静脉皮瓣术后早期微循环重建的实验研究

静脉皮瓣在临床应用有成功的报道,但其成活机理尚不清。为了明确其机理,作者等用兔耳制成皮瓣模型,采用组织窗活体观察、微循环图像微机处理、微循环与心电同步观察、墨汁灌注活体观察等手段,研究了静脉皮瓣术后早期(7d)微循环的重建与灌注方式,发现术后2h即恢复了静脉血流,术后4h毛细血     

应用鼻翼软骨缝合技术矫正球形与方形鼻尖

目的　评价鼻翼软骨缝合技术矫正球形与方形鼻尖的效果。方法　采取“象鼻样切口” ,暴露鼻翼软骨。对两侧穹窿过度分离者 ,用“穹窿间缝合”技术减小穹窿间距 ;对穹窿弧过宽者 ,用“经穹窿缝合”技术缩窄穹窿弧宽 ;对穹窿过度分离和穹窿弧过宽同时存在者 ,联合应用上述两种缝合技术减小穹窿间距、缩窄穹窿弧宽 ;对“穹窿间缝合”后显得鼻尖过高者 ,用鼻翼软骨“外侧旋转技术”降低鼻尖 ;对伴有鼻梁低平者 ,同时行人工骨置入隆鼻术。结果　自 1995年以来 ,用上述技术矫正方形鼻尖 5例患者 ,球形鼻尖 19例患者 ,共 2 4例患者。其中 7例患者同时接受了隆鼻术。所有患者均对术后即刻效果满意 ,其中 14例患者得到 3～ 12个月的随访 ,效果稳定 ,无继发畸形发生。结论　鼻翼软骨缝合技术是矫正方形与球形鼻尖简单而有效的方法     

机械性血管吻合技术

由于传统针线吻合血管方法操作复杂 ,手术时间过长 ,机械性吻合方法便成为近年来世界注目的课题之一。现代机械性吻合概念产生于 2 0世纪 5 0年代 ,根据其原理 ,分为 4大类型[1,2 ] :①Ｕ形“订书钉”法 ;②套管法 ;③磁环法 ;④针环法。1　Ｕ形“订书钉”方法先驱者、前苏联专家Ａｎｄｒｏｓｏｖ[3 ] 于 195 6年连续报道两种关于“订书钉”吻合血管的方法 ,手术时将两血管断端外翻并对合在一起 ,用Ｕ形“订书钉”穿过外翻管壁后再压缩成Ｂ形 ,其吻合原理与现在的机械性肠吻合相类似[4] 。但该方法吻合时需将血管断端外翻 180° ,易造成吻合…     

微型吻合夹在吻合血管游离皮瓣移植中的应用

1998年～ 2 0 0 2年 1月我们采用非穿透吻合技术即微型吻合夹方法 ,行吻合血管的游离皮瓣移植术 2 2例 ,报道如下。1　材料与方法1 1　微型吻合夹及相关器械　微型吻合夹为钛 (Ｔｉ)合金属材料 ,由我科与上海钢铁研究所共同研制 ,形态呈Ｃ形。根据血管管径大小 ,吻合夹的Ｃ形内径分为 0 4、0 6、0 8ｍｍ 3种 ,分别用于管径 1 5、2 0、2 5ｍｍ以上的血管吻合。吻合夹的夹合程度能随着血管壁的厚薄进行调节。吻合夹由一特制持夹器挟持 ,持夹器前端为凹槽 ,吻合夹卡落在凹槽中央 ,具有较好的稳定性 ,便于精细的吻合操作 (附图 ,封 3)。1 2…     

脂肪干细胞通过EGFR/ERK通路减轻海水对表皮细胞增殖与迁移能力的抑制作用

目的 通过体外研究探索人脂肪干细胞（hADSC）促进海水浸泡创面愈合的可能机制。方法 利用人表皮细胞系HaCaT细胞和人工模拟海水建立海水浸泡创面导致细胞损伤的体外模型。从人脂肪组织分离、培养hADSC并进行鉴定,建立HaCaT细胞与hADSC共培养体系。利用活细胞计数试剂盒（CCK-8）、5-乙炔基-2’-脱氧尿苷（EdU）细胞增殖检测试剂盒与细胞划痕实验等评估HaCaT细胞增殖、迁移能力,并通过蛋白质印迹与实时定量PCR技术检测表皮生长因子受体（EGFR）/细胞外调节蛋白激酶（ERK）信号通路活化情况。结果 在添加了10%海水的培养液中,HaCaT细胞的增殖活力已受到明显抑制,与不添加海水培养的细胞相比差异有统计学意义（P<0.05）。利用成功分离的hADSC与HaCaT细胞共培养模型,发现添加10%海水培养的HaCaT细胞增殖与迁移能力均低于不添加海水培养的HaCaT细胞及与hADSC共培养且添加10%海水培养的HaCaT细胞（P均<0.05）,而不添加海水培养的HaCaT细胞和与hADSC共培养且添加10%海水培养的HaCaT细胞增殖与迁移能力差异无统计学意义（P>0.05）。添加10%海水培养的HaCaT细胞EGFR/ERK信号通路表达受到抑制,与不添加海水培养的HaCaT细胞及与hADSC共培养且添加10%海水培养的HaCaT细胞相比差异有统计学意义（P<0.05）;不添加海水培养的HaCaT细胞和与hADSC共培养且添加10%海水培养的HaCaT细胞EGFR/ERK信号通路表达差异无统计学意义（P>0.05）。结论 海水可阻碍EGFR/ERK信号通路的激活、抑制HaCaT细胞的增殖与迁移;hADSC可促进EGFR/ERK信号通路的激活,减轻海水对HaCaT细胞增殖与迁移能力的抑制作用。     

内眦赘皮的解剖成因探究

目的：探讨内眦赘皮的解剖成因。方法：选择性地解剖成年尸体头颅标本23具。结果：内眦赘皮者均存在睑部虎轮匝肌部分肌纤维的起点错位及走行异常。结论：睑部眼轮匝肌肌纤维的起始点及走行方向决定内眦部皮肤的形态。     

含人血红素氧化酶-1重组11P型腺病毒的构建及体外表达

目的构建含人血红素氧化酶-1重组11P型腺病毒,并使之转染人BJ细胞,测定其转染效率及目的蛋白表达情况。方法PCR目的基因序列,克隆成穿梭载体后转化大肠杆菌,扩增提取质粒,鉴定正确后与骨架载体重组,鉴定重组质粒正确并无野毒后在293细胞中扩增,CsCl密度梯度离心法纯化腺病毒。按不同梯度MOI值感染成纤维细胞,根据绿色荧光强度检测其转染效率。1周后用免疫组化方法检测目的蛋白HO-1表达情况。结果对重组腺病毒进行酶切和PCR鉴定,证实含人血红素氧化酶-1(HO-1)的11P型重组腺病毒构建成功,纯化后病毒滴度达到1.0×1010pfu/ml。通过免疫组化检测可在成纤维细胞中观察到胞浆内有棕褐色目的蛋白阳性颗粒表达。结论可以成功构建含人血红素氧化酶-1(HO-1)的11P型重组腺病毒并表达目的蛋白。     

微型钛血管吻合夹吻合血管的生物力学研究

目的从生物力学角度评价应用微型钛血管吻合夹吻合小血管的安全可靠性。方法对80只新西兰大白兔的双侧颈动脉一侧应用微型钛血管吻合夹行端-端吻合,另一侧行间断端-端缝合吻合作对照,测定术后第1h、7、14及30d离体血管吻合口的平均最大抗张强度和平均最大破裂压。结果术后7d内吻合夹法的吻合口最大抗张强度高于针线吻合法(P<0.05),14d后无统计学差异(P>0.05);术后30d内两种吻合法吻合口的最大破裂压无统计学差异(P>0.05)。结论从生物力学角度表明应用微型血管吻合夹吻合小血管是安全可靠的。     

自体脂肪移植治疗半侧颜面萎缩

目的:探讨自体颗粒脂肪移植在半侧颜面萎缩的临床效果,寻求半侧颜面萎缩治疗的有效方法.方法:采用肿胀吸脂技术获得自体颗粒脂肪,纯化后采用多层次、多隧道、多点的注射方法,修复颜面部凹陷畸形.对充填区体积稳定后凹陷尚未完全改善的患者,进行二次或多次脂肪颗粒移植手术,直至效果满意为止.结果:本组7例半侧颜面萎缩患者,充填后原凹陷部位丰满,基本达到形态对称.最长随访期2年,移植效果良好.结论:应用自体颗粒脂肪移植修复半侧颜面萎缩创伤小、并发症少、手术效果明显,相对现有其他治疗方法,是一种较为理想的治疗颜面部单纯软组织萎缩畸形的方法.     

微囊化血管内皮细胞生长因子基因修饰NIH3T3细胞的制备及体外培养

目的:制备微囊化血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因修饰NIH3T3细胞,并研究微囊化技术对VEGF基因修饰NIH3T3细胞增殖及其分泌VEGF功能的影响.方法:应用海藻酸钠-氯化钡技术制备微囊化VEGF基因修饰NIH3T3细胞,并与未微囊化VEGF基因修饰NIH3T3细胞对照培养,在倒置相差显微镜下观察微囊及细胞形态,用MTT法和PI染色流式细胞术检测细胞的增殖及活性情况.每48 h收集微囊化及未微囊化基因修饰NIH3T3细胞培养上清,-20℃保存,ELISA法检测培养上清VEGF的含量.结果:微囊形态较圆整,其内细胞生长良好;两组细胞增殖与活性及培养上清中VEGF含量无统计学差异.结论:微囊化并不影响基因修饰细胞的生长代谢功能,与对照组比较,在体外培养时生物学特性无明显差异,为研究微囊化基因修饰细胞体内移植奠定了基础.