低氧培养的肝癌细胞中低氧诱导因子1的表达与血管生成和细胞凋亡相关蛋白的关系

目的:观察低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)在低氧培养的肝癌细胞中的表达变化,并初步探讨其与血管生成和细胞凋亡的关系.方法:将终浓度为125 μmol/L的氯化钴加入HepG2肝癌细胞培养液中模拟低氧环境,并设培养不同时间(0、1、2、4、6、8 h)组.(1)采用RT-PCR技术检测低氧培养不同时间的肝癌细胞中HIF-1α、VEGF、Caspase-3、bcl-2和bax mRNA的表达;(2)应用Western印迹方法及酶标免疫测量仪分别检测了各培养组细胞Caspase-3蛋白表达及Caspase-3酶活性.结果:(1)HepG2细胞在低氧培养1～2 h后,其HIF-1α、VEGF、bcl-2 mRNA的表达逐渐增加,在4 h达到高峰,随后下降,但仍高于低氧处理前水平;而bax mRNA表达无明显变化,bcl-2/bax比值与上述变化趋势一致.(2)Caspase-3 mRNA及蛋白的表达及酶活性变化趋势与HIF-1α正好相反.结论:HIF-1α可能通过调节VEGF、bcl-2、bax和Caspase-3的表达而抑制肝癌细胞凋亡,且这种抑制作用与缺氧程度有关.     

肾上腺转移瘤CT引导下乙醇消融治疗

目的:探讨CT引导下经皮穿刺无水乙醇消融术(PEI)对肾上腺转移瘤的治疗价值.方法:25例肾上腺转移性肿瘤,共计31个病灶.病灶直径1.5～7.2 cm.采用CT引导下无水乙醇瘤内注射进行治疗,治疗次数≥2次,治疗后1～2个月,行CT增强扫描,观察肿瘤大小、坏死情况.结果:PEI治疗后CT增强扫描复查,20个病灶直径≤3 cm的病灶18个(90%)完全坏死; 11个＞3 cm的病灶绝大部分坏死,经过再次重复治疗,2个病灶彻底坏死.结论:CT引导下经皮穿刺乙醇消融疗法治疗肾上腺转移瘤,疗效确切,且简便、创伤小.     

动脉压力感受性反射对盲肠结扎穿孔致脓毒症大鼠生存率的影响

目的：观察动脉压力感受性反射（ABR）对盲肠结扎穿孔（CLP）致脓毒症大鼠生存率的影响.方法：利用破坏反射弧的方法,将雄性大鼠依据反射功能高低分为两组：假手术大鼠（n=22）和去窦弓神经（SAD）大鼠（n=22）.用CLP致大鼠脓毒症模型,采用计算机化清醒大鼠血压连续监测技术,于CLP后动态监测大鼠的血压及心动间期,并观察大鼠12 h内的存活情况.结果：大鼠CLP后收缩压和舒张压随时间逐渐下降,而心动间期则先变短再急剧变长直至动物死亡.12 h后假手术大鼠的生存率为86%,而SAD大鼠的生存率为59%,两组大鼠Kaplan-Meier生存曲线存在显著差异（P＜0.05）.结论：ABR在CLP致大鼠脓毒症中起重要作用.     

Graves病患者甲状腺组织雄激素受体表达的研究

目的:考察Graves病患者血浆睾酮(testosterone,T)浓度以及其外周血白细胞和甲状腺组织中雄激素受体(androgen receptor,AR)水平,以探讨雄激素及其受体与Graves病的关系.方法:以8例女性Graves病患者、8例甲状腺腺瘤患者及8例配对的健康对照者为研究对象,采用酶联免疫分析法测定血浆T浓度,放射配体结合法检测患者外周血白细胞3H雄激素(T)特异结合位点,RT-PCR检测外周血白细胞AR的mRNA表达,免疫组织化学法检测甲状腺组织AR水平.结果:Graves病组和对照组血浆T浓度分别为(660±80) ng/L及(620±100) ng/L,组间无明显差异(P＞0.05);两组外周血白细胞 3H-T特异结合位点分别为(381±105)位点/细胞、(572 ±141)位点/细胞,组间差异显著(P＜0.05);Graves病患者外周血白细胞AR的mRNA表达量显著高于对照组(P＜0.05);免疫组化检测显示,Graves病患者甲状腺组织AR水平显著高于正常甲状腺组织(P＜0.01).结论:Graves病患者血浆T浓度较正常对照组无明显变化,但外周血白细胞AR的mRNA表达和甲状腺组织中AR水平均增高,考虑是机体保护性反应的调节.此外,也可能与病理情况下性激素结合能力下降、AR不能良好发挥生理效应相关.外周血白细胞中蛋白结合活性检测结果降低,推测是甲亢患者AR分解加速所致.     

磺脲类受体1基因多态性对磺脲类降糖药物作用的影响

目的:研究磺脲类受体1(sulphonylurea receptor 1, SUR1)基因上的常见单核苷酸多态性( single nucleotide polymorphism, SNP)16-3c/t和S1369A对格列齐特降糖作用的影响.方法:就诊于本院门诊的北方汉族2型糖尿病患者115名,服用格列齐特治疗8周(初始剂量40 mg bid,根据第15天和第29天空腹血糖值调整剂量,每次增加40 mg,最大剂量为120 mg bid).治疗前后分别检测空腹血浆血糖(fasting plasma glucose, FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、基础胰岛素、肝肾功等指标,计算HOMA-B和HOMA-IR指数,治疗期间定期进行随诊.用荧光水解探针技术检测患者SUR1 基因16-3c/t及S1369A多态性,比较不同基因型患者格列齐特疗效的差异.结果:(1)共有101例患者完成全部试验,其中16-3c/t多态性中c等位基因频率为0.56,t等位基因频率为0.44;S1369A多态性中S等位基因频率0.58,A等位基因频率为0.42;(2)各基因型患者经过治疗FPG、HbA1c、HOMA-B指数均明显改善(P＜0.05),HOMA-IR指数没有明显变化(P＞0.05);(3)16-3t/t患者HbA1c及HOMA-B指数的改善程度明显高于16-c/c及16-3c/t患者(P＜0.05),S1369A多态性的各基因型患者比较上述指标改善程度没有显著性差异(P＞0.05).结论:SUR1基因多态性会对格列齐特的降糖疗效起修饰作用,这种作用可能与SNP的位置有关.     

尾加压素Ⅱ及受体拮抗剂与糖尿病及肾脏病

尾加压素Ⅱ(urotensinⅡ,UⅡ)最早是自硬骨鱼的脊髓尾部下垂体中提取的一种生长抑素样环肽,它属于神经肽范围.后来证实其分布具有种属普遍性,从软体动物到哺乳动物的神经系统中均有存在.1996年,Coulouarn等从人体中克隆出UⅡ.随后,Ames等首次报道心血管组织中富含UⅡ,并且人体中有UⅡ的特异性受体,即一种孤立的G蛋白偶联受体(GPR14),主要分布于心血管系统与神经系统.UⅡ是迄今最强的缩血管肽,UⅡ与GPR14结合后引起一系列生物学效应,从而在国际上掀起了研究UⅡ的热潮.     

1-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-(2,4-二氟苯基)-3-芳氧基-2-丙醇的合成及抗真菌活性

目的:寻找高效抗真菌化合物,探讨三唑醇类化合物的构效关系.方法:根据三氮唑类抗真菌药物的构效关系和作用机制,设计合成了14个1-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-(2,4-二氟苯基)-3-芳氧基-2-丙醇类化合物,用微量液基稀释法测定化合物对白念珠菌、新生隐球菌、近平滑念珠菌、热带念珠菌、红色毛癣菌、羊毛状小孢子菌、薰烟曲霉菌和紧密着色真菌8种临床常见致病真菌的体外抑菌活性(MIC80).结果:以氧原子替代侧链中的硫原子后,侧链中含有邻位取代苯基的化合物的总体抗真菌活性不高,而侧链含有间位或对位苯基的化合物表现了很好的体外抗真菌活性.结论:间位或对位取代苯基的引入有利于此类化合物的抗真菌活性.     

上海多器官保存液保存离体大鼠肝脏的实验研究

目的:观察上海多器官保存液(Shanghai-mutil-organ solution,SMO液)对离体大鼠肝脏的保存效果,探讨应用SMO液保存离体供肝的可行性.方法:SD大鼠随机分为SMO液、UW液和HTK液保存组,建立离体肝脏单纯低温保存模型,保存液保存8、16、24、36 h分析肝脏组织能量代谢情况,观察肝组织形态学改变和肝脏细胞凋亡情况.结果:保存16、24、36 h,SMO液组肝组织三磷酸腺苷(ATP)、磷酸腺苷总量(TAN)及Atkinson能荷(AEC)均明显高于同时点HTK液组 (P＜0.05),与同时点UW液组无显著差异;形态学检查见SMO液组组织损伤较同时点HTK液组轻,除细胞肿胀较同时间点UW液组明显外,其余表现基本一致.保存24、36 h,SMO液组凋亡指数明显低于HTK液组(P＜0.05),而与UW液组无明显差异.结论:SMO液对大鼠离体肝脏的保存效果总体上与UW液相当,优于HTK液,仅在防止细胞水肿方面较UW液稍差.     

一侧多发性双侧肾上腺无功能腺瘤一例报告

1 临床资料 患者,男,49岁.健康体检时超声扫查意外发现右侧肾上腺占位性病灶,入我院手术治疗.术前再次超声检查发现右侧肾上腺有3枚明确的圆形低回声结节,大小相近,均在10 ～15 mm(图1A),左侧肾上腺也可见1枚椭圆形的类似低回声结节,略大.彩色多普勒血流显像(CDFI)显示双侧肾上腺结节均无明显的血流信号,增强超声造影(CEUS)提示双侧结节均无明显的增强效应(图1B),超声初步诊断为"双侧肾上腺无功能性皮质腺瘤,右侧呈多发性".随后的相关临床和实验室检查提示患者血压属正常范围内,无异常波动,血清钾、钙、磷测值均正常;促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇、醛固酮水平及分泌节律均属常态.血清肾上腺素、去甲肾上腺素及尿香草扁桃酸(VMA)检查均未进行.手术方案确定为先行右侧病灶腹腔镜下摘除,左侧随访观察.手术摘除标本证实右侧病灶为3枚,每枚结节的剖面均呈金黄色(图1C),肉眼观似分泌醛固酮为主的肾上腺皮质腺瘤.病理诊断:多发性肾上腺皮质腺瘤.     

高脂血症对移植前静脉内皮功能和组织形态的影响

目的:研究静脉移植前高脂血症对静脉内皮功能和组织形态的影响.方法:成年雄性健康家兔50只,随机分为对照组(普通饮食)和实验组(高脂饮食),每组25只;分别在实验前和喂养2周、4周、8周、12周末,采集血样本和获取颈内静脉标本,酶标法检测血脂水平.获取静脉标本前行超声多普勒检查观察其管壁厚度、管腔内径变化以及有无脂质或粥样硬化斑块等.免疫组化法检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达,硝酸还原酶法检测一氧化氮(NO)生成量,同时进行病理组织学检查.结果:(1)高脂喂养8周血脂升高异常显著(P＜0.01),并稳定于此较高水平,同时出现颈动脉脂质斑块.(2)高脂血症兔颈内静脉eNOS蛋白表达、NO生成量显著降低(P＜0.05),可见内皮剥脱、弹力纤维明显减少甚至消失,未见泡沫细胞和粥样斑块.结论:高脂血症可导致静脉内皮功能不全和组织形态学异常.