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目的 利用CRISPR/Cas9基因编辑技术建立miRNA敲除小鼠模型.方法 根据miRNA基因序列,设计针对miR-301a的gRNA引物序列(双靶点),PCR扩增获得针对miR-301a的体外转录模板DNA和构建Cas9体外转录模板,然后进行Cas9和gRNA体外转录.利用体外转录的gRNA/Cas9 mRNA对小鼠受精卵显微注射,并利用T7E1酶切和基因测序对miR-301a突变进行检测和鉴定.结果 PCR扩增、凝胶电泳和基因测序鉴定证实,获得序列正确的用于体外转录的模板DNA;体外转录获得gRNA/Cas9 mRNA,顺利完成对小鼠受精卵的显微注射;利用T7E1酶切对miR-301a突变进行检测,发现8只新生小鼠中有7只(87.5%)被鉴定在miR-301a位点携带突变;基因测序结果显示,各小鼠均有不同程度的碱基插入或缺失突变,其中缺失碱基数目最多的4号小鼠产生31个碱基缺失.结论 成功建立miR-301a基因高效敲除小鼠模型. 相似文献
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肿瘤微环境(TME)的形成直接介导了肿瘤进展和转移,加剧了癌症患者的死亡风险。靶向TME成为癌症患者治疗的关键。免疫检查点抑制剂(ICIs)临床获益明显,是通过重塑肿瘤免疫微环境抑制肿瘤转移的成功示例,但其面临着不良反应事件、耐药和多数癌症患者响应率不佳等难题。中医对肿瘤的治疗着眼于人的整体,中药具有多靶点、多组分、多方位作用的特点,可通过逆转免疫抑制、减轻炎症微环境、重塑TME代谢等方式干预肿瘤转移的全过程,在克服耐药、预防转移、提高患者生存质量、延长生命等诸多方面发挥了不可忽视的作用。 相似文献
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南江地区乙型肝炎与肝癌的相关性研究储峰主任医师季青,严润民,陆梅,周幼雯,王水南,许凯黎,陆维上海市南江县传染病医院(201300)南江地区是上海市肝癌高发区,年死亡率为25.053/10万,我院1983~1992年收治病毒性肝炎13352例,其中乙... 相似文献
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我院自1986年12月至1988年2月收治流行性出血热(EHF)患者238例,对其中36例作TXB_2及6酮-PGF_(1α)检测,80例采用强力宁治疗。现将临床观察及检测结果报告如下。材料与方法一、一般资料:本组病例均系我院住院患者,男168例,女70例,男女之比为2.4:1, 相似文献
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本文用强力宁治疗80例流行性出血热发热期病人,经对照观察表明,强力宁治疗EHF,具有退热快、越期疗效高、血尿素氮上升幅度小、肾功能损害轻且恢复快、合并症少等良好效果,且无副反应。 相似文献
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目的为探索一种更为简便、快速、特异、灵敏的肾综合征出血热(HFRS)抗体的检测方法。方法 458例HFRS病人血清同时采用免疫滴金法(CGIDA)与酶联免疫吸附法(ELLISA)对比检测特异性免疫球蛋M抗体(抗HV-IgM)、免疫荧光法(IFAT)对比检测特异性免疫球蛋G抗体(抗HV-IgG)并以20例发热待查、48例病毒性肝炎血清作对照。结果 458例HFRS病人血清,以CGIDA法检测抗HV-IgM,阳性358例,与ELLISA法作结果评价时,CGIDA灵敏度80%,特异度100%;以CGIDA法检测抗HV-IgG,阳性386例,与IFAT法作结果评价时,CGIDA灵敏度91%,特异度100%。结论 CGIDA法检测HFRS特异性抗体分别与ELLISA法及IFAT法对照,均有简便、快速、特异、灵敏之优点,检测抗HV-IgM,CGIDA法敏感性差于ELLISA法,但是无假阳性;检测抗HV-IgM,CGIDA法的灵敏度高于IFAT法。 相似文献
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