黄芩及葛根芩连汤中黄芩的代谢规律研究

目的:探索不同提取条件下复方葛根芩连汤中黄芩代谢规律,并与黄芪单味药的代谢规律相比较。阐明配伍的科学性,探讨仿生提取法的优越性。通过药代研究,指导复方配伍及工艺研究。方法:检测给药动物血浆中黄芩苷含量的变化,得到其代谢规律。经过对药物代谢规律研究,比较不同剂型、复方与单味药中黄芩苷代谢规律的不同。结果:得到黄芩及不同提取方法中葛根芩连汤中黄芩的代谢规律,证实了复方配伍的科学性、新工艺的优越性。     

开窍通腑汤对MCAO大鼠脑组织内皮生长因子蛋白表达的影响

1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 动物 选用Wistar大鼠,雌雄各半,体重240 g～290 g,4月龄未曾交配,辽宁中医药大学实验室动物中心提供. 1.1.2 药物 开窍通腑汤(自拟方,由冰片、大黄、水蛭、川芎、牛膝、白茅根、石菖蒲等组成)由辽宁中医药大学附属医院药剂科提供;安脑丸由黑龙江路神集团制药有限公司生产,国药准字H32025394. 1.1.3 仪器及试剂 血管内皮生长因子(VEGF)试剂盒(北京博奥森生物技术有限公司);Chemi Imager 5500凝胶电泳成像分析系统.     

蕲蛇药材高效毛细管电泳指纹图谱的研究

目的:建立蕲蛇药材高效毛细管电泳(HPCE)指纹图谱。方法:以20mmol/L硼砂-0.2mol/L硼酸(pH8.4)作为背景电解质缓冲液,柱温25℃,运行电压19kV,245nm波长处检测,25min内完全分离。结果:建立的指纹图谱中共有7个共有峰,且方法学考察达到标准。结论:该方法具有良好的精密度和分离效果,可作为蕲蛇药材的质量控制方法。     

基于相关性分析的气滞胃痛颗粒挥发油促肠动力谱效关系研究

目的 探讨气滞胃痛颗粒挥发油促肠动力的谱效关系,为气滞胃痛颗粒的质量控制提供实验基础。方法 建立气滞胃痛颗粒挥发油GC-MS指纹图谱;采用半固体糊炭末推进法,以小肠推进率为指标测定挥发油促肠动力的药理药效,灰色关联度分析结合偏最小二乘回归法建立特征指纹峰与促肠动力药效的谱效模型。结果 8个不同配伍组指纹图谱中有44个共有峰,其中辛醛、D-柠檬烯、顺-葛缕醇、香芹酮、cypera-2,4-diene、β-朱栾、香附烯、β-古巴烯、桉油烯醇、6-isopropenyl-4,8a-dimethyl-1,2,3,5,6,7,8,8a-octahydro-naphthalen-2-ol为潜在药效物质。结论 本研究为确定气滞胃痛颗粒复方促肠动力药效质控指标成分提供实验依据。     

麦冬有效组分的提取工艺及组分与药效相关性分析

目的 对麦冬总皂苷的提取工艺进行优化,并对正交实验结果和体外药效结果进行相关性分析,通过两者的相关性证明麦冬总皂苷为麦冬中治疗冠心病的主要成分.方法 以麦冬总皂苷为指标,采用正交设计对提取过程中溶媒量、提取时间、提取次数三个因素进行估选研究,优选工艺条件,并采用心肌细胞Na2S2O4缺氧/复氧模型,考察细胞存活率,通过SPSS软件对正交实验结果和细胞药效进行相关性分析.结果 麦冬乙醇提取的最佳条件为:12倍量的50％乙醇提取3次,每次1h,通过药效学试验和相关性分析,表明两者呈显著相关性.结论 通过正交设计优化了麦冬提取工艺,经体外药学验证,并通过相关性分析,证明了麦冬总皂苷为麦冬治疗冠心病的主要成分.     

白茅根水提物对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞周期及细胞凋亡的影响

目的 研究白茅根水提物对人肝癌细胞株SMMC-7721增殖抑制率、细胞周期及细胞凋亡的影响.方法 采用MTT法研究白茅根水提物对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制率及抑制率与时间剂量关系;并通过PI染色法和Annexin V-EGFP/PI双染法研究白茅根水提物作用于人肝癌细胞株SMMC-7721后细胞周期DNA含量变化及对细胞凋亡率的影响.结果 不同浓度的白茅根水提物处理肝癌SMMC-7721细胞24,48,72,96 h后,均呈现出显著的细胞增殖抑制作用,抑制作用具有明显的时间-剂量-效应关系,差异有统计学意义(P＜0.05);细胞周期与细胞凋亡实验结果显示不同浓度的白茅根水提物处理肝癌SMMC-7721细胞46 h后可显著增加肝癌细胞凋亡率,差异有统计学意义(P ＜0.001),作用36 h后,可增加S期比例同时降低G2/M期细胞比例,差异有统计学意义(P＜0.001).结论 白茅根水提物对人肝癌细胞株SMMC-7721具有明显的增殖抑制作用并可诱导其凋亡,该作用是通过抑制C2/M期细胞比例,将细胞周期阻滞在S期实现的.     

延胡索提取工艺的优化及化学成分与药效指标相关性分析

目的针对延胡索抑制肝癌细胞的作用,结合正交设计法,优选延胡索中延胡索乙素、原阿片碱的提取工艺条件,并对2种生物碱与药效学指标的相关性进行分析。方法采用正交设计法,以延胡索乙素提取率、原阿片碱提取率、SMMC-7721细胞抑制率和出膏率为评价指标,对延胡索中2种生物碱的提取工艺条件进行优选;应用SPSS 13.0统计软件进行Pearson相关系数分析。结果最佳提取工艺为6倍量70%乙醇回流提取2 h,延胡索中2种生物碱的提取率最高,对肝癌细胞的抑制率最高。结论该方法快速、操作简便,可以为确定延胡索中2种生物碱定量测定方法提供实验依据。     

关节镜下有限清理术治疗老年膝关节骨性关节炎的疗效分析

目的 探讨关节镜下有限清理术治疗老年膝关节骨性关节炎的疗效.方法 对2004年3月～2006年7月该院采用关节镜下有限清理术治疗老年膝关节骨性关节炎患者61例的临床疗效进行分析.结果 61例获得随访,随访时间13～40个月,平均随访27个月.疗效评价:优21例,良19例,可15例,差6例,优良率迭65.7%.结论 严格掌握关节镜下有限清理术治疗老年膝关节骨性关节炎的手术适应证.进行有限清理是治疗老年膝关节骨性关节炎取得良好疗效的关健.     

鸡血藤总黄酮对HeLa细胞周期和凋亡及相关因子VEGF-A、Caspase-3表达的影响

目的:评价鸡血藤总黄酮对宫颈癌细胞HeLa细胞周期和凋亡及VEGF-A、Caspase-3含量的影响,为鸡血藤用于抗子宫癌提供实验依据。方法:设定不同浓度的鸡血藤总黄酮,用MTT法筛选出合适的给药浓度以及给药时间。运用流式细胞仪将不同浓度的鸡血藤总黄酮作用于HeLa细胞,测定细胞周期与凋亡。运用ELISA试剂盒,测定鸡血藤总黄酮对HeLa细胞分泌Caspase-3、VEGF-A的影响。结果:通过MTT法最终选定药物浓度为2.00、1.45、0.70 mg/m L为最佳浓度,36 h为最佳时间。与空白对照组比较,鸡血藤总黄酮各组细胞G0/G1期、S期比例及早凋与晚凋比例显著升高,VEGF-A分泌量显著降低,Caspase-3分泌量显著升高。结论:鸡血藤总黄酮对宫颈癌细胞HeLa有显著的增殖抑制作用。     

高效液相色谱法对大川芎片中5种成分的含量测定

目的 本研究通过运用高效液相色谱法建立大川芎片的特征图谱,并对洋川芎内酯Ⅰ、绿原酸、洋川芎内酯A、香草酸、阿魏酸5种指标性成分进行含量测定.方法 本试验采用Agilent Poroshell SB-C18色谱柱(4.6 mm×100 mm,2.7 μm),流动相0.02%甲酸水(A)-乙腈(B)溶液梯度洗脱,检测波长280 nm,流速0.8 mL·min-1,柱温30 ℃,记录时间40 min,对同一厂家10批次大川芎片进行含量测定.结果 本试验初步建立了大川芎片的高效液相特征色谱图,指标性成分洋川芎内酯Ⅰ、绿原酸、洋川芎内酯A、香草酸、阿魏酸均达到基线分离,其线性范围分别为3~48 nL(r=0.999 9),0.062 2~0.995 5 μg(r=0.999 8),0.3~4.8 nL(r=0.999 9),0.026 6~0.426 2 μg(r=0.999 9),0.016 9~0.270 7 μg(r=0.999 7).加样回收率均在95%~105%之间,精密度、稳定性、重复性均良好.结论 以洋川芎内酯Ⅰ、绿原酸、洋川芎内酯A、香草酸、阿魏酸为指标性成分对大川芎片进行含量测定,该方法准确、重现性好,可以全面地反映大川芎片质量,为大川芎片质量控制奠定基础.