新型Topo I抑制剂CPUY013对胃腺癌细胞BGC823的体内外作用

探讨CPUY013在体内外对人胃腺癌BGC823细胞的抗肿瘤活性及其机制。采用MTT法、克隆原形成法检测CPUY013对BGC823细胞增殖的抑制作用；体外实验以pBR322 DNA为底物，依据质粒的松弛和超螺旋形式在琼脂糖电泳上泳动度对药物抑制解旋的作用进行定性分析。用AO/EB荧光染色技术、DNA凝胶电泳及JC-1线粒体膜电位检测试剂盒检测细胞凋亡。口服给药CPUY013后观察其对裸鼠移植瘤的生长抑制作用；用流式细胞术观察CPUY013对BGC823细胞周期的影响；采用Western blotting分别检测CPUY013处理后的BGC823细胞中Topo I及凋亡相关蛋白表达的改变。结果表明，CPUY013呈明显的剂量依赖性抑制BGC823细胞的增殖。随着剂量的增加，CPUY013对Topo I松弛活性的抑制趋势增强。100 μmol·L^-1 CPUY013 和拓扑替康(TPT)对Topo I松弛活性的抑制呈现相似的变化趋势。CPUY013可使大部分BGC823细胞阻滞在S期，并诱导细胞凋亡；出现DNA片段化，亚G1峰显著增加，线粒体膜电位降低，荧光染色后出现凋亡细胞的特征性改变等。同时，CPUY013能明显抑制BGC823裸鼠移植瘤的生长，150 mg·kg^-1剂量组的瘤重抑制率为62.1%。CPUY013使BGC823细胞内Topo I和bcl-2蛋白表达均有所下调， p53和bax蛋白表达有明显上调趋势， bcl-2/bax比值明显降低， caspase-3蛋白表达增高。新型Topo I抑制剂CPUY013在体内明显抑制移植瘤的生长， 体外可诱导细胞凋亡从而抑制BGC823细胞增殖， 其机制可能与抑制Topo I， 从而下调bcl-2，上调bax和p53蛋白的表达有关。     

红景天苷对运动疲劳大鼠红细胞膜的影响

目的：研究红景夭苷对运动疲劳大鼠红细胞膜的影响。方法：以力竭游泳为运动模型，比较大鼠游泳存活时间的长短。观察力竭游泳后大鼠红细胞膜唾液酸、丙二醛、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶变化。结果：红景天组大鼠游泳存活时间明显延长，大鼠运动后的唾液酸、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶增加，丙二醛含量降低。结论：红景天苷能显著减少运动对大鼠红细胞膜的损伤，提高运动疲劳大鼠的耐力，其机理与降低运动疲劳大鼠红细胞膜结构的改变及纠正红细胞自由基代谢失衡有关。     

青龙衣多糖对H22型肿瘤细胞ATP酶活性的影响

目的：以H22肿瘤细胞为试验对象，采用体内试验，探讨青龙衣多糖是否可以影响ATP酶活性。方法：实验共设5个组，即阴性对照组（生理盐水组），阳性对照组（5-氟尿嘧啶组），青龙衣多糖低、中、高剂量组。整体水平观察青龙衣多糖的抑瘤和生命延长作用；按照测定无机磷含量的方法对H22肿瘤细胞的Ca^2＋-AT-Pase、Na^＋K^＋-ATPase和Mg^2＋-ATPase活性进行了测定；用荧光偏振法测定荧光偏振度值和微粘度研究细胞膜脂的流动性；采用化学比色法测定荷瘤小鼠H22肿瘤细胞的唾液酸含量。结果：青龙衣多糖高、中、低剂量组具有显著的抑瘤作用（P〈0．05），其中高剂量组抑瘤率达41．10％；同时青龙衣多糖具有明显的生命延长作用（P〈0．05），高剂量组生命延长率达75．00％。青龙衣多糖低、中、高剂量组可以抑制H22肿瘤细胞的Ca^2＋-ATPase的活性，抑制Mg^2＋-ATPase的活性；抑制降低H22肿瘤细胞膜的流动性；降低H22细胞膜表面唾液酸含量。结论：青龙衣多糖体内给药具有显著的抑瘤作用，显著抑制H22肿瘤细胞的ATP酶活性，影响其所转运的离子在细胞内外的空间分布。导致膜电位下降，物质转运受阻，细胞渗透压升高，细胞裂解，也可引起细胞凋亡容积下降，诱导凋亡的发生，膜流动性和唾液酸含量下降，可以影响ATP酶的结构活性和离子转运，这几方面的协调作用，可能是青龙衣多糖体内给药具有显著的抑瘤作用的机制之一。     

大孔吸附树脂对川芎中阿魏酸及总酚酸的分离纯化*

目的:研究D-101大孔吸附树脂分离纯化川芎中阿魏酸及总酚酸的工艺条件及参数。方法:以阿魏酸及总酚酸的吸附容量和洗脱率为考察指标,研究大孔吸附树脂分离纯化的吸附性能和洗脱参数。结果:D-101大孔树脂对阿魏酸的吸附容量为4．93mg·g~(-1),对总酚酸的吸附容量为51．3mg·g~(-1);洗脱率阿魏酸为96．3％,总酚酸为96．7％。终产品中总酚酸的含量可达51．7％。结论:采用本法分离纯化川芎中阿魏酸及川芎总酚酸是可行的。     

大孔吸附树脂法对天麻中天麻苷和总苷的分离纯化

目的：研究AB-8大孔吸附树脂分离纯化天麻中天麻苷和天麻总苷的工艺条件及参数。方法：以天麻苷和天麻总苷的吸附量和洗脱率为考察指标，研究大孔吸附树脂分离纯化的吸附性能和洗脱参数。结果：AB-8树脂对天麻苷吸附容量为7．32mg·g^-1、对总苷吸附容量为16．25mg·g^-1，洗脱率分别为天麻苷96．77％、天麻总苷96．25％，终产品中天麻总苷的纯度可达18．96％。结论：采用本法分离纯化天麻中天麻苷和总苷是可行的。     

涂膜剂的研究与应用概况

涂膜剂是用有机溶媒溶解成膜材料和药物而制成的适合于治疗皮肤病、口腔病及骨科疾病等的外用剂型,比较适于中药复方制荆。通过查阅文献,对涂膜剂的涵义、特点、成膜材料、制备工艺与质量控制、临床应用等情况进行综述。     

野西瓜多糖诱导人肝癌HepG2细胞凋亡的实验研究

目的观察野西瓜多糖诱导人肺癌HepG2细胞凋亡作用。方法通过MTT法测定野西瓜多糖对HepG2细胞的细胞毒作用;倒置显微镜观察野西瓜多糖对HepG2细胞形态的影响;AO/EB双染,激光共聚焦扫描显微镜观察野西瓜多糖对HepG2细胞形态的影响;PI染色法,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果MTT结果显示野西瓜多糖对HepG2细胞有抑制作用,IC50为471.53mg/L;倒置显微镜、激光共聚焦扫描显微镜下观察细胞形态,表现为细胞皱缩、碎裂、甚至出现凋亡小体;流式细胞术检测到野西瓜高剂量组凋亡率为74.926%。结论野西瓜多糖具有诱导HepG2细胞凋亡的作用。     

野西瓜挥发油对HepG-2细胞线粒体膜电位和Ca2+浓度的影响

目的:探讨野西瓜挥发油(Canpoparis spinosa L.essential oil,CSEO)对人肝癌HepG-2抑制生长和诱导凋亡作用及其机制.方法:MTT法研究CSEO对入肝癌HepG-2的抑制生长;荧光显微镜观察HepG-2细胞形态:流式细胞仪研究CSEO对HepC-2细胞周期的影响及诱导凋亡作用,罗丹明123单染观察CSEO对线粒体膜电位的改变;激光共聚焦显微镜检测CSEO对HepG-2细胞内Ca2 浓度的影响.结果:CSEO对人肝癌HepG-2细胞生长具有明显的抑制作用,并且有剂量依赖性,IC50为127.5μg·mL-1;CSEO作用48 h后,HepG-2细胞在出现特征性凋亡形态特征,300 μg·mL-1组的凋亡细胞比率高达44.447%;75和150 μg·mL-1下出现G1期细胞阻滞,S期细胞比例下降,G2期细胞比例下降的趋势;CSEO各组线粒体膜电位(△Ψm)有所降低,表现为曲线相左移行,此外,中、高浓度的CSEO还可以显著增加细胞内Ca2 浓度.结论;CSEO对人肝癌HepG-2有明显的抑制生长和诱导凋亡作用,其机制可能与线粒体膜电位降低和钙超载有关.     

甲苯二异氰酸酯致小鼠睾丸脂质过氧化损伤及标志酶活力的变化

甲苯二异氰酸酯（toluene diisoeyanate，TDI）是公认的工业致敏原，其致职业性哮喘作用早已得到人们的重视。因而国内外的研究多集中在其对呼吸系统的损伤方面，对TDI的雄性生殖损伤研究较少。为了探讨TDI对雄性生殖系统的致毒机制，本研究以呼吸道染毒的小鼠睾丸为对象。观察了睾丸组织细胞抗氧化能力及睾丸标志酶的变化。     

海嘧啶对肿瘤细胞内[Ca~(2 )]_i的影响

目的　揭示海嘧啶诱导肿瘤细胞凋亡的机制。方法　采用激光扫描共聚焦技术观察海嘧啶对肿瘤细胞内[Ca2 ]i 的影响及 [Ca2 ]i 变化时 Ca2 的来源 ,采用定磷法测定海嘧啶对肿瘤细胞膜钙泵活性的影响。结果　海嘧啶可显著升高肿瘤细胞内 [Ca2 ]i 的浓度 ,[Ca2 ]i 升高时 ,Ca2 同时来源于细胞外钙内流和细胞内钙释放。海嘧啶可显著降低肿瘤细胞膜钙泵活性。结论　海嘧啶通过升高肿瘤细胞内 [Ca2 ]i 的浓度 ,从而启动肿瘤细胞凋亡机制 ,诱导肿瘤细胞凋亡 ;海嘧啶升高肿瘤细胞内的作用是通过开放肿瘤细胞膜钙通道、引起肿瘤细胞内钙库释放、降低肿瘤细胞钙泵活性 3条途径达到的。