藤黄微球菌Rpf及其结构域蛋白对结核分枝杆菌生长的影响

目的 表达纯化藤黄微球菌(Micrococcus luteus)复活促进因子(Rpf)及结构域(domain)蛋白,研究其对结核分枝杆菌牛长的影响.方法 诱导表达含有藤黄微球菌Rpf及其结构域基因的融合表达载体pPro-EXHT-Rpf和pPro-EXHT-Rpf domain,在变性条件下对目的 蛋白进行纯化.用不同浓度的纯化蛋白刺激不可培养状态结核分枝杆菌的生长.结果 获得藤黄微球菌Rpf及其结构域融合蛋白的纯度分别为95%和93%,相对分子质量(Mr)大小分别为30×103和12×103,蛋白质含量分别为471 mg/L和337 mg/L.Western blot证实,获得的蛋白为我们所需要的目的 蛋白.所获得的藤黄微球菌Rpf及其结构域融合蛋白能够促进不可培养状态的结核分枝杆菌的生长,而抗藤黄微球菌Rpf结构域的单克隆抗体可以明显抑制结核分枝杆菌的生长.结论 表达的藤黄微球菌Rpf及其结构域融合蛋白可以促进结核分枝杆菌的生长,而且藤黄微球菌Rpf蛋白与Rpf结构域蛋白具有一致的生物活性.     

Th1型细胞因子基因对结核分枝杆菌基因疫苗诱导BALB/c小鼠产生抗CFP10抗体水平的影响

目的：研究分别表达含IL—12和IL-18基因的质粒，对结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis，MTB)H37R1株CFP1O基因疫苗诱导免疫应答的影响。方法：从正常人外周血单个核细胞(PMBCs)中提取RNA，用RT—PCR扩增IL-18 cDNA，并克隆人载体pGEM—Teasy中。测序证实后，亚克隆至真核表达载体pcDNA3．1的BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ酶切位点。将分别表达小鼠IL—12和人IL—18基因的真核表达质粒pcmlL12和pclL18，与MTB CFP10基因疫苗联合肌注免疫BALB／c小鼠，共免疫3次，每次间隔2wk。每次免疫后2wk采血、分离血清，用ELISA检测小鼠血清抗CFP10抗体的滴度。结果：用RT—PCR成功地从人PMBC的RNA中扩增出IL—18 cDNA，测序结果正确，用BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ酶切鉴定证实，目的基因已插入载体pcDNA3．1中，阳性克隆命名为pcIL18。pcCFP10组第1次免疫后，血清抗CFP10抗体的平均滴度为1：600，末次免疫后的滴度为1：4000。pcIL18 pcCFP10组联合免疫后，血清抗CFP10抗体的滴度高于pcCFP10组，最终达1：8000。而pcmIL12 pcCFP10组联合免疫后滴度仅为1：200。结论：pcIL18与CFP10基因疫苗联合免疫，可增强CFP10抗原的特异性体液免疫应答；pcmIL12则可使CFP10基因疫苗产生的抗体水平降低。pcIL18 pcCFP10基因联合免疫是否具有增强CFP10抗原特异性细胞免疫的作用有待进一步研究。     

我院六年科技论文被CBMdiSC光盘收录结果分析

为了解我院科技论文发表交流概况、选用1994年1月～1999年12月CBMdisc光盘数据库对我院六年来被收录的科技论文数与同期在各类期刊发表论文数进行统计分析比较.结果,我院六年来共发表论文121表,其中被CBMdisc光盘收录46篇,录用率为38%,被收录的论文均有较高水平和一定的特色.     

人肝癌原位移植转移模型特性实验研究

目的　建立人肝癌细胞系HCC-9724(简称H)淋巴结转移模型,研究肿瘤转移机理。方法　采用裸鼠肝脏原位移植法,接种肿瘤细胞,取其淋巴结转移灶反复肝内接种,连续传三代后,观察其转移特性,采用SABC法测定淋巴结中nm23和Ⅳ型胶原酶表达。结果　裸鼠原位接种50d,肝内长出约1.7cm×6.0cm大小的肿瘤,呈分叶状,质地较软,周围血供丰富,瘤组织与邻近脏器粘连,有明显的浸润和转移,经裸鼠三次筛选后肿瘤潜伏期短(15d),瘤体大,形成广泛的肠系膜淋巴结转移,淋巴结中Ⅳ型胶原酶表达呈强阳性;而nm23呈弱阳性。结论　采用裸鼠肝原位移植法,反复筛选,获得了人肝癌淋巴结高转移模型。     

藤黄微球菌Rpf及其结构域蛋白对结核分枝杆菌生长的影响

目的 表达纯化藤黄微球菌(Micrococcus luteus)复活促进因子(Rpf)及结构域(domain)蛋白,研究其对结核分枝杆菌牛长的影响.方法 诱导表达含有藤黄微球菌Rpf及其结构域基因的融合表达载体pPro-EXHT-Rpf和pPro-EXHT-Rpf domain,在变性条件下对目的 蛋白进行纯化.用不同浓度的纯化蛋白刺激不可培养状态结核分枝杆菌的生长.结果 获得藤黄微球菌Rpf及其结构域融合蛋白的纯度分别为95%和93%,相对分子质量(Mr)大小分别为30×103和12×103,蛋白质含量分别为471 mg/L和337 mg/L.Western blot证实,获得的蛋白为我们所需要的目的 蛋白.所获得的藤黄微球菌Rpf及其结构域融合蛋白能够促进不可培养状态的结核分枝杆菌的生长,而抗藤黄微球菌Rpf结构域的单克隆抗体可以明显抑制结核分枝杆菌的生长.结论 表达的藤黄微球菌Rpf及其结构域融合蛋白可以促进结核分枝杆菌的生长,而且藤黄微球菌Rpf蛋白与Rpf结构域蛋白具有一致的生物活性.     

甲状腺肿的专家诊断与咨询系统

本文通过对１７４８３例甲状腺肿大中五种甲状腺病病例的收集、分析、整理、统计与提炼，确定了诊断原则，建立了知识库、病例库和正反双向混合推理机制，完成了用Ｔｕｒｂｏ－Ｐｒｏｌｏｇ语言编制。采用适用于表示医学产生式知识表示方法所开发的专家诊断与咨询系统，为教学、临床工作及家庭保健提供了有价值的软件。经临床病例验证，该软件准确、可靠、有很强的实用价值，对人工智能的研究、临床及教学的现代化，提高人们的保健水     

6-羟基多巴胺损毁单侧内侧前脑束和单侧纹状体的帕金森病大鼠模型早期和晚期行为学

目的 比较6-羟基多巴胺损毁单侧内侧前脑束（MFB）和单侧纹状体的帕金森病大鼠模型在不同时期行为学的差异。方法将62只成年雄性SD大鼠随机分为4组：1位点纹状体损毁模型组（n=18）、4位点纹状体损毁模型组（n=18）、MFB损毁模型组（n=18）和假手术组（n=8）。通过甲基苯丙胺诱导的旋转实验、溴隐亭诱导的旋转实验和步行实验比较损伤后早期（4周后）和晚期（6个月后）大鼠行为学的变化,并通过免疫组织化学和结合分析实验计算病灶侧阳性多巴胺神经元脱失率和多巴胺转运蛋白、D2受体结合率。结果 甲基苯丙胺诱发1位点纹状体损毁模型组、4位点纹状体损毁模型组和MFB损毁模型组大鼠均产生朝向病灶同侧的旋转;溴隐亭诱发纹状体损毁模型产生朝向病灶同侧的旋转,而MFB损毁模型组则产生朝向病灶对侧的旋转。成模早期和晚期不同模型组组间比较以及同一模型组中成模早期和晚期比较,旋转圈数的差异均无统计学意义。步行实验结果显示,同一模型组中,成模早期和晚期病侧肢体运动启动时间明显长于健侧肢体（P <0.001）,病侧肢体步长长度明显短于健侧肢体（P <0.001）,病侧肢体前后步伐调整数明显少于健侧肢体...     

老年人眼屈光状态临床研究

目的 探讨老年人屈光变化的规律,做好老年人视力保健。方法 标准照明下查56yr以上的老年人466只眼的远视力,扩瞳状况下采用带状光检影法验光并试镜矫正视力、查品状体混浊形态程度(LOCSⅡ分类法)、玻璃体和视网膜。结果 全组屈光不正456眼(98．28％)。56—75yr以远视居多,其中61—65yr比例最高,以后趋向减少,至75yr以后是近视多于远视状态。散光的患病率55．36％,其中不合例散光75．97％,并且比例随年龄的增长而增长。各年龄组矫正视力都有相当满意的提高。结论 老年人眼不合例散光居多是角膜老年性变化对眼屈光的影响,不属于晶状体性因素。高龄老年人近视状态的原因可能是核型老年性白内障的演变病程较长,所以,尚幸免行白内障除之高龄老年人以核型白内障居多而出现核性近视。屈光不正是最早和最普遍影响老年人视力的主要原冈,定期检查老年人眼屈光状态应作为眼科常规检查之一。     

国产吻合器在低位直肠癌保肛手术中的应用

目的 探讨国产吻合器在低位直肠癌保肛术中的应用价值。方法 用国产管状消化道吻合器行直结肠端侧吻合治疗８７例低位直肠癌患者,并对临床结果进行总结。结果 ８７例中肿瘤下缘距肛门≤６ｃｍ者３９例,≤８ｃｍ者４８例,肿瘤切除后直肠端长３．１ｃｍ,平均１．３ｃｍ。术后盆腔复发５例（５．７４％）,吻合口狭窄３例（３．４５％）,吻合口漏２例（２．３％）,均经保守治疗治愈。结论 采用国吻合器行直结肠端侧吻合低位保肛术治疗低位直肠癌具有损伤简单安全,费用低廉,吻合成功率高,并发症少,提高患者术后生活质量的优点。值得临床推广应用。     

乳腺癌ER,PR检测技术

目的：探讨ＥＲ、ＰＲ的最佳染色条件。方法：应用免疫组化Ｓ－Ｐ法,对乳腺癌进行ＥＲ和ＰＲ检查。结果：实验组：“１”的阳性率高于对照组“２”。结论：成功地显示ＥＲ和ＰＲ关键在于微波修复抗原及组织的固定时间和一抗的作用时间。