不同性别PyMT自发性乳腺癌小鼠成瘤特点和不同时间肺转移观察

[目的]研究不同性别自发性乳腺癌小鼠乳腺肿瘤病毒启动子(mouse mammary tumor virus, MMTV)控制下表达多瘤中间T抗原(polyoma middle T-antigen, Py MT)的转基因小鼠的致瘤特性,再以雌性小鼠为观察对象进一步研究血常规指标变化及肺转移情况等。[方法]准备同为8周龄的Py MT雌性小鼠和Py MT雄性小鼠,观察比较雌性与雄性小鼠肿瘤发病时间、生存时间与生存率;另取同为8周龄的雌性Py MT和雌性FVB小鼠,观察8周后取血进行血常规检测,并通过病理切片观察小鼠12周龄及16周龄时肺组织的病理变化。[结果]每周观测小鼠的形态学特征可发现雌鼠第8周可扪及肿瘤,而雄鼠则在第18周可扪及肿瘤;雌鼠最长生存时间是19周,雄鼠则为46周,即雌性小鼠肿瘤发病时间早于雄性小鼠,生存时间明显短于雄性小鼠。血常规指标检测显示,雌性Py MT小鼠白细胞及亚群(除单核外)数量明显高于FVB小鼠(P0.05,P0.001);雌性Py MT小鼠在12周龄开始出现肺转移,肺部大量炎症细胞浸润,16周时肺组织伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)染色发现明显的肺转移,出现弥漫性分布、大小不等、质实、染色深的癌巢,细胞间推挤或重叠,细胞大小形态不同。[结论] MMTV-PyMT自发性乳腺癌小鼠雌鼠发病比雄鼠早,生存时间短,具有实验周期短、便于观察肿瘤发生的优势,12周龄开始出现肺转移,16周龄肺转移明显,是适合用于筛选抑制肿瘤细胞浸润、转移等药物的乳腺癌动物模型。本实验还通过血常规结果、肺转移情况数据为实验动物性别的选择提供参考。     

Lewis大鼠肾阳虚体质及其HPA轴功能失衡

目的 对Lewis大鼠肾阳虚体质及其HPA轴功能进行研究。方法 采用氢化可的松皮下注射法和切除肾上腺损伤HPA法建立大鼠肾阳虚模型,同时Lewis大鼠与两种实验性肾阳虚模型进行比较,并用一般体征、行为学、神经内分泌功能等检测和方法评估Lewis大鼠肾阳虚程度。结果 与正常Wistar大鼠比较,Lewis大鼠体重明显重于同周龄的Wistar大鼠,但体温、尿量和抓力明显低于Wistar大鼠(P<0.01),Lewis大鼠的记忆能力有下降趋势,Lewis大鼠肝脏指数、肾脏指数和肾上腺指数明显降低(P<0.01),血清促肾上腺皮质激素(ACTH)、促肾上腺皮质释放激素(CRH)、环磷酸鸟苷(cGMP)、皮质醇(Cort)和尿17-羟皮质类固醇(17OHCS)明显降低(P<0.01)。结论 因基因遗传而致Lewis大鼠肾上腺皮质功能减退,Lewis大鼠具有先天性肾阳虚体质-临界性肾阳虚证或肾阳虚证前期。     

盐酸奥芬米洛对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴功能的影响

目的 观察盐酸奥芬米洛对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型大鼠的下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴)功能的影响.方法 以1.0 mg/kg盐酸奥芬米洛治疗EAE Lewis大鼠和肾上腺切除的EAEWistar大鼠,检测各组EAE Lewis大鼠和肾上腺切除的EAE Wistar大鼠的皮质醇水平,同时观察肾上腺切除的EAE Wistar大鼠的神经症状和Th1,Th2分泌型细胞因子水平.结果 1.0 mg/kg盐酸奥芬米洛可显著提高肾上腺切除的EAE Wistar大鼠的血清皮质醇水平(P＜0.01),可显著降低Wistar大鼠血清γ-干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)水平和IFN-γ/IL-4比值(P＜0.01).结论 盐酸奥芬米洛抑制EAE发生的作用途径可能是通过增强HPA轴的功能,提高大鼠皮质醇水平来抑制Th1分泌型细胞因子,从而调节Th1/Th2的失衡.     

双氢青蒿素对MRL/lprSLE小鼠CD4+T细胞基因组DNA甲基化水平的影响研究

目的探讨双氢青蒿素对MRL/lpr系统性红斑狼疮（SLE）小鼠CD4+T细胞基因组DNA甲基化水平的影响。方法从MRL/lprSLE小鼠脾脏获取CD4+T细胞,进行体外细胞双氢青蒿素干预培养。通过CCK-8实验检测双氢青蒿素的细胞毒性,高效液相色谱技术检测CD4+T细胞基因组DNA甲基化水平,RT-PCR和Westernblot检测CD4+T细胞DNA甲基化转移酶1（DNMT1）、生长阻滞和DNA损伤基因a（Gadd45a）mRNA和蛋白表达水平。结果双氢青蒿素对SLE小鼠CD4+T的半抑制浓度（IC50）为62滋mol/L。双氢青蒿素可抑制CD4+T细胞增殖,且随着浓度的增加,对CD4+T细胞增殖的抑制作用增强。双氢青蒿素干预后,CD4+T细胞基因组DNA甲基化水平显著升高;且双氢青蒿素浓度越高,基因组DNA甲基化水平越高。双氢青蒿素干预培养后,SLE小鼠CD4+T细胞DNMT1mRNA和蛋白水平均明显上调,而Gadd45amRNA和蛋白水平均明显下调,其作用与浓度有关。结论双氢青蒿素可能通过DNA甲基化调控机制发挥治疗SLE的作用。     

睡眠剥夺对大鼠抗氧化应激的影响及中药的干预作用

[目的]观察睡眠剥夺对大鼠饮食行为、能量消耗、体温和抗氧化能力的影响,探讨中药的干预作用及其抗氧化应激的机制。[方法]将雌性SD大鼠32只随机分为4组,即正常对照组、模型对照组、抗衰老片组、六味地黄丸组,每组8只,利用"小平台水环境法"建立大鼠睡眠剥夺模型,分别进行体温、体重、进食量和饮水量的监测,并计算日能耗,同时检测机体血清SOD活性和MDA含量。[结果]72h睡眠剥夺后,模型对照组大鼠体重、进食量和饮水量均明显低于正常对照组(P<0.05,P<0.01),日消耗能量和体温明显高于正常对照组(P<0.05,P<0.01),且机体血清SOD活性明显降低(P<0.01),MDA含量明显升高(P<0.01);进行抗衰老片和六味地黄丸干预后,均能有效预防睡眠剥夺后大鼠的体重、进食量、饮水量的降低,并能降低日消耗能量和体温,显著提高机体SOD活性(P<0.05,P<0.01),降低MDA含量(P<0.05,P<0.01)。[结论]睡眠剥夺可引起大鼠饮食行为的改变、耗能增加、体温升高,抗氧化应激能力下降。而抗衰老片和六味地黄丸等中药具有抗睡眠剥夺引起的氧化应激的作用,其机制可能与提高机体的抗氧化能力有关。