基于等基线多波长覆盖融合的红花多成分定量方法研究

目的:以等基线多波长覆盖融合技术为基础的红花多成分含量测定方法,对红花药材进行质量控制。方法:采用高效液相色谱法,Agilent TC-C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相为0.4%磷酸水-乙腈线性梯度洗脱,流速1.0mL/min;柱温25℃;DAD检测器波长为327nm、360nm和380nm,使用Matlab软件编程,对三个波长下的dif格式数据进行等基线多波长覆盖融合。结果:本方法各主要成分色谱峰之间有良好的分离度,羟基红花黄色素A、咖啡酸、芦丁和山奈酚分别在1.007～1.922μg/mL、0.0551～0.0772μg/mL、0.133～0.253μg/mL、0.0342～0.0652μg/mL范围内呈良好的线性关系。结论:该方法简便、合理、可靠、重复性好,可用于红花药材的质量评价。     

延胡索提取工艺的优化及化学成分与药效指标相关性分析

目的 针对延胡索抑制肝癌细胞的作用,结合正交设计法,优选延胡索中延胡索乙素、原阿片碱的提取工艺条件,并对2种生物碱与药效学指标的相关性进行分析。方法 采用正交设计法,以延胡索乙素提取率、原阿片碱提取率、SMMC- 7721细胞抑制率和出膏率为评价指标,对延胡索中2种生物碱的提取工艺条件进行优选;应用SPSS 13.0统计软件进行Pearson相关系数分析。结果 最佳提取工艺为6倍量70%乙醇回流提取2 h,延胡索中2种生物碱的提取率最高,对肝癌细胞的抑制率最高。结论 该方法快速、操作简便,可以为确定延胡索中2种生物碱定量测定方法提供实验依据。     

正交设计法对舒咽止痛喷雾剂制备工艺的研究

目的:通过正交试验法考察舒咽止痛喷雾剂的水提制备工艺。方法:以绿原酸作为考核指标,通过L9(34)正交试验设计考察水提的制备工艺条件,确定舒咽止痛喷雾剂的最佳水提工艺。结果:水提制备工艺影响因素大小依次是:加水量(A)>煎煮次数(C)>煎煮时间(B),最佳制备工艺条件为A2B1C2,即处方药材加12倍量水,煎煮1h,煎煮2次。结论:筛选出最佳的水提工艺。     

薏苡仁中酯类化学物质组提取工艺研究

目的：明确薏苡仁中酯类化学物质组的最佳提取工艺。方法：采用正交试验法,分别对溶剂量、提取时间、提取次数进行考察,应用高效液相色谱法以薏苡仁中酯类化学物质组的含量为指标进行分析,同时结合出膏率考察最佳提取工艺。结果：薏苡仁中酯类化学物质组最佳提取工艺为采用6倍量丙酮提取1次,提取30 min。结论：最佳工艺条件能充分有效地提取薏苡仁中酯类化学物质组。     

药物筛选微流控芯片的构建及其在花蕊石抗肝癌研究中的应用

目的构建一种集成有微阀结构的双层PDMS-玻璃复合芯片,考察其适用性并研究花蕊石生品、制品水煎液对肝肿瘤细胞Hep G2凋亡坏死的影响。方法制作双层微流控芯片并考察微阀的性能,同时进行了Hep G2细胞的培养,死活试剂盒检测细胞活力。将预制备的不同浓度花蕊石生品、制品水煎液通入微流控芯片,分别作用于Hep G2细胞24、48和72 h,凋亡坏死试剂盒检测Hep G2细胞凋亡坏死率。结果芯片微阀性能良好,可灵活控制液阀的开关且未表现出明显的延迟现象。细胞在芯片中生长状态良好,培养72 h期间细胞存活率≥97%。药物作用细胞后,发生凋亡坏死的细胞数量随给药浓度的升高、给药时间的延长而增加,呈现出一定的时间与浓度依赖性,且制品水煎液的效果好于生品。结论实验证明了花蕊石生品、制品水煎液对肝肿瘤细胞Hep G2具有促凋亡作用,也进一步验证了本实验室设计的芯片在细胞研究和药物筛选方面的可行性,为微流控芯片在中药抗肿瘤新药开发领域中的推广与应用提供理论依据。     

消化性溃疡的研究进展

消化性溃疡是临床常见的消化性疾病之一,发病率、复发率均较高。临床上根据消化性溃疡的发病机制、病理特点、临床表现不同,其治疗方案也有所不同,并且中医与现代医学对消化性溃疡的认识及治疗也各有不同。随着中药事业的不断发展,利用现代科学技术的理论、方法和手段对中药复方的药效物质、作用机制以及质量控制进行系统研究,为实现中医药现代化提供了新思路。笔者通过阅读近几年来有关消化性溃疡的相关文献,对消化性溃疡的研究进展作一综述,为消化性溃疡的有效治疗以及相关药物的研究提供参考。     

基于微流控芯片技术建立缺血再灌注心肌损伤模型

基于微流控芯片技术建立体外大鼠缺血再灌注(I/R)心肌细胞损伤模型并验证其适用性,该模型为研究各种心血管药物以及新药快速、有效筛选提供基础。本实验采用软光刻技术和模塑法制作一种扇形微流控芯片,芯片中培养心肌细胞并进行细胞活力检测,通过缺血台氏液建立I/R损伤模型;利用瑞氏-吉姆萨染液检测模型中心肌细胞形态变化;通过ELISA试剂盒检测模型中损伤指标含量变化;最后采用心肌损伤治疗药物葛根素验证该I/R损伤模型的适用性。实验结果表明,芯片中心肌细胞活力接近98%以上;与空白组相比,I/R损伤模型中心肌细胞发生明显凋亡变化,损伤指标CK-MB、LDH蛋白分泌量显著增加;葛根素组与模型组比较,细胞凋亡形态缓解,CK-MB、LDH蛋白分泌量显著降低,I/R损伤模型的适用性良好。基于微流控芯片技术建立的体外大鼠I/R心肌细胞损伤模型成功,本研究为微流控芯片技术在心血管修复新药开发领域开拓一种新思路和新方法。     

应用基因表达谱芯片研究中药复方对心肌梗死的药效机制

目的:麝香保心丸、双龙方等具有益气活血的中药复方均可有效治疗心肌梗死,该文以麝香保心丸、双龙方为研究对象,从基因表达的角度探讨该类中药复方治疗心肌梗死的药效机制。方法:建立大鼠左冠状动脉结扎心肌梗死模型,药物干预7 d后取心肌梗死区边缘缺血组织,建立基因表达谱,筛选治疗前后的差异表达基因,进行生物信息学分析,同时采用RT-PCR对芯片数据进行验证。结果:两种益气活血方干预后,大鼠心肌组织的基因表达谱发生改变,筛选得到224个共有的差异表达基因,涉及能量代谢相关的甘油三磷酸脱氢酶活性、糖酵解/糖质新生等通路。结论:心肌梗死是一种多基因表达异常的心血管疾病,益气活血中药在发挥其治疗作用时,对224个共有差异表达基因具有相似调节作用,且主要通过改善大鼠心肌能量代谢异常,达到治疗心肌梗死的作用。     

地榆活性组分指纹图谱建立及多指标成分含量测定研究

目的 采用超高效液相（UPLC）建立地榆Sanguisorba officinalis L.活性组分指纹图谱及没食子酸、儿茶素、阿魏酸3种成分含量测定方法,为地榆活性组分质量控制方法研究提供参考。方法 采用Agilent Poroshell 120 C₁₈色谱柱（2.7μm, 4.6×100 mm）,以1‰甲酸水-乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速0.8 mL/min,柱温30℃,检测波长210nm,建立不同产地地榆活性组分指纹图谱;采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012.130723版本）进行相似度分析,同时测定了不同产地地榆活性组分中3种成分的含量。结果 地榆活性组分指纹图谱中共标定了15个共有色谱峰,并指认出其中3种色谱峰,相似度评价结果显示8种不同产地地榆活性组分化学成分相似度较好,均在0.94以上;指标性成分含量测定结果显示,3种成分在一定质量浓度范围内线性良好,方法精密度、重现性良好,样品20 h内稳定,加样回收率在95%～105%之间。结论 本研究建立的指纹图谱结合多指标成分含量测定方法,简便、准确、稳定,可为地榆活性成分的质量控制及新药开发提供实...     

基于相关性分析的中药路路通抗肝肿瘤谱效关系研究

目的 基于灰色关联法及偏最小二乘法探讨中药路路通不同极性部位对人肝癌细胞SMMC-7721影响的谱效关系,揭示中药路路通抗肝肿瘤作用的物质基础。方法 采用HPLC法建立路路通不同极性部位的指纹图谱,以人肝癌SMMC-7721细胞作为体外模型进行抗肝肿瘤药效学评价;运用灰色关联度及偏最小二乘法分析法,将指纹图谱共有峰相对峰面积与不同浓度体外药效抑制率进行关联,建立不同极性部位与体外抗肿瘤的谱效关系模型。结果 6个不同极性部位指纹图谱中共标识20个指纹峰,其中采用灰色关联度分析法,路路通药材与抗肝肿瘤相关系数大于0.8的色谱峰共15个,0.5 mg/mL与1 mg/mL给药浓度时筛选相似性100%;其中采用偏最小二乘分析法,路路通药材对抗肝肿瘤药效贡献较大色谱峰共13个,0.5 mg/mL与1 mg/mL给药浓度时筛选相似性100%。结论 经灰色关联度分析法与偏最小二乘法分析法筛选结果进行比对发现,二者共有11个色谱峰相同,相似性为84%;将不同数学方法引入中药活性部位谱效关系相关性评价中,能更加真实、客观地得到中药发挥药效的药效物质单体,该研究为开展基于谱效关系的中药药效物质筛选及预测提...