-CodonPlusTM-RP,构建重组质粒PET22b/PTCH,IPTG诱导表达融合蛋白,免疫印迹进行鉴定.结果 从人胰腺癌细胞株SW1990克隆出长为789 bp PTCH目的片段,成功构建重组质粒PET22b/PTCH,并诱导表达目的蛋白.结论 构建重组质粒PET22b/PTCH,并表达PTCH融合蛋白,为制备PTCH多克隆抗体打下良好基础.     

胰管刷检细胞学及血清肿瘤标志联合检测对胰腺肿瘤的诊断价值

胰腺肿瘤的早期诊断和鉴别诊断非常困难,术前定性仍缺乏理想的手段,由于胰腺癌95%以上由胰腺导管上皮而来,故在行诊断性ERCP的同时结合胰管刷检(pancreatic duct brushing, PDB)细胞学诊断技术有助于提高胰腺癌的诊断正确率,本文探讨内镜下胰管刷检细胞学检查及肿瘤标记物检测对胰腺肿瘤的诊断价值。     

外科手术衣的屏障作用

早已认识到,血液常可穿透外科医生的手术衣,被内衣吸收,直接污染医生的皮肤,如某些血源性致病原HIV和HBV等。作者为此对11种广泛使用的手术衣进行了研究。试验用手术衣分多次使用(cloth 1、cloth2)和一次性使用(Spun-Lace1、Spun-Lace2和SMS)两种。采用单层(NR)、同种布料加固(FR)或无渗透作用膜加固(IR)三种方式试验。加固部位为手术衣前面和袖子。测试用压力装置由水囊、气囊、厚塑料板和支撑架组成。该研