实验性大鼠胃肠道功能紊乱模型的建立

目的利用利血平腹腔注射的方法制备实验性大鼠胃肠道功能紊乱模型。方法　大鼠腹腔注射利血平０．５ｍｇ·ｋｇ－１．ｄ－１, 连续１４ｄ,观察大鼠的食量、体质量、粪便变化情况。结果　利血平腹腔注射后的大鼠出现食欲不振、消瘦、便溏或便秘, 食量及体质量进行性下降,胃肠组织肉眼及光镜观察未见明显异常,透射电镜虽观察到胃肠粘膜有糜烂破溃状态,但无 器质性病变。血浆、肠液、下丘脑及空肠组织标本中胃动素含量均显著下降。结论　连续利血平腹腔注射的方法可以制备 大鼠实验性胃肠道功能紊乱模型。     

急性重度中毒致多器官功能失常综合征的对策探讨

急性重度中毒病人发病急、病情重、救治不及时可迅速发生多器官功能失常综合征（MODS）甚至死亡,一旦发生,病死率达30%-100%。急性中毒患者是否发生多器官功能失常综合征与毒物种类、毒物量、中毒程度=就诊及急救是否及时有关,本文结合文献资料与作者临床实践总结了急性重度中毒致MODS的特点与救治方法。     

真核绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C1/PAK-1的构建及其在结直肠癌SW480细胞内的表达

目的:构建重组p21-activated kinase-1(PAK1)基因绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C1/PAK1,并转染入结直肠癌细胞SW480中表达.方法:在南方医科大学附属南方医院消化研究所实验室,从人类结直肠癌细胞株SW620细胞提取总RNA,经逆转录聚合酶链式反应获得人PAK1 cDNA片段,经过限制性内切酶进行酶切,T4连接酶进行连接,将目的基因克隆至真核绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C1上,然后转染结直肠癌细胞株SW480,观察其在细胞中表达.结果:重组载体经限制性内切酶酶切鉴定和DNA序列分析验证,显示插入载体的序列与目的基因一致,而且该重组载体能够在SW480细胞中表达.结论:成功构建了真核绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C1/PAK1,为研究PAK1在结直肠癌中的生物学功能奠定了基础.     

PI3K p85α在大肠癌侵袭转移过程中的表达及意义

目的研究PI3K p85α在大肠癌侵袭和转移过程中的表达及意义。方法用免疫组织化学二步法检测试剂盒检测123例大肠病变组织标本中PI3K p85α的表达情况,用等级相关的秩和检验分析PI3K p85α在大肠病变组织中表达的意义及其与临床病理特征间的关系;培养已成功沉默PI3K p85α表达的大肠癌Lovo细胞(PI3K p85α/RNAi-Lovo)及Lovo对照组细胞,肿瘤细胞侵袭实验(transwell)和划痕愈合实验观察PI3K p85α对lovo细胞的侵袭和转移能力的影响,明胶酶谱检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达。结果 PI3K p85α蛋白在大肠癌癌变过程中表达阳性率呈递增趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。PI3K p85α/RNAi-Lovo细胞组侵袭和转移能力明显低于对照组;MMP-2表达量及活性显著降低。结论 PI3K p85α蛋白可能在大肠癌的侵袭和转移中起重要作用,沉默PI3K p85α基因可以显著抑制其侵袭、转移和基质金属蛋白酶的分泌及活性,因而PI3K p85α影响lovo细胞的侵袭和转移可能与调控基质金属蛋白酶分泌密切相关。     

PcDNA3.1(+)-MCP-1和PcDNA3.1(+)-Groα真核表达质粒的构建及鉴定

目的:构建并鉴定真核表达质粒pcDNA3.1(+)-MCP-1和pcDNA3.1(+)-Groα.方法:据GeneBank中大鼠MCP-1和GroαcDNA序列设计并合成引物,提取急性胰腺炎模型大鼠总RNA,RT-PCR扩增,并将扩增产物TA克隆至pGEM-T easy载体,然后分别双酶切pGEM-MCP-1和pGEM-Groα回收目的片段再克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+).结果:pcDNA3.1(+)-MCP-1和pcDNA3.1(+)-Groα真核表达质粒构建完成后,用限制性内切酶、PCR及DNA序列分析等多种方法进行鉴定,证实其构建成功.结论:pcDNA3.1(+)-MCP-1和pcDNA3.1(+)-Groα真核表达质粒构建成功,为进一步研究该真核表达质粒的免疫保护效果及制备急性胰腺炎pcDNA3.1(+)-MCP-1和pcDNA3.1(+)-Gro DNA疫苗奠定了基础.     

血浆神经降压素测定在胆石症时的临床意义

目的探讨血浆NT测定的意义及其临床价值.方法研究对象分为正常对照组和胆囊结石病人组,正常对照组再分为五个年龄组.受试者空腹静脉取血两次,然后进行试验餐,餐后第15min、30min、60min、120min各取血一次,分离血浆,采用放射免疫分析法测定血浆NT值.结果67名正常人空腹血浆NT值,试验餐后明显升高,其血浆NT反应曲线出现两次高峰,20-49岁组于餐后15min出现最高峰,而50岁以上组在餐后30min出现最高峰,两者的峰水平差值相差非常显著.23名胆石症患者空腹血浆NT值为15.39±1.94pmol/L,试验餐后血浆NT值均显著大于基础水平,其血浆NT反应曲线与正常人50岁以上组相似.正常人与胆石症患者血浆NT组比较,空腹及餐后各时间点血浆NT值均无显著差异,但有二分之一的病人餐后第二峰值显著大于对照组.结论脂肪对神经细胞直接刺激是NT释放的重要因素和条件,但不是唯一的;神经系统可能参与调节引起餐后早期NT浓度升高的反应,血浆NT浓度升高可能是部分患者之胆石形成的重要因素.     

三叶因子2基因治疗对实验性大鼠胃溃疡愈合影响的研究

目的探讨三叶因子2(TFF2)基因治疗对实验性大鼠胃溃疡的疗效及其机制。方法2005-06-10—2006-03-15南方医科大学南方医院消化病研究所将48只雄性Wistar大鼠随机分为2组,治疗组24只,对照组24只。治疗组每只应用pcDNA3.1g TFF2100μg,对照组每只应用等容积pcDNA3.1g TFF2100μg,均在造模时经胃壁浆膜下注入。用药后分别在第3、7、14天处死动物,测量大鼠胃溃疡指数、胃总酸度及黏液糖蛋白量的变化。结果在应用pcDNA3.1g TFF2的第3天,治疗组和对照组比较,各项指标差异无统计学意义(P>0.05);第7天,治疗组的黏液糖蛋白量显著增加,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。第14天,治疗组的溃疡面积显著缩小,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);治疗组黏液糖蛋白量有所下降,不过与对照组比较差异也有统计学意义(P<0.05);而治疗组的胃总酸度变化不大,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论TFF2基因治疗对实验性大鼠胃溃疡愈合有促进作用,增加胃黏液糖蛋白的分泌是其促进溃疡愈合的机制之一,而与抑制胃酸分泌无关。     

四君子汤治疗实验脾虚证对胃肠粘膜细胞增殖动力学的影响

引言长期以来，氚标记的胸腺嘧啶（３ＨＴｄＲ）常用于细胞动力学的研究，但由于３ＨＴｄＲ有放射性，限制了它的应用．５溴脱氧尿嘧啶核苷（ＢｒｄＵ）与胸腺嘧啶具有结构的相似性，能代替胸腺嘧啶掺入Ｓ期细胞新合成的ＤＮＡ链内．近年来进一步证实，３ＨＴｄＲ...     

非溃疡性消化不良与胃肠激素关系的研究概况

非溃疡性消化不良 (ＮＵＤ)亦称功能性消化不良 ,是临床常见的一种综合征。根据临床表现可分为五种亚型 :运动障碍样消化不良、溃疡样消化不良、反流样消化不良、吞气症和特发性消化不良。ＮＵＤ的病因和发病机制尚不明确。自从190 2年Ｂａｙｌｉｓｓ和Ｓｔａｒｌｉｎｇ发现促胰液素以来 ,至今陆续发现的胃肠激素已达 40余种。胃肠激素可以通过内分泌、神经分泌和旁分泌等方式 ,调节消化系统的运动、分泌、吸收及细胞营养功能。许多胃肠激素还存在于中枢神经系统 ,故又将这些肽类激素称为“脑肠肽” ,它们可在中枢水平直接参与对摄食、睡眠…