059来自体细胞克隆的人多能胚胎干细胞建系成功

自从1996年克隆绵羊多利的诞生和1998年人类胚胎干细胞第一次被分离出来,一直试图将两种技术结合起来,制造一种胚胎干细胞(ES细胞),这种干细胞带有与某个患者完全一样的基因组,随着细胞的分化,能被用来组织修复和器官移植而无免疫排斥,即治疗性克隆技术.以往报道人的ES细胞都是来自辅助生殖技术中获得的囊胚的内细胞团.首次报道通过人类体细胞核移植(SCNT)得到的人ES细胞.     

精子DNA碎片指数与精液参数的相关性分析

目的:探讨精子DNA碎片指数(DFI)与精液参数的关系,并评价其在男性精子质量评估中的应用价值。方法:收集9 694例男性精液标本,采用流式细胞仪辅助的精子染色质结构分析法(SCSA)进行精子DFI和高DNA着色性(HDS)检测,根据WHO《人类精液检查与处理实验室手册》(第5版)精液参数参考值标准分为正常组和异常组,异常组再依据精子浓度、精子总活率和前向运动精子百分率异常程度分为A组:精子浓度(11.3～14.0)×10~6/ml,精子总活率30%～39%,前向运动精子百分率24%～31%;B组:精子浓度(7.5～11.2)×10~6/ml,精子总活率20%～29%,前向运动精子百分率16%～23%;C组:精子浓度(3.8～7.4)×10~6/ml,精子总活率10%～19%,前向运动精子百分率8%～15%;D组:精子浓度(0～3.7)×10~6/ml,精子总活率0～9%,前向运动精子百分率0～7%;按照不同DFI值分为15%、15%～30%和30%3组。分析DFI与精液参数的关系。结果:正常组DFI均显著低于异常组及其亚组(P均0.01);各异常亚组(A、B、C、D组)随着精子指标的降低DFI逐渐升高(P0.01)。根据DFI分组,发现DFI与年龄、禁欲时间、精液体积、精液pH、精子浓度、精子总活率、前向运动精子百分率、正常形态精子百分率以及HDS的差异均有统计学意义(P均0.01);相关性分析表明DFI与年龄、禁欲时间、精液体积和HDS存在正相关(r分别为0.15、0.10、0.05、0.15,P均0.01),而与精液pH、精子浓度、精子总活率、前向运动精子百分率和正常形态精子百分率存在负相关(r分别为-0.06、-0.27、-0.53、-0.52、-0.16,P均0.01)。多重线性回归分析表明精子总活率、精子浓度、年龄、禁欲时间和精液pH是与DFI相关的5个重要相关变量,标准化回归系数分别为-0.47、-0.19、0.12、0.07、-0.04,P均0.01。结论:DFI与精液参数存在中等相关性,二者可协同评估男性精子质量。     

实时荧光定量PCR技术及在植入前遗传学诊断中应用

实时荧光定量聚合酶链反应技术是一种基于荧光共振能量转移原理进行核酸定量的新型技术,常用荧光检测系统主要包括SYBR Green Ⅰ染料、Taqman探针、分子信标探针、蝎子引物探针、杂交探针、LUXTM引物、Amplisensor探针等.目前该技术已成功应用于胚胎植入前遗传学诊断的性别鉴定、基因型分析、基因突变检测和基因表达研究等方面,具有潜在的应用价值.     

从非阻塞性无精症患者睾丸组织中分离出生殖干细胞并在体外分化成单倍体生殖细胞

非阻塞性无精症（NOA）患者能够通过胞浆内单精子注射（ICSI）或圆形精细胞卵浆内注射（ROSI）成功受孕，大多数成熟障碍（MA）或睾丸支持细胞综合征（SCOS）患者的精子在初级精母细胞阶段培养生殖细胞获得单倍体细胞而受孕。生殖干细胞（GSC）在成熟精子生成和自我更新间保持平衡，GSC自我更新生成的精子细胞移至不育男性的输精管。起源于胚胎干细胞单倍体生殖细胞在卵圆精子阶段在体外自发分化，引导生殖细胞发育、改变和生殖腺基因的改变。     

小鼠胚胎干细胞分化为精子细胞的研究进展

胚胎干细胞(ESCs)是一种具有分化发育为三个胚层组织细胞潜能的全能性细胞,哺乳动物的精子起源于原始生殖细胞(PGCs),ESCs可分化为PGCs,并进一步分化为精子细胞。通过在培养基中添加诱导分化因子(如维甲酸等)或与希望诱导分化的目的细胞(如Sertoli细胞等)共培养,并通过鉴别ESCs分化为生殖细胞的各阶段特异性基因标志物c-kit、VASA、DAZL、fragilis、miwi、mil1和mil2等,获取不同阶段的生殖细胞。鼠的ESCs已诱导出了不成熟的精子细胞,但到目前为止尚无成熟精子培养成功,且诱导分化的效率很低。     

卵巢组织冷冻和体外培养的现状及展望

卵巢组织冷冻对于生育力的保存有重要的作用，可以将多个原始卵泡保存起来，对于人类也可以避免伦理方面的难题。将原始卵泡培养成熟并发育成胚胎也是研究的热点之一，但是由于冷冻及体外培养系统的不完善，对于原始卵泡的体外成熟，尤其是人类的卵泡体外成熟仍然需要进一步的研究。对于卵巢组织冷冻的影响因素、冷冻方法、冷冻后的分析及卵泡体外成熟的培养液、培养方法及研究现状进行综述。