EBV—DNA检测在儿童EB病毒感染中的临床意义

目的探讨荧光定量PCR检测EB病毒（EBV）对诊断和治疗EBV感染的临床意义。方法应用荧光定量聚合酶链反应病毒核酸扩增方法,对儿科2010—06～2012—06以发热为主诉的患儿205例,检测外周血EB病毒DNA栽量,结合常规外周血及异型淋巴细胞检查,对照首发临床表现,分析荧光定量PCR检测发热患儿感染EBV的临床价值。结果205例发热患儿中,外周血EBV—DNA阳性42例,阳性率20．5％。荧光定量PCR检测EB病毒能早期反映EBV感染。结论荧先定量PCR检测EBv—DNA有助于早期诊断EBV感染,能减少诊疗的盲目性,对临床有一定指导意义。     

围术期目标导向液体治疗用于老年高危患者的研究

目的 评价围术期目标导向液体治疗用于老年高危患者的优越性.方法 50例行择期全髋关节置换术的老年患者,随机分成传统液体治疗组(C组)和目标导向治疗组(GDT组),每组25例.C组以MAP和CVP为指导进行围术期液体管理,GDT组以每搏量(SV)和氧供指数(DO2 I)最大化进行围术期液体管理.观察和比较两组患者围术期液体出入量、MAP、HR、SV和CI等参数.结果 GDT组总输液量、 晶体液和胶体液的输注总量均高于C组(P<0.05);GDT组各时点MAP、HR、SV和CI高于C组(P<0.05),与基础值比较,GDT组无变化,而C组在麻醉后和应用骨水泥后,MAP、HR、SV和CI一过性下降(P<0.05).结论 与传统围术期液体管理方案相比,以SV和DO2 I最大化为目标的GDT方案用于高危病人全髋置换手术,能使心脏前负荷处于更理想的充盈状态,血流动力学更稳定,并能有效预防骨水泥引起的循环抑制作用.     

腹腔镜胆囊切除联合肝囊肿开窗术

本文总结我院开展腹腔镜胆囊切除术联合肝囊肿开窗术经验.采用回顾性的研究方法,对20例胆囊结石并肝囊肿的病人的临床资料进行分析,采用LC后,先穿刺,再切开,切除部分囊壁,电凝囊内壁,大的囊肿用大网膜填塞的方法治疗肝囊肿.除一例术后因为囊肿液体的刺激所致的腹部隐痛外,其他效果良好,认为对胆囊结石需要行LC者,肝囊肿不大(＜10cm)而且在肝表面,用检验和物理检查排除寄生虫性肝囊肿,肝癌肿瘤中心液化,肝内胆管囊性扩张症以外,在进行LC的同时行肝囊肿开窗术,以解除肝囊中继续增大对肝脏压迫的后患.对囊肿大,位置深,不能肯定为单纯肝囊肿的病人建议行开腹手术治疗,以防胆漏,血管损伤.对囊肿小的(＜5cm)位于肝深面的病人可以观察.     

子宫内膜癌组织中p16 mRNA及P16蛋白的表达

①目的　探讨抑癌基因 p16与子宫内膜癌发生、发展的关系。 ②方法　应用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)和免疫组织化学技术 ,对 4 2例子宫内膜癌及 15例正常子宫内膜组织中 p16mRNA及P16蛋白进行检测 ,并结合临床病理特征进行分析。③结果　子宫内膜癌组织中p16mRNA及P16蛋白的阳性表达率分别为6 9.0 5 %和 5 9.5 2 % ,显著低于正常组织 (χ2 =6 .0 15、8.6 2 5 ,P <0 .0 5 )。p16mRNA及P16蛋白的表达缺失与肿瘤的组织学类型无关 (χ2 =0 .10 0、0 .2 94 ,P >0 .0 5 ) ,而与组织学分级和临床分期有关 (χ2 =3.95 4、6 .873,P <0 .0 5 )。④结论　p16mRNA和P16蛋白的表达缺失在子宫内膜癌的发生和发展中可能起重要作用     

TLR9-1486和TLR9-2848基因多态性与胃癌易感性关系

目的 探讨Toll样受体9(TLR9)编码基因TLR9-1486和TLR9-2848位点多态性以及EB病毒(EBV)感染与胃癌易感性的关系。方法 选取131例胃癌病人为研究对象,包括43例EBV相关胃癌(EBVaGC)和88例EBV阴性胃癌(EBVnGC),同时随机抽取66例健康人外周血标本作为对照。采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测TLR9基因-1486位点T/C和-2848位点G/A多态性。结果 TLR9-1486T/C位点多态性分析显示,胃癌组和对照组3种基因型分布和等位基因频率比较差异无显著性(P>0.05);EBVaGC组和EBVnGC组中各基因型分布和等位基因频率差异也无显著性(P>0.05);与携带T等位基因者相比较,C等位基因携带者胃癌和EBVaGC发病风险无明显升高趋势。TLR9-2848G/A位点多态性分析显示,胃癌组和对照组3种基因型分布和等位基因频率差异无显著性(P>0.05);EBVaGC组和EBVnGC组中各基因型分布和等位基因频率差异也无显著性(P>0.05);与G等位基因携带者比较,A等位基因携带者胃癌和EBVaGC易感性无明显升高。结论 TLR9-1486和TLR9-2848位点多态性与胃癌易感性无关,且在EBVaGC发生中与EBV感染无协同关系。     

锁定动力髋螺钉加空心钉治疗不稳定股骨粗隆间骨折临床分析

目的探讨锁定DHS加空心钉治疗不稳定型股骨粗隆间骨折的手术方法及临床疗效。方法2005年1月至2010年1月采用锁定DHS加中空钉治疗不稳定型股骨粗隆间骨折53例。结果53例经过6～24个月随访，平均随访15个月，骨折全部愈合。其中优49例，良3例，差1例，手术治疗优良率为98％。结论锁定DHS加空心钉联合内固定是治疗不稳定型股骨粗隆间骨折的有效方法。严格掌握手术适应证，选用合适内固定器材，采用标准技术操作，术后正确的采复治疗，也是提高疗效、减少并发症的关键。     

靶向LMP1基因siRNA作用对AP-1及其相关因子表达的影响

背景与目的: 潜伏膜蛋白LMP1是EBV基因组BamH I Nhet片段上BNLF1编码的一种跨膜蛋白,它是发现最早的能在体外恶性转化细胞系的EBV潜伏期蛋白.本研究旨在探讨LMP1沉默对AP-1信号转导通路及其下游与细胞转化、增殖和凋亡等相关冈子转录表达的影响.方法: 应用50 nmol/L靶向LMP1功能区编码序列的siRNA649转染EBV阳性的胃癌上皮细胞GT38,分别作用24、48、72、96、120 h,采用RT-PCR检测c-Jun,生存素,CDK4和MMP9 mRNA转录水平:免疫组化法检测细胞生存素蛋白表达;Western印迹法检测c-Jun,JunB和CDK4蛋白表达.结果: 靶向LMP1特异性siRNA作用后,各时间点c-Jun和生存素mRNA水平均明显低于细胞对照组(P＜0.05),c-Jun以24 h时降低最为明显,而生存素以48 h时降低最为明显;CDK4 mRNA水平均明显高于细胞对照组(P＜0.05);转染后24、48、72 h时MMP9 mRNA表达水平均明显低于细胞对照组(P＜0.05),96 h和120 h时MMP9则无明显改变(p＞0.05).与细胞对照比较,c-Jun和JunB蛋白表达均下调,JunB蛋白表达往作用第5天时有所恢复,CDK4蛋白表达均上调.免疫组化检测结果显示转染后细胞质中代表生存素阳性的棕色颗粒明显减少.结论: 靶向LMP1功能区编码序列的siRNA转染可影响EBV阳性胃上皮细胞AP-1及其下游相关因子的表达,进而抑制细胞增殖,促进细胞凋亡.     

真核细胞内外源性HPV16 E7癌基因表达及其对cdc25A及Cyclin E表达的影响

背景与目的:人乳头状瘤病毒(HPV)感染及其引发的抑癌基因功能丧失和细胞周期调控失调是宫颈癌发病的重要因素。HPV16诱发宫颈癌的机制主要与其两个早期开放读码框架E6、E7转化基因密切相关。HPVE6、E7引起细胞生长和增殖异常,同时伴有Cyclin A、Cyclin D1、CDK4等细胞周期蛋白的表达异常。本研究采用体外基因转染技术将HPV16 E7基因转入靶细胞,通过对目的基因瞬时表达的检测,进而观察在E7病毒癌蛋白的影响下调控G1/S检验点的几种细胞周期调节蛋白的表达,以探讨HPV16型E7基因外源性表达对子宫颈癌HeLa细胞细胞周期调节因子cdc25A及细胞周期蛋白E(Cyclin E)的影响。方法:从宫颈癌标本中经PCR扩增回收HPV16 E7基因片段,将其插入腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV,与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1构建重组腺病毒基因组Ad-E7。用脂质体介导Ad-E7导入包装细胞人胚肾细胞系HEK-293细胞,包装出完整腺病毒颗粒。测定病毒上清液滴度,感染体外培养的HeLa细胞。采用RT-PCR方法检测转染前后HeLa细胞cdc25A的mRNA表达的差异;激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测转染前后Cyclin E表达的差异。结果:荧光显微镜下,转染后HEK-293细胞和HeLa细胞表达绿色荧光蛋白。RT-PCR结果显示转染后,HeLa细胞cdc25A的mRNA含量较转染前显著增加[感染前灰度值0.23±0.10,感染后0.87±0.22(P<0.01)],LSCM检测结果显示转染后Cyclin E表达较转染前明显增加。结论:重组腺病毒可以成功介导外源性HPV16 E7基因在HeLa细胞内表达,HPV16 E7基因促进HeLa细胞周期调节因子cdc25A和Cyclin E的表达。     

AT1R基因与人类疾病的相关性研究

肾素血管紧张素系统(RAS)对机体心血管系统的调节、水盐平衡以及内环境自稳态的维持有重要作用。近十年来,对RAS系统的深入研究使人们逐步认识到,内分泌、旁分泌组织自分泌的RAS在各个组织、器官中发挥着重要的病理生理作用。RAS中自底物血管紧张素原经级联反应,由肾素及血管紧张素工转换酶作用后形成终产物血管紧张素Ⅱ,后者主要通过G蛋白偶联血管紧张素Ⅱ的工型受体(AT1R)发生生物学效应。1 ATIR的理化特性血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)是RAS的主要活性肽,作用于An-     

原发性输卵管癌20例临床分析

目的 探讨原发性输卵管癌的临床表现及其诊断。方法 回顾性分析江西省妇幼保健院1991～2002年间手术治疗的20例原发性输卵管癌患者的临床表现、超声检查结果和血清CAl25水平，与手术病理结果进行比较，基本手术方式为全子宫、双附件、部分大网膜切除＋盆腔淋巴结清扫术。结果 患者平均患病年龄为57．45岁，70％发生于绝经后，90％有阴道出血，80％有阴道排液，80％同时有阴道出血和阴道排液。超声检查94．1％（16／17）可探及盆腔肿块，彩色多谱勒血流显像检查92．3％（12／13）可探及丰富血流信号，肿块内平均血流阻力指数（RI）为0．5，范围0．44～O．56。血清CAl25水平测定78．6％（11／14）高于35mlU／ml。结论 原发性输卵管癌主要表现为阴道出血、排液，超声声像图可探及盆腔肿块，肿块内可探及低阻力的丰富血流，血清CAl25可明显增高。上述表现有助于临床原发性输卵管癌的诊断。