Iressa治疗肺癌脑转移疗效观察

肺癌脑转移是肺癌治疗失败的常见原因，肺癌脑转移病人自然生存期仅1个月，采用全脑照射或立体定向放射治疗加全脑照射可使脑转移患者中位生存期提高至大约4～6个月，但仍然是肺癌死亡的主要原因。近年来，生物靶点治疗非小细胞肺癌（NSCLC）成为令人瞩目的一种新方法。Iressa又称ZD1839，是一种口服表皮生长因子受体一酪氨酸激酶（EGFR-TK）拮抗剂，是目前肺癌生物靶点治疗中较为成熟的药物。     

rAAV/HCV核心抗原基因转染树突状细胞的实验研究

目的:研究rAAV/丙型肝炎病毒核心抗原基因[hepatitis C virus(HCV)core gene]转染树突状细胞(dendritic cell,DC)的可行性。方法:构建重组质粒AAV(d16-95)/Core p5(简称rAAV/Core),并以pSH3包装系统制备该病毒。分离外周血单个核细胞(DC前体细胞),以rAAV/Core病毒转染DC前体细胞(基因转染组),采用巨噬细胞集落刺激因子、白介素-4、肿瘤坏死因子-α诱导成熟。3d后,收集部分DC,以流式细胞仪检测rAAV/Core转染效率及HCV核心抗原在DC中的表达情况。7d后,收集细胞,PCR/Southern blot分析rAAV/Core DNA在DC染色体的整合情况。显微镜下观察DC形态,流式细胞仪检测DC表面分子标志CD1a、CD40、CD80、CD83、CD86的表达情况。结果:rAAV/Core成功转染DC,质粒DNA整合到DC染色体上,HCV核心抗原基因在DC内表达,DC成熟不受病毒转染影响,具有典型DC外观并高表达特异的成熟DC表面标志。结论:rAAV/Core转染和制备DC的成功为丙型病毒性肝炎的DC免疫治疗打下实验室基...     

BA46基因转染树突状细胞治疗乳腺癌的研究

目的探讨以乳腺癌特异抗原删46基因转导树突状细胞（DC）治疗乳腺癌的可行性。方法取健康人外周血，采用密度梯度离心的方法分离外周血单个核细胞（DC前体细胞），以AIM-V培养基于6孔板培养，贴壁5h，轻轻洗去悬浮细胞（T细胞，冻存备用），取贴壁细胞，将细胞分为基因转染组及对照组，基因转染组感染携带翻46基因的重组腺相关病毒rAAV／BA46/Neo，对照组以293细胞冻融液刺激，两组细胞均采用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）、白细胞介素4（IL-4）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导DC前体细胞成熟。第7天，收集悬浮细胞（DC），显微镜观察细胞形态，流式细胞仪分析DC的表面标志CD80、CD86、CD40的表达情况；另取该DC与T细胞按1：20比例混合，含5％人血清蛋白的AIM—V为培养基，同时加入IL-2与GM—CSF，共育7d，诱导获得细胞毒性T淋巴细胞（CTL），取删46阳性的乳腺癌细胞株Hs578T为靶细胞，采用^51Cr释放法测量杀伤效率，同时以流式细胞仪检测CTL群体中CD8／CD4和CD8／CD56的比值。结果酗46基因转导的DC表面标志CD80、CD86、CD40的表达均明显高于对照组DC，所激活的T细胞对鲋46阳性的乳腺癌细胞株Hs578T有很好的杀伤效果，此杀伤具有抗原特异性和MHC限制性，且该T细胞中CD8／CIM和CD8／CD56的比值均明显高于对照组（细胞裂解物冲击DC所激活的T细胞）。结论删46基因转染成功制备DC，并诱导特异的CTL，为乳腺癌的DC基因转染疗法打下基础。     

血清TPS检测对于肺癌的临床应用价值

目的 :探讨血清组织多肽特异性抗原 (TPS)在肺癌患者血清中的表达水平及其对肺癌的临床应用价值。方法 :采用酶联免疫吸附法 ,测定 72例肺癌患者和 114例健康体检者的血清TPS、NSE和CEA水平。结果 :肺癌患者组的TPS、NSE和CEA的表达水平及检测阳性率均显著高于正常对照组 (P <0 0 0 1)。TPS检测阳性率显著高于NSE和CEA(P <0 0 1) ,TPS、NSE和CEA阳性率和浓度均随着临床分期的进展而升高。TPS在肺癌淋巴结转移最为敏感 ,而骨转移表达水平最高。肺癌患者经有效治疗后血清TPS、NSE和CEA水平均明显下降 ,尤其以TPS下降幅度较为显著。结论 :TPS是检出肺癌非常敏感的标志物 ,尤其是淋巴结转移患者 ,对乳腺癌早期诊断、病情判断和疗效评价等均有重要价值 ,而动态观察其水平的临床价值更为可靠。     

rAAV-AFP转染人外周血单核细胞来源树突状细胞增强免疫刺激功能

目的:探讨表达甲胎蛋白抗原的重组腺相关病毒rAAV-AFP转染对人外周血单核细胞来源树突状细胞(DC)免疫刺激功能的影响．方法:用rAAV-AFP转染新分离的DC;苔盼蓝拒染法检测每天的活细胞比率;流式细胞仪检测DC表面分子CD80,CD86,CD83,CD40, CD1a,HLA-DR及AFP的表达;并用3H-TdR掺入法检测转染前后DC刺激自体淋巴细胞增殖能力;MTT法检测DC诱导T细胞的杀伤活性．结果:成熟DC 77．7％表达AFP蛋白;转染对活细胞百分率和成熟DC表型无影响,与未转染组无显著差异(P>0．05);转染后DC仍保持较强的刺激自体淋巴细胞增殖的能力,与未转染组也无显著性差异(P>0．05),并且可诱导出特异性杀伤,效应细胞和靶细胞为80:1,40:1,20:1 时,与未转染组相比均有显著差异(35．5±5．5 vs 20．6±4．7;28．7±3．6 vs 15.3±2．5;16．2±2．8 vs 9．6±1．8;均P<0．01)．结论:rAAV可负载AFP基因在DC中表达, rAAV-AFP转染DC对其功能无明显影响,免疫功能更强．     

基因工程技术制备人源抗HBsAg抗体Fab片段

将从抗体文库中筛选出的抗HBsAg Fab阳性克隆转化大肠肝杆菌 ,IPTG诱导表达 ,经Western blot鉴定 ,证实上清中含有可溶性抗HBsAg Fab片段 ,应用自制的羊抗人免疫球蛋白片段抗体 (anti Fab )与Gama bind交联制备的亲和层析柱纯化表达产物 ,所得纯化产物在SDS PAGE中形成单一条带 ,经Western blot证实具备良好抗原特异性 ,Dot blot证实具备良好抗原结合活性。     

多西紫杉醇联合卡铂治疗激素抵抗性前列腺癌近期疗效观察

目的:探讨多西紫杉醇联合卡铂治疗激素抵抗性前列腺癌的应用价值。方法:12例前列腺癌患者,全部经去势手术及不同程度的抗雄激素药物治疗,经全身骨扫描证实均有多发性骨转移灶,颈部淋巴结转移和肝转移各1例,血PSA呈逐渐上升趋势。给予多西紫杉醇75mg/m2,第一天;卡铂AUC5(300～400 mg/m2),第一天;21—28天为一个周期。结果:12例随访2～26个月,平均17个月。入组后接受治疗1～6个周期。3例患者PSA值降至正常水平<4ng/ml,7例PSA值下降超过50%,有效率83.3%,有效患者PSA从治疗前(67.8±35.9ng/ml)下降至(14.2±5.7ng/ml),有效持续时间6～19个月,平均15.1个月。中位生存期为17.8个月。最常见的毒副反应为骨髓抑制,其余反应均可耐受。结论:多西紫杉醇联合卡铂治疗激素抵抗性前列腺癌有较好疗效,毒副反应可以耐受。     

rAAV/BA46转染树突状细胞诱导特异细胞免疫

目的 探讨以腺相关病毒为载体,乳腺癌抗原BA46基因转染树突状细胞(DC)诱导特异细胞免疫的可行性.方法 取健康人外周血,采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(DC前体细胞),将细胞分为基冈转染组及对照组,基因转染组以重组腺相关病毒rAAV/BA46/Neo转染,对照组以293细胞裂解物冲击.两组细胞均采用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导DC前体细胞成熟.第7天,收集DC,取该DC与T细胞按比例混合,诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL),用3H-TdR掺入法检测DC刺激自体淋巴细胞增殖能力;以流式细胞仪分析CTL细胞中IFN-γ、IL-4、CD4、CD8、CD25、CD69的表达情况,同时取BA46阳性的乳腺癌细胞株Hs578T为靶细胞,采用51Cr释放法检测杀伤效率.结果 BA46基凶转染组DC具备较强的刺激淋巴细胞增殖的能力,所诱导的CTL高表达CD8、CD69和IFN-γ,对BA46阳性的靶细胞有较强的杀伤作用,该杀伤具有BA46抗原特异性和MHC限制性.结论 乳腺癌BA46基因转染DC成功诱导特异的细胞免疫.为基因修饰细胞治疗乳腺癌打下实验室基础.     

留学生诊断学教学的体会与思考

医学诊断学是临床医学专业的一门重要的基本课程,为了提高留学生诊断学课程的教学质量,更好地达到培养目标的要求,根据以往的教学经验,就留学生诊断学教学中教师思想认识的提高、语言交流能力的培养、教材的选择、教学计划的制定、多种教学方式的灵活运用等方面进行了总结和分析,为今后进一步提高留学生诊断学教学质量打下基础。